限制酶与电泳专题训练

限制酶与电泳11.现有一长度为3000碱基对(bp)的线性DNA分子，用限制性核酸内切酶酶切后，进行凝胶电泳，使降解产物分开。用酶H单独酶切，结果如图l。用酶B单独酶切，结果如图2。用酶H和酶B同时酶切，结果如图3。该DNA分子的结构及其酶切图谱是（）2.在DNA测序工作中，需要将某些限制性内切酶的限制位点在DNA上定位，使其成为DNA分子中的物理参照点。这项工作叫做“限制酶图谱的构建”。假设有以下一项实验：用限制酶HindⅢ，BamHⅠ和二者的混合物分别降解一个4kb（1kb即1千个碱基对）大小的线性DNA分子，降解产物分别进行凝胶电泳，在电场的作用下，降解产物分开，如下图所示。据此构建这两种限制性内切酶在该DNA分子上的“限制酶图谱”如乙图，请判断正确的标示是（）A.2.8B.HindⅢC.0.3D.BamHⅠ3.现有一长度为1000碱基对（bp）的DNA分子，用限制性核酸内切酶EcoRI酶切后得到的DNA分子仍是1000bp，用KpnI单独酶切得到400bp和600bp两种长度的DNA分子，用EcoRI、KpnI同时酶切后得到200bp和600bp两种长度的DNA分子。该DNA分子的酶切图谱正确的是的（）4.基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶II的识别序列和切点是—↓GATC—。根据图示判断下列操作正确的是（）A．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割B．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割C．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割D．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割5.细菌蛋白质在极端环境条件下可通过肽链之间的二硫键维持稳定。已知不同的多肽产物可因分子量不同而以电泳方式分离。下列左图是一个分析细菌蛋白的电泳结果图，“-”代表没加还原剂，“+”代表加有还原剂，还原剂可打断二硫键，“M”代表已知分子量的蛋白质，右侧数字代表蛋白质或多肽的相对分子量。根据左侧结果，下列哪个图案最能代表该细菌原本的多肽结构（注意：“一”代表二硫键）（）6、已知正常的β­珠蛋白基因(以βA表示)经MstⅡ限制酶切割后可得到长度为1.15kb和0.2kb的两个片段(其中0.2kb的片段通常无法检测到)，异常的β珠蛋白基因(以βS表示)由于突变恰好在MstⅡ限制酶切割点上，因而失去了该酶切位点，经MstⅡ限制酶处理后只能形成一个1.35kb的DNA片段，如图1；现用MstⅡ限制酶对编号为1、2、3的三份样品进行处理，并进行DNA电泳，结果如图2，则1、2、3号样品的基因型分别是(以βA、βS表示相关的基因)A．βSβS、βAβS、βAβAB．βAβA、βAβS、βSβSC．βAβS、βSβS、βAβAD．βAβS、βAβA、βSβS7、下表为几种限制酶识别的序列和切割的位点。如图，已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位点。现用BamHⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段（假设所用的酶均可将识别位点完全切开），下列各种酶切位点情况中，可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是［］A．1为EcoRⅠ，2为BamHⅠ，3为BamHⅠ，4为PstⅠB．1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为BamHⅠ，4为PstⅠC．1为PstⅠ，2为EcoRⅠ，3为EcoRⅠ，4为BamHⅠD．1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为PstⅠ，4为EcoRⅠ8．