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高二生物选修3导学提纲(二)专题1基因工程1.2基因工程的基本操作程序执笔人:侍东升[教学目标]1、简述基因工程原理及基本操作程序。2、尝试设计某一转基因生物的研制过程。[教学重点和难点]1、教学重点基因工程基本操作程序的四个步骤。2、教学难点(1)从基因文库中获取目的基因。(2)利用PCR技术扩增目的基因。[教学过程]一、目的基因的获取:1.目的基因:符合人们需要的,编码蛋白质的。2.获取目的基因的方法(1)从基因文库中获取目的基因①基因文库:将含有某种生物不同基因的许多,导人受体菌的群体中,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库。基因组文库:含有一种生物的基因②种类cDNA文库:含有一种生物的基因③目的基因的获取根据基因的有关信息:基因的序列、基因在上的位置、基因的产物mRNA、基因的产物蛋白质等特性获取目的基因。(2)利用PCR技术扩增目的基因。①PCR:是一项在生物体外特定DNA片段的核酸合成技术。②条件:已知目的基因的序列。③过程:目的基因DNA受热形成,与结合,然后在______的作用下进行延伸形成DNA。④方式:指数扩增=2n(n为扩增循环的次数)(3)人工合成法:基因较小,核苷酸序列已知,可以人工合成。例1下列获取目的基因的方法中需要模板链的是()①从基因文库中获取目的基因②利用PCR技术扩增目的基因③反转录法④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成A.①②③④B.①②③C.②③④D.②③二、基因表达载体的构建1.表达载体的组成:目的基因+++标记基因等。2.启动子:位于基因的,它是结合的部位,驱动基因转录产生mRNA。3.终止子:位于基因的,终止。4.表达载体的功能:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且给下一代;使目的基因____和发挥作用。5.标记基因:受体细胞是否含有目的基因。6.不同的受体细胞及目的基因导入受体细胞的方法不同,基因表达载体的构建上也会有所差别。例2科学家在培育抗虫棉时,经过了许多复杂的过程和不懈的努力,才获得成功。起初把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因插入载体质粒中,然后导入棉花的受精卵中,结果抗虫基因在棉花体内没有表达。然后在插入抗虫基因的质粒中插入启动子(抗虫基因首端),导人棉花受精卵,长成的棉花植株还是没有抗虫能力。科学家又在有启动子、抗虫基因的质粒中插入终止子(抗虫基因末端),导入棉花受精卵,结果成长的植株,有了抗虫能力。由以上过程推知,作为目的基因的运载体应具备的结构是()A.目的基因、启动子B.目的基因、终止子C.目的基因、启动子、终止子D.目的基因、启动子、终止子、标记基因三、将目的基因导入受体细胞(一)转化:目的基因进人受体细胞内,并在受体细胞内维持稳定和的过程。(二)方法1.将目的基因导入植物细胞(1)农杆菌转化法①农杆菌特点:易感染植物和裸子植物,对___________植物没有感染力;Ti质粒的可转移至受体细胞,并整合到受体细胞的染色体上。②转化:目的基因插人进入农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。(2)基因枪法基因枪法:是单子叶植物中常用的一种基因转化方法,但是成本较高。(3)花粉管通道法花粉管通道法:这是我国科学家独创的一种方法,是一种十分简便经济的方法。(我的的转基因抗虫棉就是用此种方法获得的)2.将目的基因导入动物细胞(1)方法:注射技术。(2)操作程序:目的基因表达载体→取卵(受精卵)→显微注射→注射了目的基因的受精卵移植到____性动物的_________________________内发育→新性状动物。3.将目的基因导人微生物细胞(1)原核生物特点:繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等。(2)转化:处理细胞→细胞→表达载体与感受态细胞混合→_________细胞吸收DNA分子。例3采用基因工程的方法培育抗虫棉,下列导入目的基因的做法正确的是()①将毒素蛋白注射到棉受精卵中②将编码毒素蛋白的DNA序列,注射到棉受精卵中③将编码毒素蛋白的DNA序列,与质粒重组,导人细菌,用该细菌感染棉的体细胞,再进行组织培养④将编码毒素蛋白的DNA序列,与细菌质粒重组,注射到棉的子房并进入受精卵A、①②B、②③C、③④D、①④四、目的基因的检测与鉴定1.检测(1)方法:标记了的、抗原抗体杂交。(2)内容①检测转基因生物染色体的DNA是否插入。②检测目的基因是否转录。③检测目的基因是否翻译成。2.鉴定:鉴定、抗病鉴定等。例4下图是将人的生长激素基因导人细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图,所用载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A,也不含质粒A上的基因,质粒A导人细菌B后,其上的基因能得到表达。请回答下列问题:(1)目前把重组质粒导入细菌细胞时,效率还不高,导入完成后得到的细菌,实际上有的根本没有导入质粒,有的导入的是普通质粒A,只有少数导入的是重组质粒。以下步骤可鉴别得到的细菌是否导人了质粒A或重组质粒:将得到的细菌涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上,能够生长的就导人了质粒A或重组质粒,反之则没有。使用这种方法鉴别的原因是______________________________________________。(2)若把通过鉴定证明导人了普通质粒A或重组质粒的细菌放在含有四环素的培养基上培养,会发生的现象是_______________________________。