醋甘遂的研究进展

醋甘遂的研究进展摘要：查阅中外文献，对醋甘遂的炮制历史沿革、化学成分、药理作用、毒性研究、临床应用等作一综述，为醋甘遂的研究开发提供参考。关键词：醋甘遂；炮制历史沿革；化学成分；药理作用；毒性研究；临床应用甘遂（KansuiRadix）为大戟科植物甘遂（EuphorbiakansuiT.N.LiouexT.P.Wang）的干燥块根[1]，始载于《神农本草经》，别名主田、猫儿眼、黄甘遂、京甘遂、苦泽、甘泽、白泽、肿手花根、重泽、鬼丑、陵泽、甘藁、陵藁、化骨丹、萱根子、头痛花、九头狮子草等[2]。主产于陕西、山西、河南、山东、宁夏等地，其中以陕西产的质量最佳[3]。甘遂味苦，性寒，有毒，归肺、肾、大肠经，具有泻水饮，破积聚，通二便等功效，用于水肿胀满，胸腹积水，痰饮积聚，气逆咳喘，二便不利，风痰癫痫，痈肿疮毒等症。其主要化学成分为二萜、三萜及甾体类化合物，其他成分包括香豆素、脂肪酸、蔗糖、鞣质、树脂等[4]。现代实验研究表明，甘遂具有抗肿瘤、抗生育、抗病毒、调节免疫系统等活性[5]，但其毒性较强，生品仅限外用，内服必须炮制。历版中国药典为了降低甘遂毒性均采用醋制，醋制能降低毒性，缓和泻下作用。1炮制历史沿革我国古代先后至少有60余部文献记载有甘遂的炮制方法，包括有加辅料和不加辅料制共约20余种方法，主要有熬、炒、煨、炮、煮、炙、焙等，辅料有胡麻、醋、麸、面、大麦、甘草等。醋制法最早出现在宋代，《圣济总录》记载：“与脂麻炒，麻熟为度，弃麻不用，“醋炒干”[6]，“醋炒令熟”，“麸炒，微烟生，复于地上候冷，出尽火毒”等。元代《丹溪心法》载：“水浸，冬七，春秋五日水煮。”亦用“醋拌炒”[7]。清代《杂病广要》有记载“醋糊丸如梧子大”[8]，而《金匮翼》沿用“醋炒”[9]法。除此之外，还有醋煮法[10]。甘遂醋制法运用广泛，沿用至今。甘遂的现代炮制从醋的用量，炒制的温度和炒制的时间等炮制因素去研究。王克周等[11]研究表明，甘遂炮制以30%醋制为佳。耿婷等[12]研究发现，甘遂经过醋制以后刺激性和泻下功效明显下降，特别是二萜部位的刺激性大概减少了40%-50%。曹艳等[13]经过大量的实验结果，发现甘遂醋制工艺中炮制火候以武火（280℃）10min炒干为佳。张丽等[14]通过正交试验法对甘遂醋制的炮制工艺进行了研究，选取甘遂主要毒效成分之一的3-O-(2’E,4’Z-癸二烯酰基)-20-O-乙酰基巨大戟二萜醇为指标性化合物，确定醋甘遂饮片最佳炮制条件为用30%醋，在260℃的温度下炒制9min。现代常用的炮制方法是取净甘遂，用米醋拌匀，闷透，置锅内，用文火炒至微干，取出晾干。每l00kg甘遂，用醋30kg。或取净甘遂置锅中，加米醋与适量水浸没，煮至醋液被吸尽，切开无白心时，取出，干燥。甘遂每100kg，用米醋30kg[15]。2化学成分与质量标准研究李春发[16]利用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、高效液相色谱等常用分离手段，从醋制甘遂的95%乙醇提取物中分离得到11种化合物，进行了鉴定。化合物的名称为5，20-丙缩酮-3-O-(2’，3’-二甲基丁酰基)-13-O-正十二烷酰基-4α-羟基-巨大戟醇，4-O-乙酰基-5-O-苯甲酰基-3β羟基20-去氧巨大戟萜醇，knasuininA，knasulninB，knasuininE，角鳖烯，大戟醇，3-O-癸烷酰基-齐墩果-12-烯，3β-乙酰基-11,13-齐墩果二烯，邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯,β-谷甾醇。李征军等[17]采用HPLC法，对甘遂炮制前后各炮制品中二萜类成分含量进行研究，发现甘遂炮制品中假白榄烷型二萜类成分甘遂萜酯A、甘遂萜酯B经过炮制后均有所降低，其质量分数高低顺序：生品＞清炒品＞醋润品＞醋炙品，结合甘遂萜酯A、B的致炎毒性，推测出甘遂醋炙减毒的原因是甘遂醋炙前后二萜类成分的质量分数变化。