MstⅡ是一种限制性内切酶，它在CCTGAGG的碱基序列中切断DNA。图中显示了用MstⅡ处理后的正常β－血红蛋白基因片段。镰刀型细胞贫血症的根本原因是β－血红蛋白基因突变。下列有关叙述中，错误的是()A．在起初的正常β－血红蛋白基因中有3个CCTGAGG序列B．若β－血红蛋白基因某一处CCTGAGG突变为CCTCCTG，则用MstⅡ处理该基因后产生3个DNA片段C．将MstⅡ酶用于镰刀型细胞贫血症的基因诊断，若产生3个DNA片段，则β－血红蛋白基因正常D．将MstⅡ酶用于镰刀型细胞贫血症的基因诊断，若产生4个DNA片段，则β－血红蛋白基因正常9、下面是4种限制酶所识别的DNA分子序列和剪切位点图（↓表示剪切点、切出的断面为黏性末端）。请指出下列哪组表达正确［］限制酶1：—↓GATC—限制酶2：—CATG↓—限制酶3：—G↓GATCC—限制酶4：—CCGC↓GG—A．限制酶1和3剪出的黏性末端相同B．在使用限制酶的同时还需要解旋酶C．限制酶1、2、4识别的序列都是由4个脱氧核苷酸组成D．限制酶1和2切出的DNA片段可通过DNA连接酶拼接10、限制性核酸内切酶能识别特定的DNA序列并进行剪切,不同的限制性核酸内切酶可以对不同的核酸序列进行剪切。现用3种不同的限制性核酸内切酶对一6.2kb(千碱基对)大小的线状DNA进行剪切后,用凝胶电泳分离各核酸片段,实验结果见下表。请问:3种不同的限制性核酸内切酶在此DNA片段上的切点位置是图中的1、在寻找人类的缺陷基因时，常常需要对有患病史的家系进行调查和分析。科学家在一个海岛的居民中，找到了引起蓝色盲的基因，该岛健康人中约有44%的居民为蓝色盲基因的携带者；在世界范围内，则是每10000人中有4名蓝色盲患者。上图为该岛某家族该遗传病的系谱图，请分析回答下列问题：⑴该缺陷基因引起的遗传病是遗传病。⑷据研究，DNA也可以像指纹一样用来识别身份，这就是DNA指纹技术。请回答为什么同卵双生的个体会出现相同的指纹？。⑸下图是用DNA测序仪测出的个体8号某DNA片段的碱基序列。下列四幅图A、B、C、D是DNA测序仪测出的15、16、17、18号四人DNA片段的碱基序列，请认真比较这四幅图，其中最可能是15号的碱基序列是。⑹DNA指纹技术的方法是：先用合适的酶将这待检测者的待检样品DNA切成片段，再用电泳的方法将这些片段按大小分开，最后形成下图所示的DNA指纹图。根据DNA指纹图来判断罪犯，是由于不同人的DNA具有__________性。将样品DNA切成片段所用的酶是，通过对DNA指纹图的分析，你认为这三个人中号个体是罪犯。2（2013安徽卷,31）（20分）图1是一个常染色体遗传病的家系系谱。致病基因（a）是由正常基因（A）序列中一个碱基对的替换而形成的。图2显示的是A和a基因区域中某限制酶的酶切位点。、分别提取家系中Ⅰ1、Ⅰ2和Ⅱ1的DNA，经过酶切、电泳等步骤，再用特异性探针做分子杂交，结果见图3。（5）基因工程中限制酶的作用是识别双链DNA分子的_________，并切割DNA双链。（6）根据图2和图3，可以判断分子杂交所用探针与A基因结合的位置位于_______。3镰刀形细胞贫血症是一种单基因遗传病，是由正常的血红蛋白基因（HbA）突变为镰刀形细胞贫血症基因（HbS）引起的。如下图所示，该基因突变是由于碱基对变成了碱基对，这种变化会导致血红蛋白中个氨基酸的变化。HbA基因突变为HbS基因后，恰好丢失了一个MstⅡ限制酶切割位点。用MstⅡ限制酶切割胎儿DNA，然后用凝胶电泳分离酶切片段，片段越大，在凝胶上离加样孔越近。加热使酶切片段解旋后，用荧光标记的CTGACTCCT序列与其杂交，荧光出现的位置可能有下图所示的三种结果。若出现结果，则说明胎儿患病；若出现结果，则说明胎儿是携带者。1、A2、：C3、：D4、A5、B6、A7、B8、C9、A10:D1、（16分）⑴伴常染色体隐性⑷因为来自同一个受精卵，遗传物质(或基因型)是相同的（2分）⑸C（1分）⑹特异（专一性）（1分）限制性核酸内切酶（1分）3（1分）2（5）特定核苷酸序列（6）酶切位点①与②之间3T//AA//T1BC