7-5注射剂

1第七章各种类型中药制剂的分析2第五节中药注射剂注射剂系指药材经提取、纯化后制成的供注入体内的溶液、乳状液及供临用前配制成溶液的粉末或浓溶液的无菌制剂。注射液、注射用无菌粉末、注射用浓溶液定义中将药材“提取的有效物质”改为“经提取、纯化后”;“灭菌制剂”改为“无菌制剂”。3例止喘灵注射液（麻黃、洋金花、苦杏仁、连翘）【制法】以上四味，加水煎煮两次，第一次1小时，第二次0.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至约150ml，用乙醇沉淀处理两次，第一次溶液中含醇量为70%，第二次为85%，每次于4℃冷藏放置24小时后滤过，滤液浓缩至约100ml，加注射用水稀释至800ml，预测含量，调节pH值，滤过，加注射用水至1000ml，灌封，灭菌，即得。【用法与用量】肌注。4例注射用双黄连（冻干）（连翘、金银花、黄芩）【性状】本品为黄棕色无定形粉末或疏松固体状物；味苦、涩；有引湿性。【用法与用量】静脉滴注。……临用前，先以适量灭菌注射用水充分溶解，再用氯化钠注射液或5%葡萄糖注射液500ml稀释。5照中国药典“制剂通则”注射剂（附录ⅠU）项下的规定检查。一、中药注射剂的一般质量要求中药注射剂直接注入人体，显效快，毒副反应也快，质量要求严格。6（一）配制注射剂前的半成品1.重金属≤10ppm（附录ⅨE第二法）2.砷盐≤2ppm（附录ⅨF第一法）71.装量注射液、注射用浓溶液照下述方法检查（二）注射剂一般检查项目8检查法注射液的标示装量为2.0ml或2.0ml以下者取供试品5支，2.0ml以上至10.0ml者取3支，10.0ml以上者取供试品2支；开启时注意避免损失，将内容物分别用相应体积的干燥注射器抽尽，然后注入标化的量具内在室温下检视；测定油溶液的装量时，应先加温摇匀，再用干燥注射器抽尽后，同前法操作，放冷至室温检视。每支注射液的装量均不得少于其标示量。注射液规格为50~500ml的按最低装量检查法（附录ⅫC）检查92.装量差异除另有规定外，注射用无菌粉末照下述方法检查。凡规定检查含量均匀度的注射用无菌粉末，一般不再进行装量差异检查。10平均装量装量差异限度≤0.05g±15%0.05~0.15g±10%0.15~0.5g±7%＞0.5g±5%11除另有规定外，照可见异物检查法（附录XJC）检查，应符合规定。澄明度3.可见异物124.不溶性微粒除另有规定外，溶液型静脉用注射液（水溶液）、溶液型静脉用注射用无菌粉末，及注射用浓溶液照不溶性微粒检查法（附录ⅨR）检查，应符合规定。13方法光阻法显微计数法规定增注射用浓溶液,修订注射用无菌粉末检查法(3个容器或25ml,测3次,取后二次均值,﹥10μm﹤6000,含﹥25μm﹤600；“注射剂中不溶性微粒检查法”（附录9R）145.有关物质按各品种项下规定，照注射液有关物质检查法（附录ⅨS）检查，应符合规定注射剂有关物质系指中药材经提取、纯化制成注射剂后，残留在注射剂中可能含有并需要控制的物质。15蛋白质、鞣质、树脂、草酸盐、钾离子、pH值16（1）蛋白质生产过程中如未能将蛋白质除尽，可能影响注射剂的稳定性、澄明度，还可能在注入人体后引起过敏反应。17蛋白质检查方法取注射液1ml，加新配制的30%磺基水杨酸试液1ml，混合，放置5分钟，不得出现浑浊。注射液中如含有遇酸能产生沉淀的成分可改加鞣酸试液1~3滴，不得出现混浊。（如黄芩素、蒽醌等）（比浊法）18（2）鞣质*易产生沉淀而影响澄明度，*注射后引起疼痛，甚至肌肉组织坏死19鞣质检查法取注射液1ml，加新配制的含1%鸡蛋清的生理盐水5ml[必要时用微孔滤膜(0.45μm)滤过]，放置10分钟，不得出现浑浊或沉淀。或取供试液1ml，加稀醋酸1滴，再加氯化钠明胶试液4~5滴，不得出现浑浊和沉淀。（比浊法）20（3）树脂取注射液5ml，加盐酸1滴，放置30分钟，应无絮状物析出。注射液中如含有遇酸能产生沉淀的成分，可改加氯仿10ml振摇提取，分取氯仿液，置水浴上蒸干，残渣加冰醋酸2ml使溶解，置具塞试管中，加水3ml，混匀，放置30分钟，应无絮状物析出。（比浊法）21（4）草酸盐中药材中的草酸一般以草酸钙形式存在，不会被水或有机溶剂提取。如用酸水或酸性乙醇提取，草酸钙可能混入药液中。草酸进入血液可使血液脱钙，产生抗凝血作用，甚至引起痉挛。并由于生成不溶于水的草酸钙，可引起血栓。溶液型静脉注射液22草酸盐检查法取注射液2ml，用稀盐酸调节pH值至1~2，滤过，滤液调节pH值至5~6，加3%氯化钙溶液2~3滴，放置10分钟，不得出现浑浊或沉淀。（比浊法）溶液型静脉注射液23（5）钾离子静脉注射用注射液*注射液中钾离子浓度过高，会引起明显的局部刺激，尤其对心脏的损害很大。*静脉注射时，如钾离子含量过高，注射后会引起体内血钾浓度偏高，使电解质平衡失调。