DAB显色试剂盒说明书

产品说明书/SpecificationSheet地址:上海市松江区香闵路698号Add:698XiangMinRoadSongJiangShanghaiChina电话/Tel:[phone]传真/Fax:[phone]技术支持/Support:800-820-1016邮箱/Email:[e-mail]网址/Web:显色试剂盒产品编号：PW017产品简介：DAB即：二氨基联苯胺（3，3’-diaminobenzidine）是过氧化物酶（Peroxidase）的生色底物，在过氧化氢的存在下失去电子而呈现出颜色变化和积累，形成浅棕色不溶性产物。用于检测过氧化物酶的活性，它灵敏度高，特异性好。是HRP结合物最常用的底物,常在免疫组化,原位杂交,Westernblot等膜显色或检测细胞或组织内源性的过氧化物酶中应用广泛。运输和保存条件：常温下运输，收到后，将溶液A,溶液C在-20度闭光的环境中保存，反应液2-8度保存，保质期一年。组成:本试剂是为免疫组化,原位杂交,Westernblot等膜显色专门配制的,由反应液,溶液A,溶液C三部分构成:能够使用5次1:PW017-1反应液50ml2:PW017-2溶液A1ml3:PW017-3溶液C0.12ml使用方法:1:在免疫印迹(westernblot)实验中,先将相应的HRP（辣根过氧化氢酶）标记的二抗覆盖膜后,在37度的情况下,于震荡器上,震荡一个半小时左右,再用TBST或者PBST洗涤膜3~4次,最后一次用TBS或PBS洗涤膜,再将膜转移到阴暗处。2:显色前,先取反应液10ml在一个15ml的干净棕色瓶子中，再取200ul左右的溶液A和溶液C20ul形成显色工作液,加入充分混刀。3在阴暗处.将显色工作液加入膜上,将膜覆盖,在37度的情况下,震荡反应十分钟左右即可.这时浅棕色的条带出现。4倒掉反应液，双蒸水冲洗条带3~4次，自然干燥。5照像记录实验结果。注意事项:1:溶液A在使用之前，37度温育10分钟，以免产生沉淀。2:显色时间严格控制，非常小心，一般10分钟左右。以免造成过度显色，而且显色后数小时将会褪色。3:请使用完后，将反应液，溶液A,溶液C的盖子旋紧,以防止溶液挥发和与空气中的成分发生化学反应。4:推荐所配试剂的量适合于6X8cm的膜，如果膜较大,请适当增加所配试剂的量,以便完全覆盖膜。5:请正确配制Westernblot所需要的试剂,正确的膜转移,抗体的稀释和冲洗步骤,以保证能够显色和减少杂带的产生。6:DAB在常温下不稳定，易氧化分解，溶液A,溶液C在-20度闭光的环境中保存。同时做好防护，因为溶液A有一定的致癌性。7：显色工作液应现用现配，新鲜配制的工作液应为无色或浅棕色，如颜色过深，请勿使用。8：请将沾有溶液A的容器等放在含有3%KMnO4,2%NaCO3的溶液浸泡三小时,以减少污染。9:本试剂只能够用于体外实验,不能够用于临床,治疗,动物体内实验等目的,由此产生的后果,概不承担责任。