冰糖橙皮上曲酸高产菌的选育及发酵工艺研究

冰糖橙皮上曲酸高产菌的选育及发酵工艺研究发酵工程，2010，硕士【摘要】曲酸(Kojicacid),化学名5-羟基-2-羟甲基-1,4-吡喃酮,是由真菌好氧发酵产生的一种弱酸性次级化合物,其具有酪氨酸酶抑制能力、抑菌能力、对氧化酶的抑制作用以及对金属离子的螯合作用等,可作为美白祛斑剂、食品防腐剂和保鲜剂、止痛剂、杀虫剂、香料等应用于食品、化妆品、医药、农业等相关领域均有很大的应用价值。另外,曲酸还可以作为香料合成和可降解塑料合成的中间体等。由于目前国内外曲酸发酵生产技术尚不够成熟,市场上的曲酸供不应求,价格昂贵,因此必须大力开展曲酸发酵生产的研究。本文以冰糖橙皮作为材料,从霉变的冰糖橙皮上筛选优良的曲酸生产菌,通过不同的物理方法对其进行逐级诱变,同时对曲酸的发酵生产工艺进行了研究,最后对曲酸的提取方法进行了系统研究,研究主要结果如下：1.从霉变的冰糖橙皮中筛选获得一株具有优良性状的曲酸生产菌,曲酸产量达到15.68g/L,通过比较菌株的菌落特征和显微特征,鉴定此菌株为米曲霉,本研究将其编号为米曲霉A-55。2.以米曲霉A-55作为出发菌株,对其进行UV、微波和60Co三轮诱变：一,20W紫外灯距离30cm照射20mmin条件下获得米曲霉突变株UV-7...更多还原【Abstract】Kojicacid,aweakacid,whosechemicalnameis5-hydroxyl-2-hydroxymethyl-1,4-pyroneisasecondarycompoundsproducedbytheaerobicfungus.Ithastheabilityofinhibitingtyrosinase,bacteriaandoxidaseaswellastheeffectofchelatingtometalions,andithasgreatapplicationvalueinthefieldoffood,cosmetics,medicine,agricultureandotherrelatedfieldsasfrecklewhiteningagent,preservativeandpreservationagents,analgesics,pesticides,etc.Inaddition,kojicacidalsoca...更多还原【关键词】曲酸；筛选；诱变；响应面；优化；提取；【Keywords】kojicacid；screening；mutation；responsesurface；optimization；extract；摘要4-6ABSTRACT6-7缩略词表8-9目录9-131绪言13-241.1曲酸的结构及其性质13-151.1.1曲酸的分子结构13-141.1.2曲酸的理化性质141.1.3曲酸的生理活性14-151.1.4曲酸的毒理学151.2曲酸的应用15-181.2.1曲酸在食品方面的应用15-171.2.2曲酸在化妆品中的应用17-181.2.3曲酸在医药方面的应用181.2.4曲酸在农业中的应用181.2.5曲酸在其他方面的应用181.3曲酸的发酵法生产18-211.3.1曲酸生产菌种191.3.2曲酸发酵生产工艺条件19-211.3.3曲酸的提取211.4曲酸研究现状21-221.5曲酸研究目的意义及主要内容22-241.5.1本课题研究的意义221.5.2研究内容22-242曲酸生产菌的筛选及其鉴定24-312.1前言242.2材料与方法24-272.2.1材料与试剂242.2.2主要实验仪器242.2.3培养基及染色液24-252.2.4曲酸含量的测定25-262.2.5菌株筛选26-272.2.6菌种鉴定272.3结果与分析27-302.3.1菌种筛选27-282.3.2菌种鉴定结果28-302.4小结30-313曲酸生产菌的诱变选育31-423.1前言31-323.2材料与方法32-343.2.1菌种323.2.2主要试剂及诱变剂323.2.3主要实验仪器323.2.4培养基323.2.5诱变方法32-333.2.6诱变剂量和时间的确定333.2.7突变株筛选33-343.2.8遗传稳定性实验343.2.9突变株保藏343.3结果与分析34-403.3.1UV诱变34-373.3.2微波诱变37-383.3.3~(60)Co诱变38-403.4小结40-424曲酸发酵工艺研究42-584.1前言424.2材料与方法42-474.2.1菌种424.2.2试剂42-434.2.3主要实验仪器434.2.4培养基434.2.5分析方法43-454.2.6促进剂对曲酸生成的影响454.2.7单因素实验454.2.8Plackett-Burman试验设计45-464.2.9最陡爬坡试验设计464.2.10响应面试验设计46-474.3结果与讨论47-564.3.1不同促进剂对曲酸产量的影响47-484.3.2单因素的确定48-494.3.3Plackett-Burman设计法筛选影响产曲酸的主效因子49-514.3.4最陡爬坡实验51-524.3.5响应面分析法优化培养基52-564.4小结56-585曲酸的提取58-655.1前言585.2材料与方法58-605.2.1试剂585.2.2主要仪器58-595.2.3分析方法595.2.4曲酸粗制晶体的制备595.2.5活性炭脱色处理59-605.2.6离子交换树脂去除杂质605.3结果与分析60-635.3.1曲酸粗制晶体的制备60-615.3.2活性炭脱色参数的确定61-635.3.3离子交换树脂去除杂质的效果635.3.4曲酸精制晶体的获得635.4小结63-656结论与展望65-676.1结论65-666.2展望666.3创新点66-67参考文献