原因是:________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)导人细菌B细胞中的目的基因成功表达的标志是什么?_________________________________________________________________________________________________________________________________________。答案:(1)普通质粒A和重组质粒都含有抗氨苄青霉素基因(2)有的能生长,有的不能生长期导入普通质粒A的的细菌能生长,因为普通质粒A上有抗四环素基因;导入重组质粒的细菌不能生长,因为目的基因插在四环素基因中,抗四环素基因中,抗四环素基因的结构被破坏(3)活动是受体细胞通过转录、翻译合成相应的蛋白质,即人的生长激素。课堂巩固:一、选择题:1、下列属于获取目的基因的方法的是()①利用mRNA反转录形成②从基因组文库中提取③从受体细胞中提取④利用PCR技术⑤利用DNA转录⑥人工合成A.①②③⑤B.①②⑤⑥C.①②③④D.①②④⑥2、不属于目的基因与运载体结合过程的是()A.用一定的限制酶切割质粒,露出黏性末端B.用同种限制酶切割目的基因,露出黏性末端C.将切下的目的基因插入到质粒的切口处D.将重组DNA引入到受体细胞中进行扩增3、分辨基因工程是否成功是通过()A.提取目的基因B.基因表达载体的构建C.目的基因导人受体细胞D.目的基因的检测与鉴定4.下列不属于获取目的基因的方法的是()A.利用DNA连接酶复制目的基因B.利用DNA聚合酶复制目的基因C.从基因文库中获取目的基因D.利用PCR技术扩增目的基因5.哪项不是基因表达载体的组成部分()A.启动子B.终止密码C.标记基因D.目的基因6.在胰岛素的基因与质粒形成重组DNA分子的过程中,下列哪组是所需要的()①同一种限制酶切割两者;②不需同一种限制酶切割两者;③加入适量的DNA连接酶;④不需加DNA连接酶A.①③B.①④C.②④D.②③7.下列说法中正确的是()A.基因表达载体的构建方法是一致的B.标记基因也叫做抗生素基因C.显微注射技术是最为有效的一种将目的基因导入植物细胞的方法D.大肠杆菌是常用的微生物受体8、下列哪项不是将目的基因导入植物细胞的方法()A.基因枪法B.显微注射法C.农杆菌转化法D.花粉管通道法9.基因工程中常用的受体细胞不包括()A.人体细胞B.动物细胞C.植物细胞D.微生物细胞10.基因工程中科学家常采用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞。下列不属于这样做的原因的是()A.结构简单,多为单细胞B.繁殖速度快C.遗传物质含量少D.性状稳定,变异少11.要检测目的基因是否成功的插入了受体DNA中,需要用基因探针,基因探针是指()A.用于检测疾病的医疗器械B.用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子C.合成一球蛋白的DNAD.合成苯丙羟化酶的DNA片段12.基因工程的正确操作步骤是()①构建基因表达载体②将目的基因导入受体细胞③检测目的基因的表达是否符合特定性状要求④取目的基因A.③②④①B.②④①③C.④①②③D.③④①②13.下列有关基因工程技术的叙述,正确的是()A.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶和基因进入受体细胞的载体B.所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C.选用细菌作为重组质粒的受体细胞主要是因为细菌繁殖快、遗传物质少D.只要目的基因进入受体细胞就能成功实现表达14.基因工程中不会出现()A.DNA连接酶将黏性末端的碱基连接起来B.限制性内切酶可用于目的基因的获取C.目的基因必须有载体导入受体细胞D.人工合成目的基因不用限制性核酸内切酶15、下列哪项不是基因工程技术()A.基因转移B.基因扩增C.基因检测D.基因表达(二)填空题:16.根据下列所给材料回答问题:材料一把人的胰岛素基因拼接到大肠杆菌的质粒上,然后导入大肠杆菌内,产生出人的胰岛素。材料二把萤火虫的荧光基因转入烟草体内,培育荧光的烟草。材料三有人把蜘蛛产生丝腺蛋白的基因转入羊的细胞屯,在羊分泌的乳汁中加入某种物质后,可抽出细丝,这种细丝可望用作手术的缝合线。(1)上述生物新品种的产生运用了技术。(2)一种生物的基因在另一种生物体内能够表达,而不影响其他基因的表达,这说明基因是有___________效应的片段,具有一定的性;同时可以说明各种生物共用一套。(3)上述技术所用的工具酶有。(4)材料三中所用缝合线与普通缝合线相比有何优点?。(5)可遗传的变异分为三种:、、,而基因工程改变一个物种的基因属于。(6)从上述所给的材料,不能得出哪一结论()A.动植物之间可以相互转基因B.真核生物与原核生物之间可以相互转基因C.基因工程可以定向地改变生物的基因D.转基因生物的出现对生物的进化是有利的17.人体受病毒刺激后,可以产生干扰素,干扰素分为、、三类,1980年,生物学家成功破译了干扰素的全部遗传信息,并运用插入质粒的方法,用大肠杆菌生产得到干扰素可以用于治疗肝炎和肿瘤,回答下列问题:(1)上述材料中涉及的现代生物技术有。(2)在利用大肠杆菌生产干扰过程中,目的基因是,所用载体是。表达载体的结构组成包括____、____、_____、______。(3)目的基因在大肠杆菌中表达时,必须经过和过程。答案:题号12345678答案DDDABADB题号9101112131415答案ADBCCAD16、基因工程遗传DNA独立密码子限制酶DNA连接酶可以被分解吸收,不用拆线基因重组基因突变染色体变异基因重组D17、基因工程干扰素基因质粒目的基因启动子终止子标记基因转录翻译
本文标题:高二生物选修3导学提纲12
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