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博学之,审问之,慎寺之,明辩之,笃行之。精心整理,欢迎收藏1辐射诱发的染色体畸变黄波博学之,审问之,慎寺之,明辩之,笃行之。精心整理,欢迎收藏2目的掌握辐射对染色体损伤的原理掌握染色体样品的制作程序熟悉染色体样品的分析博学之,审问之,慎寺之,明辩之,笃行之。精心整理,欢迎收藏31.染色体是DNA和蛋白质的复合体,对电离辐射十分敏感;2.基因组DNA是辐射作用最基本的靶分子;3.染色体畸变是反应辐射损伤的良好指标,它既能察觉辐射损伤和评价损伤程度,又能估算受照剂量。Chromosome原理博学之,审问之,慎寺之,明辩之,笃行之。精心整理,欢迎收藏4人类染色体:•染色体(chromosome):有丝分裂中期核内易被碱性染料着色的丝状或棒状小体;•染色体功能:因为有能自我复制的基因,因而有存储、传递遗传信息,调控细胞分化、发育的功能。•染色体是DNA和蛋白质的复合体,对电离辐射十分敏感;博学之,审问之,慎寺之,明辩之,笃行之。精心整理,欢迎收藏5男:46,XY女:46,XX博学之,审问之,慎寺之,明辩之,笃行之。精心整理,欢迎收藏6人类正常男性染色体组型博学之,审问之,慎寺之,明辩之,笃行之。精心整理,欢迎收藏7诱发畸变(inducedaberration)人为产生物理化学生物染色单体型多倍体、非整倍体、核内复制单体断裂、单体互换结构畸变数量畸变染色体型染色体畸变自发畸变(spontaneousaberration)随机发生f:0.5%,dic:0.05%博学之,审问之,慎寺之,明辩之,笃行之。精心整理,欢迎收藏8辐射诱导的染色体畸变电离辐射(X、r、中子)细胞内产生次级电离离子能量沉积细胞原子非特异性电离自由基或间接引起继发反应分子改变靶细胞DNA损伤修复/未修复、误修复点突变(pointmutation)CA博学之,审问之,慎寺之,明辩之,笃行之。精心整理,欢迎收藏9步骤1.用经肝素湿润的2毫升注射器,自静脉或耳垂、手指取血0.5-1.0毫升。2.每5毫升培养基中加全血0.3-0.4毫升,塞紧瓶塞后置37℃箱中培养72小时。3.秋水仙素处理:培养至68小时左右,在火焰保护下加适量秋水仙素(用1毫升注射器,5号针头),每毫升培养基中加一滴4微克/毫升的秋水仙素溶液,使终浓度为0.05微克/毫升培养基,以使细胞抑止在分裂中期。摇匀后,继续培养4小时即可进行染色体制片。适量的秋水仙素,适宜的处理时间,是获得良好分裂相的先决条件。这将影响分裂相的多少和染色体的长短。4.低渗处理:用吸管温和吹打细胞悬液,移入10毫升离心管中,1000rpm离心10分钟(或3500rpm离心1分钟),弃上清液。加入少量预热(37℃)的0.075MKCl,吹打成细胞悬液后,加入预热的低渗液6-8毫升,37℃低渗处理25分钟。在整个操作过程中,要注意不要将细胞吸到吸管上部,也不要接触离心管的上部,否则将会丢失许多细胞。博学之,审问之,慎寺之,明辩之,笃行之。精心整理,欢迎收藏105.固定:预固定:低渗处理后,向低渗液中加入新鲜配制的1-2毫升固定液(3:1=甲醉:冰醋酸)进行预固定,以防上低渗处理后的细胞在离心时结团。固定液要沿管壁缓缓加入,然后用吹气的方法混匀。第一次固定:预固定1-2分钟后,离心去上清液(离心速度同上)。然后向离心管加入0.5毫升左右的固液,将细胞轻轻吹打成细胞悬液后,加固定液3--5毫升。混匀后固定15-30分钟。第二次固定:离心后去上清液,加固定液3--5毫升,混匀后固定15-30分钟。第三次固定:操作同前。第三次固定后,经离心后去掉大部上清液,只留0.1-0.2毫升固定液,混匀后即可滴片制作染色体。第二次固定后也可静置至第二天,吸去部分上清液后,即可进行制片。固定液要新鲜配制,否则将会形成酯类,从而影响固定的效果。博学之,审问之,慎寺之,明辩之,笃行之。精心整理,欢迎收藏116.滴片:使用以高纯水制备的冰水片进行滴片。用吸管吸取细胞悬液,距玻片5厘米左右的距离滴片。每张载片滴1--3滴(根据细胞悬液的浓度)。滴片后斜放,室温中空气干燥。亦可滴片后立刻用嘴轻轻吹片,可帮助细胞和染色体分散。滴片是制备染色体的最后一步,也是非常关键的一步,首先载片要非常于净,否则将含影响染色体的分散和分带的效果。其次,滴片的距离、滴加量的多少,制片的方式都会影响到染色体分散的效果。7.Giemsa染色:取1--2张片(多数制片留下来做分带)用约3毫升Giemsa染液进行扣染。染液为1/10的Giemsa染液。染色30分钟后,自来水冲洗,凉干。博学之,审问之,慎寺之,明辩之,笃行之。精心整理,欢迎收藏12DicFChromosomeAberration博学之,审问之,慎寺之,明辩之,笃行之。精心整理,欢迎收藏13BDicEFChromosomeAberration博学之,审问之,慎寺之,明辩之,笃行之。精心整理,欢迎收藏14mFChromosomeAberration博学之,审问之,慎寺之,明辩之,笃行之。精心整理,欢迎收藏15思考题染色体畸变的类型有哪些
本文标题:辐射诱发染色体畸变
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