您好,欢迎访问三七文档
当前位置:首页 > 商业/管理/HR > 项目/工程管理 > 脱乙酰度的测定(标准草稿)
1.1脱乙酰度的测定1.1.1电位滴定法1.1.1.1原理用过量的稀盐酸溶液溶解精密称定的脱乙酰甲壳素试样,盐酸与脱乙酰甲壳素中的氨基等摩尔结合后,溶液中含有过量的盐酸。用氢氧化钠溶液滴定时,氢氧化钠首先中和过量的盐酸,溶液pH出现急剧上升,即第一个“突跃”,然后氢氧化钠再中和与脱乙酰甲壳素中氨基结合的盐酸,达到滴定等当点时,溶液pH出现第二个“突跃”,两个“突跃”之间消耗的氢氧化钠摩尔数相当于试样中的氨基的摩尔数。1.1.1.2试剂和材料1.1.1.2.1盐酸标准滴定溶液:c[HCl]=0.1mol/L。1.1.1.2.2氢氧化钠标准滴定溶液:c[NaOH]=0.1mol/L。1.1.1.3仪器和设备1.1.1.3.1电磁搅拌器。1.1.1.3.2酸度计或电位滴定仪。1.1.1.4分析步骤1.1.1.4.1试样处理称取于105°C烘干至恒重的试样0.2g,精确至0.0001g,加入30mL盐酸标准滴定溶液,搅拌至完全溶解,再加50mL水,混匀。1.1.1.4.2滴定用氢氧化钠标准滴定溶液滴定6.3.1.4.1得到的溶液,测其pH,每滴定0.5mL记录一次。当滴定至pH接近“突跃”时,逐滴滴定,记录氢氧化钠标准滴定溶液的体积和相应的pH值,得到pH-氢氧化钠标准滴定溶液体积曲线,找出其“突跃”点。记录两次突跃点间所消耗的氢氧化钠标准滴定溶液的体积数。1.1.1.5结果计算脱乙酰基度的质量分数w1按公式(1)计算:…………………………(1)式中:ΔV——二个“突跃”点之间消耗的氢氧化钠标准滴定溶液的体积,单位为毫升(mL);c1——氢氧化钠标准滴定溶液的浓度,单位为摩尔每升(mol/L);10-3——单位换算系数;16——氨基的相对分子质量;m1——试样质量,单位为克(g);0.0994——理论氨基含量(16/161)。1.1.1.6允许误差%1000994.01610V1311mcw实验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值的2%。1.1.2分光光度法1.1.2.1原理乙酰氨基在199nm处具有紫外吸收,N-乙酰-D-葡萄糖胺的摩尔数与吸光度之间存在线性关系。利用紫外光谱法,可以检测物质所含有乙酰氨基的数量,从而推算出脱乙酰度的数值。1.1.2.2仪器和设备除实验室常用仪器和设备外还需:紫外-可见分光光度计(波长位置190-300nm,狭缝1mm,扫描速度100mm/min,LZ3函数记录仪)1.1.2.3试剂和溶液1.1.2.3.1N-乙酰氨基葡萄糖标准溶液:用0.001mol/LHCl溶解N-乙酰氨基葡萄糖,配置成0.1mg/ml的溶液,再用此浓度的盐酸稀释成0.01mg/ml、0.02mg/ml、0.03mg/ml、0.04mg/ml、0.05mg/ml的标准溶液。1.1.2.4样品处理准确称10~20mg壳寡糖样品于100ml容量瓶中,加入10ml0.01mol/LHCl,全部溶解后,加水稀释至刻度,摇匀1.1.2.5标准曲线的绘制以0.001mol/LHCl为参比液,在199nm处测定标准系列溶液的吸光度,绘制出标准曲线。1.1.2.6样品及对照品的测定在同样的条件下测定样品溶液在该波长下的吸光度。带入标准曲线中,得到样品中的乙酰基浓度,从而求得脱乙酰度。1.1.2.7结果计算脱乙酰度的质量分数w1按公式(1)计算:%100%100321…………………………(2)式中:w1——脱乙酰度的质量分数,单位为质量百分数(%);w2——样品中乙酰基浓度,单位为质量百分数(%);w3——样品浓度,单位为质量百分数(%)。1.1.2.8允许误差试验结果以平行测定结果的算术平均值为准。在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的5%。
本文标题:脱乙酰度的测定(标准草稿)
链接地址:https://www.777doc.com/doc-2050181 .html