Kozak序列与IRES的区别

Kozak序列与IRES的区别Kozak序列和IRES序列都可以行使翻译起始功能，但它们是有质的区别的。Kozak序列是位于真核生物mRNA5’端帽子结构后面的一段核酸序列，通常是ACCACCATGG，它可以与翻译起始因子结合而介导含有5’帽子结构的mRNA翻译起始。对应于原核生物的SD序列。IRES（（internalribosomeentrysite）则是一些微小RNA病毒含有的能在真核细胞内模拟5’帽子结构行使翻译起始作用的特殊序列。IRES序列常用于多顺反子基因表达。例如，在目的基因之后插入IRES序列，后面是选择标记基因，这样转录出来的mRNA就可以同时表达两种蛋白，选择标记基因翻译是通过不依赖于5’帽子的作用进行的首先需要从IRES的实质意义谈起.一般真核mRNA的翻译都需要5‘帽子来介导核糖体结合，微小RNA病毒家族则例外。这类病毒在其mRNA前没有帽子位点，但却有600~1200bp的5’非翻译区，其中含有多个非起始AUG，这段长的非翻译区叫做内部核糖体进入位点序列（Internalribozymeentrysite,IRES).IRES能招募核糖体对mRNA进行翻译。将IRES与外源cDNA融合，发现IRES能独立地起始翻译。利用这一特性,IRES目前已被广泛应用于双元表达载体的构建,但应该注意的是,(1).它毕竟不是传统意义上的Promoter,其活性是很低的(准确的说是其翻译效率低所致),这就是为什么IRES-EGFP作为示踪表达时,其荧光很弱的原因所在,它远弱于CMV作为启动子的表达..(2).IRES没有一个严格意义上的融合表达要求,至少在其即刻上游或即可下游处添加10-15个碱基不会对其下游的CDS翻译产生实质性的变化.很奇怪,上面的帖子怎么在一行还没有结束时就换行了?这让人看起来有点费解.我重新编辑粘贴一次看是否能改过来.要深刻了解这一问题,首先需要从IRES的实质意义谈起.一般真核mRNA的翻译都需要5‘帽子来介导核糖体结合，微小RNA病毒家族则例外。这类病毒在其mRNA前没有帽子位点，但却有600~1200bp的5’非翻译区，其中含有多个非起始AUG，这段长的非翻译区叫做内部核糖体进入位点序列（Internalribozymeentrysite,IRES).IRES能招募核糖体对mRNA进行翻译。将IRES与外源cDNA融合，发现IRES能独立地起始翻译。利用这一特性,IRES目前已被广泛应用于双元表达载体的构建,但应该注意的是,(1).它毕竟不是传统意义上的Promoter,其活性是很低的(准确的说是其翻译效率低所致),这就是为什么IRES-EGFP作为示踪表达时,其荧光很弱的原因所在,它远弱于CMV作为启动子的表达..(2).IRES没有一个严格意义上的融合表达要求,至少在其即刻上游或即可下游处添加10-15个碱基不会对其下游的CDS翻译产生实质性的变化.不知楼上的“即可上游或即可下游”是什么意思呀？GCCCCTCTCCCTCCCCCCCCCC（测序少了1个C）TAACGTTACTGGCCGAAGCCGCTTGGAATAAGGCCGGTGTGCGTTTGTCTATATGTTATTTTCCACCATATTGCCGTCTTTTGGCAATGTGAGGGCCCGGAAACCTGGCCCTGTCTTCTTGACGAGCATTCCTAGGGGTCTTTCCCCTCTCGCCAAAGGAATGCAAGGTCTGTTGAATGTCGTGAAGGAAGCAGTTCCTCTGGAAGCTTCTTGAAGACAAACAACGTCTGTAGCGACCCTTTGCAGGCAGCGGAACCCCCCACCTGGCGACAGGTGCCTCTGCGGCCAAAAGCCACGTGTATAAGATACACCTGCAAAGGCGGCACAACCCCAGTGCCACGTTGTGAGTTGGATAGTTGTGGAAAGAGTCAAATGGCTCTCCTCAAGCGTATTCAACAAGGGGCTGAAGGATGCCCAGAAGGTACCCCATTGTATGGGATCTGATCTGGGGCCTCGGTG（测序G变为A）CACATGCTTTACATGTGTTTAGTCGAGGTTAAAAAAACGTCTAGGCCCCCCGAACCACGGGGACGTGGTTTTCCTTTGAAAAACACGATGATAATATGGCCACA我知道IRES非表达序列，不知这种错误是否将影响其后面EGFPtk的表达还请高手赐教！！万分感激！！