真菌合成紫杉醇

真菌合成紫杉醇绪论介绍了紫杉醇的发现历史，及利用terpenoid合成紫杉醇的情况。关键词：Taxolbiosynthesis.Endophyticfungi.Taxanes.Terpenebiosynthesis.Taxomycesandreanae材料及方法材料：红豆杉提取物红豆杉树皮70%乙醇25mg/LstreptomycinPDA琼脂固体培养基（0.4%(w/v)glucose,0.4%(w/v)yeastextract,2%(w/v)maltextract,pH6.3,1.5%(w/v)agar-agar）1.红豆杉中分离内生真菌①红豆杉中提取内生菌②移去树皮分部，并用70%乙醇消毒树皮表面5MIN③剥离树皮内层置于PDA琼脂培养基中，加入25mg/Lstreptomycin④室温培养，直至真菌群可见⑤转移至新的培养基，用高端的菌丝培养法培养2.培养内生真菌①1中培养的菌丝转移到PDA固体培养基中培养②每周切一块过度生长的琼脂块移植于新的培养基中，培养基中加入0.6–10LYM-6.3medium，然后在黑暗中以120rpm转速培养三周③菌丝同样地在S7培养基中培养，以观察紫杉醇的生成3.紫杉醇的萃取①等体积氯仿萃取两次，取有机相，然后用硫酸镁干燥，蒸干，残渣用3-5ml甲醇溶解②冻干叶子+二氯甲烷/乙醇（1:1，v:v）于提取器中提取，提取物如①中蒸干，干燥，再用二氯甲烷溶解③用水冲洗两次，然后取有机层蒸干，硫酸镁干燥，残渣用乙醇溶解4.抗紫杉烷免疫检测①紫杉烷标准曲线的绘制111,37,12.33,4.11,1.37,0.46and1.15ng/mL的紫杉醇溶液，按tableS1加入相应的物质稀释LC/MS/MSanalysis