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第1页共2页专题1基因工程(一)基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——(1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。(2)特点:。(3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:和。2.“分子缝合针”——(1)两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶)的比较:①相同点:都缝合键。②区别:E·coliDNA连接酶来源于,只能连接;而T4DNA能连接,但连接平末端的之间的效率较低。3.“分子运输车”——最常用的载体是,其它载体:(二)基因工程的基本操作程序第一步:1.从基因文库中获取目的基因,包括文库和文库。2.PCR技术扩增目的基因(1)原理:(2)过程:第一步:加热至90~95℃;第二步:冷却到55~60℃,结合到互补DNA链;第三步:加热至70~75℃,酶从引物起始互补链的合成。第二步:1.基因表达载体组成:+++(1)启动子:位于非编码区,是识别和结合的部位,能驱动基因。(2)标记基因的作用:第三步:_将目的基因导入植物细胞:方法是。将目的基因导入动物细胞:方法是。此方法的受体细胞多是。将目的基因导入微生物细胞:原核生物作为受体细胞的原因是,方法是:先用处理细胞,使其成为细胞。第四步:1.首先要检测,方法是。2.其次还要检测,方法是。3.最后检测,方法是。4.有时还需进行的鉴定。专题2细胞工程(一)植物细胞工程1.植物组织培养技术(1)过程:(2)条件:2.植物体细胞杂交技术(1)过程:(2)诱导融合的方法:物理法包括等,化学法一般是用作为诱导剂;融合完成的标志(3)意义:(二)动物细胞工程1.动物细胞培养技术(1)动物细胞培养的流程:()→剪碎→用处理分散成→制成→转入培养瓶中进行培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续培养。(2)动物细胞培养需要满足以下条件①②营养:、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素以及等天然成分。③温度和pH:适宜温度:哺乳动物多是;pH:。④气体环境:,CO2的主要作用是。2.动物体细胞核移植技术(1)过程:(2)选用去核卵(母)细胞的原因:卵(母)细胞3.动物细胞融合技术第2页共2页动物细胞融合原理,诱导动物细胞融合的方法:等。4.单克隆抗体技术(1)过程:(2)单克隆抗体的优点:。专题3胚胎工程(一)动物胚胎发育的基本过程1、概念:胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术,如等技术。2、精卵子的发生和受精作用(1)精子的发生:雄性哺乳动物从初情期到生殖机能衰退,在内产生。精原细胞先后进行;变形过程中,为精子头的主要部分,发育为顶体,演变为精子的尾,在尾基部形成线粒体鞘,其他物质浓缩为直至脱落。(2)卵子的发生:在雌性动物的内完成。时期,卵原细胞进行有丝分裂,进一步演变成初级卵母细胞[被卵泡细胞包围],减数第一次分裂在排卵前后完成,形成次级卵母细胞和第一极体进入输卵管准备受精;减数第二次分裂是在受精过程中完成的。(3)受精:①准备阶段:(在雌性动物生殖道内);卵子的准备()②受精阶段[卵子周围的结构(由外到内)]A:精子释放溶解卵丘细胞之间的物质,穿越放射冠。B:顶体酶可将透明带溶出孔道,精子穿入,在精子触及卵细胞膜的瞬间阻止后来精子进入透明带的生理反应[防止多精子入卵受精的第一道屏障];C:精子外膜和卵细胞膜融合,精子入卵后,卵细胞膜会拒绝其他精子再进入卵内的过程[防止多精子入卵受精的第二道屏障]D[注意:受精标志是;受精完成标志是]。3、动物胚胎发育的基本过程(1)受精场所是母体的。(2)胚胎发育的过程:(二)体外受精和早期胚胎培养1.试管生物产生过程:(1)卵母细胞的采集和培养:主要方法:用处理,使其排出更多的卵子,然后,从中冲取卵子,直接与获能的精子在体外受精。第二种方法:从刚屠宰母畜的中采集卵母细胞;第三种方法是借助超声波探测仪、内窥镜、腹腔镜等工具直接从中吸取卵母细胞。采集的卵母细胞,都要在体外培养到时期。(2)精子的采集和获能:培养法:溶液;化学诱导法:或。(3)受精:获能的精子和培养成熟的卵细胞在溶液或溶液中完成受精过程。(4)胚胎的早期培养:精子与卵子在体外受精后,应将受精卵移入发育培养液中继续培养以。培养液成分较复杂,除一些无机盐和有机盐外,还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分,以及等物质。当胚胎发育到适宜的阶段时,可将其取出胚胎移植。(一般要培育到进行移植。)(三)胚胎工程的应用1.胚胎移植基本程序:①对供、受体的选择和处理。选择遗传特性和生产性能优秀的供体,有健康的体质和正常繁殖能力的受体,供体和受体是物种。并用激素进行,用对供体母牛做处理。②配种或。③对胚胎的收集、检查、培养或保存。配种或输精后第7天,用特制装置,把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来(也叫)。对胚胎进行质量检查,此时的胚胎应发育到阶段。④对胚胎进行移植。⑤移植后的检查。对受体母牛进行是否妊娠的检查。2.胚胎分割(1)材料:发育良好,形态正常的。(2)操作过程:对囊胚阶段的胚胎分割时,要将均等分割3.胚胎干细胞(1)哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞,来源于中分离出来。(2)在形态上表现为小,大,明显;在功能上,具有,可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。另外,在体外培养的条件下,可以而不发生,可进行冷冻保存,也可进行遗传改造。
本文标题:选修三知识清单
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