张丽[18]采用HPLC法，分别在235nm和268nm测定了甘遂和醋甘遂饮片中甘遂大戟萜酯C、3-O-苯甲酰基-20-去氧巨大戟二萜醇和3-O-(2′E,4′Z-癸二烯酰基)-20-O-乙酰基巨大戟二萜醇三种成分，方法简便、快速、准确，重现性好，可以用于甘遂与醋甘遂饮片的质量控制。刘艳菊[19]将生甘遂和醋甘遂醇提物经萃取得到不同极性部位，采用高效液相色谱法进行分析，比较其不同极性部位的HPLC图谱。发现甘遂经醋炮制后，有新成分产生，也有原成分消失，部分成分含量变化明显，以氯仿和乙酸乙酯部位含量变化尤为明显。修彦凤[20]比较生、醋炒和醋煮甘遂的HPLC-ELSD指纹图谱，对变化明显的成分进行分离与鉴定。结果显示甘遂炮制后，大部分的成分含量降低，个别成分含量升高，不同成分之间的含量的比例发生了变化，分离得到含量下降的3-O-(2,3-二甲基丁酰基)-13-O-十二烷酰基巨大戟二萜醇、大戟二烯醇和β-谷甾醇3个成分，这为进一步解释甘遂炮制减毒的机理奠定了基础。3药理活性3.1泻下作用小鼠口服生甘遂或炙甘遂的混悬液或乙醇浸膏，均能出现泻下的现象，但动物无一例死亡。甘遂煎剂没有泻下作用，经乙醇提取后残渣也没有泻下作用，说明甘遂泻下成分不溶于水却溶于乙醇，可能是一种难溶于水的黄色树脂状物质，验证了甘遂多入丸散制剂，而不宜入汤剂煎服[21]。据聂淑琴等[22]报道，甘遂生品、醋制及甘草制品醇提物对小鼠致泻的半数有效量分别为0.59、3.26、4.79g·kg-1，炮制后泻下作用有显著减弱。甘遂属刺激性泻下，能刺激肠管，促进肠蠕动，增加肠道内肠液，加速肠内容物的推动，产生泻下作用。3.2利尿作用甘遂水煎剂对大鼠无利尿作用，对实验性腹水的大鼠也无明显的利尿作用，反而有尿量减少的倾向，甘遂的乙醇及乙酸浸剂对实验性腹水大鼠的排尿量有一定的促进作用[23]。聂淑琴等[24]报道，甘遂醋制后利尿作用减弱。3.3抗肿瘤作用聂淑琴等[24]报道，甘遂生品及炮制品对阈下剂量3-甲基胆蒽处理的小鼠皮肤肿瘤发生均有促进作用，但炮制品出瘤较晚，生瘤率较低。3.4祛痰作用王克周[25]运用急性毒性实验（LD50）、祛痰实验（酚红排泌法）及利尿实验（滤纸法），发现醋制后甘遂毒性显著地降低，利尿的作用稍微缓和；生品和30％（每100kg甘遂用醋的量为30kg）醋量甘遂醋制品祛痰效果较好，而50％（每100kg甘遂用醋的量为50kg）、100％（每100kg甘遂用醋的量为100kg）醋量甘遂醋制品较生品差。4毒性研究张险峰[26]认为甘遂的毒性及其解毒机制研究应采用新技术和方法，结合炮制减毒的物质基础和作用机制相关性两方面，进一步深入到组织器官和分子水平进行研究。李燕[27]等发现甘遂炮制后毒性降低，甘遂经炮制后大戟二烯醇的含量减少，醋制甘遂的毒性较甘遂生品的毒性减弱可能与甘遂中的大戟二烯醇成分含量减少有关。夏艺[28]调查发现甘遂生品和醋品石油醚提取物，氯仿提取物和乙酸乙酯提取物既是其有效的泻下作用部位,又是其毒性作用部位。甘遂经醋炙后,化学成分发生了一定的量变及质变，药效和毒性作用均有所减缓。王文晓等[29]将小鼠分为对照组、甘遂组、醋甘遂组，静脉注射给药7d后，取小鼠胃、肠组织进行透射电镜观察，透射电镜观察结果显示，甘遂组胃固有腺体上皮排列紊乱，细胞质电子密度不均匀，细胞核形态不规则，腺上皮表面有大量溶酶体出现；醋甘遂组胃固有形态上皮细胞形态规则，部分线粒体畸形；甘遂组肠黏膜表面微绒毛高度变矮，细胞间连接丰富，但近表面的紧密连接较短；醋甘遂组肠上皮细胞排列规则，细胞形态一致，表面微绒毛数量减少、高度变矮，但较规则，线粒体结构良好。免疫组化检查结果显示，与对照组相比，甘遂组E-钙黏蛋白表达降低，VCAM-1蛋白表达增强（P＜0.05、0.01）；与甘遂组相比，醋甘遂组E-钙黏蛋白表达增强（P＜0.05、0.01），VCAM-1表达降低（P＜0.05、0.01）。因此，醋炙能明显降低甘遂对小鼠胃肠黏膜上皮细胞的刺激，减弱对胃肠黏膜通透性的影响，从而降低甘遂的刺激性。