胃蛋白酶原(CLIA)检测

胃蛋白酶原（化学发光法）一、什么是化学发光法化学发光法即化学发光免疫测定（Chemiluminescentimmunoassay,CLIA）是将抗原与抗体特异性反应与敏感性的化学发光反应相结合而建立的一种免疫检测技术，最初建立于1976年。（一）原理化学发光免疫测定属于标记抗体技术的一种，它以化学发光剂、催化发光酶或产物间接参与发光反应的物质等标记抗体或抗原，当标记抗体或标记抗原与相应抗原或抗体结合后，发光底物受发光剂、催化酶或参与产物作用，发生氧化还原反应，反应中释放可见光或者该反应激发荧光物质发光，最后用发光光度计进行检测。（二）标记物1.发光剂直接标记常用鲁米诺及其衍生物等，它们属环肼类化合物，能与很多氧化物如氧、次氯酸、磺、过氧化物等反应而发光。因此可直接将鲁米诺或其衍生物标记抗体或抗原进行CLIA。这类方法特异性强，但往往会因交联影响发光物特性，降低敏感性。2.发光催化酶标记常用辣根过氧化物酶、丙酮酸激酶、葡萄糖氧化酶等标记抗体或抗原。与酶标抗体测定基本相同，差别在于CLIA是用发光性底物指示反应，有人称为发光酶免疫测定。3.标记物产物参与反应标记物不直接催化发光反应，而其反应产物能使反应系统发光。如用草酸类标记抗体或标记抗原，在有H2O2作用下，生成二噁二酮，后者可使红荧稀（Rubrene）激化发光。（三）应用CLIA特异性强、敏感性高，可检测到10-5mol/L的抗原量。快速，一般几十分钟或1-3小时内完成。操作简便，可进行固相和均相分析。试验重复性好，试剂易标准化和商品化。目前已用于多种药物、激素、病原微生物及其代谢产物、抗体及其他生物活性物质的测定。二、胃蛋白酶原（化学发光法）（一）胃蛋白酶原定义胃蛋白酶原（pepsinogen，PG）是胃分泌的一种消化酶前体，是胃液中胃蛋白酶的无活性前体。约有1%的PG透过胃黏膜毛细血管进入血液循环，进入血液循环的PG在血液中非常稳定。血清PGI和PGII反映胃黏膜腺体和细胞的数量，也间接反映胃黏膜不同部位的分泌功能。当胃黏膜发生病理变化时，血清胃蛋白酶原含量也随之改变。因此，监测血清中胃蛋白酶原的浓度可以作为监测胃黏膜状态的手段。PG含量与良、恶性胃溃疡的鉴别有关，血清PGⅠ水平与萎缩性胃炎、PGⅠ/PGⅡ水平与胃癌和胃癌前期病变呈负相关。血清PGⅠ与胃泌酸腺细胞功能相关，PGⅡ与胃底粘膜病变的相关性较大，血清PG反映胃总体分泌PG水平。消化性溃疡的发生与胃分泌酸过多有密切关系。萎缩性胃炎、胃癌前期病变或胃癌发生时，尤其是幽门螺杆菌感染等因素所干扰，胃酸分泌过多的浅表性胃炎和幽门螺杆菌感染的胃炎，PGⅠ和PGⅡ的分泌会增加；而在慢性严重萎缩性胃炎当主细胞减少时PGⅠ含量下降；当萎缩性胃炎伴有肠化、胃窦宪假幽门腺化生，PGⅡ含量会随之增高。血清PG可作为检测胃癌的一个可靠标志物。（二）检验原理.检验原理就是发光催化酶标记，采用双抗体夹心法。PG单克隆抗体包被化学发光微孔板，形成固相抗体。检测时向包被微孔中加入血清样品或校准品，与HRP标记的PG单克隆抗体进行反应，形成抗体-抗原-抗体-HRP复合物。反应后洗去未结合的HRP-PG单克隆抗体，然后加入发光底物，检测发光信号的强度，发光值强度与样本中PG的含量成正比。三、目前几种检测方法的比较与传统的胃病检查手段相比，胃蛋白酶原PGI&PGII血清检测具有很强的优势。(1)胃钡餐造影优点：检测时间短缺点：射线暴露，检测费用高，不能明确疾病性质，结果判定依赖于经验性，受检人群混杂及阳性患者难以随访等问题。对早期胃癌的判定显得无能为力。血清PG检测对诊断早期胃癌或肠型胃癌更有价值，钡餐检查对诊断进展期胃癌或弥散型胃癌更有价值。(2)其他肿瘤相关标记物优点：采用血清检测，无创伤、广泛认知缺点：对胃癌检测的特异性低，对早期胃部疾病的诊断无参考价值。如：CEA在胃癌患者胃液中阳性检出率为50%,血清阳性检出率仅为4.5%(3)胃镜优点：行业金标准，检测准确。缺点：⒈体内检测，痛苦。⒉受医生水平影响大。⒊检测费用高。⒋不适合体检普查。(4)胃蛋白酶原PGI&PGII血清检测:优点：1.血清检测无创伤、更安全。2.费用低廉，适用于普查体检。3.操作简单，时间短，不会造成受检人员的长时间滞留。四、几种检测方法收费标准的比较胃镜检测费：140-340元/次肿瘤标记物检测：50元/项（组合350-1200元）碳-13呼气：100-400元/次上消化钡餐:180-320元/次胃蛋白酶原I&II160-240元五、综上所述血清胃蛋白酶原检测优点（1）胃癌初筛的国家标准（2）胃癌检出率高，特异性强（3）操作简便（4）无创，病人耐受好（5）费用低（6）快速生产企业：河南美凯生物科技有限公司地址：漯河市沙澧产业集聚区湘江西路与经五路交叉口电话：[phone]服务热线：0395-3333802