酶与蛋白质工程-题

名词解释：1、一级结构、二级结构、结构域、α-螺旋两亲性、三级结构、分子伴侣、第二遗传密码，同源蛋白质2、蛋白质分子设计、Scaffold设计3、定点突变、定向进化、内含肽、融合蛋白标签、易错PCR、DNAshuffling4、硫酸铵分级沉淀、分子筛层析、亲和层析、电泳5、噬菌体表面展示技术、酵母表面展示技术、蛋白质芯片、表面等离子体共振（SPR）、6、蛋白质组、蛋白质组学、蛋白质组丰度、激光捕获显微切割技术7、抗体工程、免疫毒素、多克隆抗体和单克隆抗体、基因工程抗体问答：1.蛋白质工程与基因工程的联系和区别。2.什么是蛋白质构象病？其发病原因是什么？3.维持蛋白质空间构象的作用力有哪些？分别说明。4.试述蛋白质分子设计的程序（请辅以图说明）。5.蛋白质二级结构的设计原则是怎样的？6.蛋白质分子设计的种类有哪些？它们各自有哪些特点？7.简述酶分子的修饰方法有那些？8.为什么要发展基因融合技术？9.重叠延伸PCR技术引入突变位点的原理是怎样的（请辅以图说明）？10.在大肠杆菌中影响外源基因表达的因素有哪些？如何在大肠杆菌实现外源基因高效表达？11.重组蛋白质的表达系统主要有哪些？各自的优缺点是什么？12.Western-blotting的主要实验原理、操作步骤如何？13.离子交换层析分离纯化蛋白质的主要原理、实验步骤如何？14.下图是人G6PD蛋白的理化性质信息图，由图中你能得到哪些信息？15.下图是人beta-globin的理化性质信息图，由图中你能得到哪些信息？16.如何利用表面等离子体共振（SPR）仪研究蛋白质相互作用？17.如何利用蛋白质错误折叠循环扩增技术设计一个灵敏的朊病毒检测方法？18.蛋白质组学研究的技术方法主要有哪些？19.列举并详细说明三种研究蛋白质相互作用的方法。论述：1.蛋白质结构和功能的关系是怎样的？请详细论述并举例说明。2.引入基因突变的技术有哪些？请简述各技术原理。3.为了得到较纯的G6PD（约59.3KD）蛋白，用于制作单克隆抗体，我们把G6PD基因构建在pET-28a（已经给出载体图谱）里，在大肠杆菌中诱导表达高效表达后，怎样操作能达到目的？4.为了得到较纯的水稻条纹病毒NSvc2蛋白（约94KD）蛋白，用于制作单克隆抗体，我们把G6PD基因构建在pGAPZaA载体（已经给出载体图谱）里，在酿酒酵母菌中诱导表达高效表达后，怎样操作能达到目的？5.下图是水稻条纹病毒NSvc2蛋白的理化性质及信号肽预测图，由图中你能得到哪些信息？6.如何理解酵母双杂交系统的原理（请辅以图说明）？并举例说明其在蛋白质工程中的应用7.什么叫抗体酶，抗体酶的理论基础是什么？