张丽等[30]研究认为，甘遂炮醋制工艺中的炒与醋润2种操作降低甘遂毒性中起到协同作用，且炮制质量醋制品＞醋润品＞清炒品。曹雨诞等[31]应用比较甘遂不同炮制品对斑马鱼急性毒性大小的方法，比较出毒性顺序依次为甘遂生品＞清炒品＞醋润品＞醋炙品。另外，斑马鱼对甘遂不同炮制品的提取液的急性毒性反应，呈现出明显的量-毒关系；不同炮制品水提液半数致死浓度（LC50）明显高于相应醇提液其中以甘遂生品醇提液的毒性最强，甘遂醋炙品水提液的毒性最低。黄海燕等[32]研究表明，甘遂醋制后泻下作用较生品甘遂明显减弱，毒性显著降低；但与对照组相比，甘遂、醋甘遂醇提物、石油醚部位、乙酸乙酯部位可明显促进小肠推进运动。甘遂醋制后，醇提物毒性下降75％左右，石油醚部位毒性下降50％左右，乙酸乙酯部位毒性下降75％左右，而正丁醇部位和水部位无毒。研究显示，甘遂的石油醚部位和乙酸乙酯部位既是其药效学部位，又是其毒性部位。曹艳[33]通过急性毒性试验、肝肾毒性及利尿作用考察、生存曲线分析，认为甘遂武火醋炙毒性较小，用药更安全。5临床应用甘遂苦寒有毒，归肾、大肠、肺经。功效有泻水饮，破积聚，通二便等，常用于治水肿胀满，留饮，二便不通等症状。但是气阴脾虚者及孕妇忌服。刘学冠[34]报道，治疗臌胀可取适量净甘遂，按每1kg甘遂0.4~0.5kg米醋比例拌匀后文火炒至微干，取出晾干碾粉制成粉末，装入胶囊服用，每天1粒，连用5~7天后出现解稀水样大便的现象。陈明校[35]总结出甘遂的泻下有效成分是不溶于水的黄色树脂状物质，且入丸散效果更好。代卫章[36]运用醋甘遂治疗臌胀患者104例，检测患者血清ALT、AST活性和TBIL、ABL含量及腹围、体质量的变化。结果发现，治疗组总有效率高于对照组，其血清ALT、AST活性和TBIL、ABL含量及腹围、体质量的改善亦优于对照组。6结语醋甘遂历史久远，应用广泛，在治疗癌性腹水方面具有良好的治疗作用，但其也具有一定的毒性，如皮肤刺激性、泻下、胃肠道刺激性、肝肾毒性等。目前有关醋甘遂的炮制作用和化学成分的报道较多，而关于其泻水逐饮效应的物质基础和作用机制深入研究甚少。通过多学科的结合，进一步考察其泻水逐饮效应活性部位及成分群，将提高醋甘遂临床应用的安全性，为其深入开发应用奠定基础。[参考文献][1]国家药典委员会.中华人民共和国药典:2010年版一部[S].北京:中国医药科技出版社,2010:81.[2]刘道清.中药别名大辞典[M].郑州:中原农民出版社,1999.[3]权宜淑.中药甘遂的本草调查[J].西北药学杂志,1994,12(9):255-257.[4]UemuraD,OhwakiH,HirataY.Isolationandstructuresof20-deoxyingenolnewditerpene,derivativesandingenolderivativeobtainedfrom“kansui”[J].TetrahedronLett,1974,29:2527-2528.[5]郭晓庄.有毒中草药大辞典[M].天津:天津科技翻译出版公司,1992:7.[6]太医院.圣济总录[M].北京:人民卫生出版社,1962:469.[7]元朱丹溪.丹溪心法[M].北京:中国中医药出版社,2003:32.[8]日本丹波元坚.杂病广要[M].北京:学苑出版社,2009:286.[9]清尤怡.金匮翼[M].北京:中医古籍出版社,2003:20.[10]山东省革委会卫生局.山东省中草药炮制规范[M].济南:山东人民出版社,1975:48.[11]王克周,车红军.醋制甘遂用醋量对其毒性及药效的影响[J].山西中医,2005,21(5):49-50.[12]耿婷,黄海燕,丁安伟,等.甘遂炮制前后各部位刺激性和泻下作用研究[J].中南药学,2008,6(4):385-388.[13]曹艳,巴赛,胡雪峰.醋炙火候对甘遂毒性的影响[J].中国药师,2010,13(7):922-924.[14]张丽,束晓云,唐于平,等.醋甘遂饮片炮制工艺研究[J].中国中药杂志,2009,34(