ITC操作

1，开机程序打开插座电源→开启ITC200电源→开启电脑→点击ITC200withOrigin2，样品池及针头自动清洗将抬头样品池洗涤管插入样品池。带管螺丝小心轻旋到针头连杆上部小孔，切不可用力，防止针头玻璃管破裂！进入ITC200withOrigin操作界面，InstrumentControls→AccessoryStation→CellandSyringeWash(10min左右)。3，针头自动干燥同样InstrumentControls→AccessoryStation→DrySyringe4，样品池及参比池手动清洗待自动清洗干燥完成后，将样品池洗涤管回位。圆心处小孔通往样品池(体积约为300uL)，旁边小孔通往参比池(如果实验所用缓冲液为水相，参比选为ddH2O即可)。利用微型注射器吸取ddH2O将样品池及参比池洗涤3次以上，样品池另用实验Buffer洗涤三次。将参比池加满ddH2O，用微型注射器轻轻搅拌，除去气泡，同时将边缘溢出水吸干。5，上样蛋白：用微型注射器小心抽取蛋白样品(400uL左右，稍微过量)，防止针管中形成气泡，可以将针头朝下，轻弹管壁。将微型注射器插入样品池，待接触底部后稍微提起，轻缓推出，待样品从小孔溢出后小心提起注射器，沿小孔边缘把多余样品吸走即可。小分子：将配置好的小分子转移至PCR管(体积约为100uL，过量)，置于ITC200台中LOAD位置，从CLEARDRY位置将针头移动至LOAD位置。点击InstrumentControls→AccessoryStation→SyringeFill，机器自动将吸取小分子样品(在针头上端可以观察到针管将小分子样品抽走，其自动往复推打几次，防止生成气泡)，将针头移动到最高位置，取下连杆上所接带管螺丝，小心将针头插入样品池，准备就绪！6，界面操作AdvancedExperimentalDesignTotal﹟Injections:20；(滴加点数设置)Celltemperature(℃):25(实验温度)ReferencePower(uCal/sec)(0-12.25):5InitialDelay(sec):60SyringeConcentration(mM):2(小分子浓度)CellConcentration(mM):0.4(蛋白浓度)StirringSpeed(0-2000rpm):1000(搅拌速度)DataFileName:2hwb7aatp.itc(文件名，必须改)Setup→UserSetupDataFilePath…C:\ITC200\data\smyj\caocy-group(必须改)SetupFilePath…C:\ITC200\Data(必须改)InitSetupFile…Lastrun1.inj(不可改)Start7，按照2,3,4步骤洗涤针头及样品池，参比池，将带管螺丝，样品池洗涤管复位，样品池用塞子塞住。8，关机程序推出程序→关闭ITC200→关闭计算机→关闭插座电源