*静注钾离子在1.0mg/ml以下。24取注射液2ml，蒸干，，先用小火炽灼至炭化，再在500~600℃炽灼至完全灰化，加稀醋酸使溶解，至25ml量瓶中，加水稀释至刻度，混匀，作为供试品溶液。取10ml纳氏比色管两支，甲管中精密加入标准钾离子溶液0.8ml，加碱性甲醛溶液（……）12滴、3%乙二胺四乙酸二钠溶液2滴、3%四苯硼钠溶液0.5ml，加水稀释成10ml，乙管中精密加入供试品溶液1ml，与甲管同时依法操作，摇匀，25甲、乙两管同置黑纸上，自上向下透视，乙管中显出的浊度与甲管比较，不得更深。标准钾离子溶液每ml相当于100g的K。266.无菌照无菌检查法（附录ⅩⅢB）检查，应符合规定。无菌检查法由培养7天修订为培养14天277.热原或细菌内毒素除另有规定外，静脉用注射剂按各品种项下的规定，照热原检查法（附录ⅩⅢA）或细菌内毒素检查法（附录ⅩⅢD）检查，应符合规定。28注射剂一般检查项目1.装量2.装量差异3.可见异物（澄明度）4.不溶性微粒5.有关物质6.无菌7.热原或细菌内毒素29（三）注射剂的安全性检查热原检查、刺激性检查、过敏试验、溶血与凝聚试验、异常毒性、降压物质家兔、家兔、豚鼠、兔或羊、小鼠、猫中药注射剂安全性检查法应用指导原则30例止喘灵注射液【检查】异常毒性取本品，加灭菌生理盐水制成每1ml含0.1ml的溶液，依法检查（二部附录ⅪC），按腹腔注射法给药，应符合规定。处方组成单味药材复方化学组成有效成分明确且较单一有效成分尚未明确或完全不明确大多较复杂新型中药制剂，生产历史不长，七十年代以后有较大发展，中药注射剂大多成分复杂，且为了改善溶解度、增加稳定性等需要加入附加剂，需要按照中药制剂的特点，检查一般项目和特殊项目二、中药注射剂质量分析特点32注意某些附加剂对分析的干扰（一）鉴别吐温80+生物碱→↓33（二）含量测定以有效成分或有效部位为组分的均以标示量的上下限范围表示以药材为组分的注射剂含量以限量表示34例止喘灵注射液（麻黄，洋金花，苦杏仁，连翘）【含量测定】总生物碱剩余碱滴定法。本品每1ml含总生物碱以麻黄碱（C10H15NO）计，应为0.50～0.80mg。东莨菪碱TLC-酸性染料比色法。本品每1ml含东莨菪碱（C17H21NO4）应为40～100g。35例注射用双黄连（连翘，金银花，黄芩）【含量测定】HPLC法绿原酸本品每支含金银花以绿原酸（C18H18O8）计，应为8.5～11.5mg。黄芩苷本品每支含黄芩以黄芩苷（C22H18O11）计，应为128～173mg。36（三）中药注射剂指纹图谱在固定中药材品种、产地和采收期的前提下，需制定中药材、有效部位或中间体、注射制剂的指纹图谱。现已用于中药注射剂的质量控制37中药指纹图谱中药材、中药注射剂经适当处理后，采用一定的分析手段、得到的能够标示该中药材、注射剂特性的色谱或光谱图。《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求（暂行）》1999.4中药化学指纹图谱38*中药指纹图谱是一种综合的、可量化的鉴定手段。*以中药成分系统研究为基础*应用：鉴别真伪，评价原药材半成品及制剂质量的均匀性和稳定性*整体性，模糊性391.中药指纹图谱分类TLC、HPLC、GC、HPCE、UV、IR、NMR、MS、X-射线衍射、DNA指纹图谱401.建立中药指纹图谱原则*系统性*特征性*稳定性广泛代表性的样品收集412.指纹图谱及技术参数*指纹图谱记录时间与范围*共有指纹峰的标定*共有指纹峰面积的比值*非共有峰面积*中药材、有效部位、中间体和注射液指纹图谱的相关性42中药注射液中若含有遇酸能产生沉淀的成分如黄芩苷、蒽醌类等成分，做蛋白质检查时，可用A30%磺基水杨酸试液B硫代乙酰胺溶液C四苯硼钠溶液D鞣酸E氯化鈣试液D43下列注射剂检查项目中属于安全性检查的项目有A重金属检查B热原检查C刺激性检查D鞣质检查E溶血试验BCE44陈皮与枳壳的薄层色谱45DNA指纹图谱中药DNA分子鉴定是运用DNA分子标记技术对含原生药的中药制剂及其基原进行真伪优劣的鉴定。特异性强稳定性好微量便捷准确46特别适合近缘品种易混淆品种珍贵品种动物药材破碎药材陈旧药材腐烂药材样品量极为有限的植物模式标本、中药出土标本、古化石标本等珍贵样品的鉴定。47DNA指纹图谱技术•RFLP(RestrictionFragmentLengthPolymorphism)（限制性内切酶酶切片段长度多态性）•AFLP（AmplifiedFragmentLengthPolymorphism）(扩增片断长度多态性)•RAPD（randomamplifiedpolymorphicDNA）（随机扩增多态性DNA）48RFLP限制性内切酶酶切片段长度多态性49505152535455XspI