高中生物新课标人教版课件PCR技术

课题2多聚酶链式反应（PCR)扩增DNA片段温故知新1组成DNA分子的基本单位是什么?这些基本单位是如何连接成DNA分子的?DNA分子结构有什么特点？脱氧核苷酸脱氧核苷磷酸脱氧核糖含氮碱基嘌呤嘧啶腺嘌呤（A）鸟嘌呤（G）胞嘧啶（C）胸腺嘧啶（T）12345碱基OHOOPOHOOHOOPOHO碱基OHOHOOPOHO碱基OOHOOPOHOOH碱基碱基脱氧核糖磷酸基团碱基脱氧核糖碱基脱氧核糖5’3’脱氧核苷酸链结构简图磷酸二酯键5’5’3’3’DNA分子的复制需要哪些条件？DNA分子的复制过程是怎样的？温故知新2DNA母链：提供复制的模板解旋酶：打开DNA双链4种脱氧核苷酸：合成子链的原料DNA聚合酶：催化合成DNA子链ATP：为复制过程提供能量引物：使DNA聚合酶从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸DNA复制的条件一、PCR原理：PCR（多聚酶链式反应）技术是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它能以极少量的DNA为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。利用了DNA的热变性原理，通过控制温度来控制双链的解聚与结合。DNA母链：提供复制的模板解旋酶：打开DNA双链4种脱氧核苷酸：合成子链的原料DNA聚合酶：催化合成DNA子链ATP：为复制过程提供能量引物：使DNA聚合酶从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸PCR反应的条件80—100℃耐热的DNA聚合酶缓冲溶液：维持反应的pH值不变二、PCR反应的过程1、变性：温度上升到90℃以上时,双链DNA解聚成为单链。2、复性（退火）：温度下降到50℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。3、延伸：温度上升到72℃左右,溶液中的4种脱氧核苷酸在TaqDNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对的原则合成新的DNA链。