miRNA讲解ppt

miRNA〇、何为miRNA单链单链单链非编码单链RNA调控基因表达的小分子19-25个核苷酸长度一、miRNA发现历程、起源和成熟(效应)过程发现历程—从线虫说起生物研究的新星素材—秀丽隐杆线虫CaenorhabditiselegansCelegansSydneyBrennerIt’smydiscoveryRNA-inducedsilencingcomplex二、miRNA的主要功能主要功能：调节基因表达主要实现方法：转录后基因沉默（Post-transcriptionalGeneSilencing）RNA干扰简介RNA干扰（RNAinterference,RNAi）是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA（double-strandedRNA，dsRNA）诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。双链双链双链SiRNASmallinterferingRNA项目siRNAmiRNA相同点长度特征都是约为22nt的小分子合成底物均由双链RNA或RNA前体加工而来Dicer酶均需Dicer酶来加工Argonaute蛋白均需Argonaute蛋白参与RISC均是RISC组分，在介导沉默机制上有相似之处作用方式均可导致mRNA的稳定性降低不同点机制性质一般是外源引起，如病毒感染和人工插入dsRNA诱导生成是生物体正常的调控机制直接来源长链dsRNA发夹状pre-miRNA分子结构双链RNA单链RNA生物合成机制由dsRNA在dicer酶切割下产生较复杂机制互补性一般完全互补一般存在错配现象加工过程对称地剪切来源双链RNA前体的两个侧臂不对称加工，仅剪切pre-miRNA的一个侧臂，另一个降解生物学功能不参与生物发育，是RNAi的产物，原始作用是抑制转座子活性与抵抗病毒感染主要在发育过程中发挥作用，调节内源性基因表达如何从实验上区分siRNA和miRNA?Northen杂交其他的一些可能与基因沉默相关的RNA简介短发夹RNAshRNA(ShorthairpinRNA)siRNA在实验室条件下，只能作用几天，因为这个需要发展了shRNAshRNA是在设计的两段siRNA两边加上一段序列、中间加上一段loop回文序列以后形成的可以连接到载体上、并通过载体能进入细胞中稳定表达的形式循环相关小干扰RNA（RasiRNARepeatassociatedsmallinterferingRNA）特点：1.长度约24-31个核苷酸2.不需要Dicer酶参与3.RasiRNA仅来自双链DNA的反义链反式作用干扰小RNA（ta-siRNAs）ta-siRNA是一类植物特有的小RNAta-siRNA的产生需要由miRNA的剪切引发，之后通过siRNA途径形成。是内源性的siRNAPiwi蛋白相作用RNApiRNA（Piwi-interactingRNA）与PIWI蛋白家族成员相结合才能发挥调控作用长度为26～31nt单链的小RNA主要存在于哺乳动物的生殖细胞和干细胞中，可能通过与Piwi亚家族蛋白结合形成piRNA复合物（piRC）来调控基因沉默途径主要沉默重复序列此外还有维持生殖系和干细胞功能、调节翻译和mRNA稳定性的作用展望进化上的高度保守性？基因沉默机制？