腐霉利处理夏黑葡萄对其品质的影响

腐霉利处理夏黑葡萄对其品质的影响1李洪山，张红，申玉香，黄国伟（江苏盐城工学院，江苏盐城224051）摘要：腐霉利是一种防治葡萄灰霉病常用的杀菌剂，在结果期使用较为频繁，为了解腐霉利对葡萄品质的影响，通过对鲜食的夏黑葡萄应用对比试验，在不同时间取样测定其蛋白质、氨基酸、糖分的含量和酸度表明，腐霉利对葡萄的品质指标发生作用，不同样品的蛋白质和氨基酸在同一时间的含量在α=0.05的水平上没有显著差异，而糖分和酸度在α=0.05水平上存在显著差异，结果表明腐霉利处理夏黑葡萄不改变蛋白质和氨基酸的含量，但对可溶性含糖量和酸度有明显的影响。关键词：腐霉利；夏黑葡萄；品质指标中图分类号：S66文献标识码：A文章编号：ThequalitychangeofgrapeXiaheitreatedbyprocymidoneLIHong-shan,ZHANGHong,SHENYu-xiang,HUANGGu-wei(YanchengInstituteofTechnology,JiangsuYancheng224051)Abstract:Theprocymidoneisusedtocontrolthegrapegraymoldrot(Botrytiscinerea),andspraymorefrequentlyinthematurestage.Inordertoknowtheeffectiveoftheprocymidonetotheinnerqualityofgrape,thecontrasttestoffreshgrapeandgrapetreatedbyusedprocymidoneweredone.Thesamplingdeterminationresultsofprotein,aminoacids,sugaratdifferenttimeindicatethecorrespondingchangeswiththefungicide,therewerenotsignificantdifferenceindifferentsamplesoftheproteinandaminoacidcontentinthesametimeintheα=0.05level,whilethesugarandacidityintheα=0.05level,thereweresignificantdifferences.TheresultsshowedthatprocymidonedealingwithXiaheidoesnotchangethecontentofproteinandaminoacids,buthadagreaterinfluenceonsolublesugarcontentandacidity.Keywords:Procymidone;GrapeXiahei;Quality葡萄在全世界的果品生产中产量及栽培面积一直居于首位，在我国与香蕉、柑橘、苹果、梨和桃等并称为六大水果，我国葡萄果实除了作为鲜食用外，主要用于酿酒和制成葡萄汁、葡萄干等加工品。葡萄先进生产国鲜食葡萄都经机械化分级与包装后再投放市场，而我国鲜食葡萄商品化处理比率低，仅占总产量的8%-10%。鲜食葡萄贮藏保鲜总量仅占总产量的12.2%，由于采后保鲜处理不当,每年约有15%-20%的产品腐烂变质[1-3]。夏黑葡萄属于欧美杂交种，它抗病、丰产、早熟、易着色、耐储运、含糖量高、口感好，除此之外，夏黑还含有各种营养元素。如蛋白质、氨基酸、有机酸等等。近年来，夏黑通过设施栽培，提前成熟期，提高产量，已经成为我国主要的葡萄种植品种之一[4]。葡萄灰霉病主要侵害花穗和果实，果实在近成熟期感病，在所有贮藏发生的病害中，它所造成的损失最为严重，1收稿日期：基金项目：国家级星火科技项目（2013GA690129）；江苏省苏北科技发展计划（BN2014131）作者简介：李洪山（1965-），男（汉），教授，博士，研究方向为有害生物治理。2是目前世界上发生比较严重的一种病害。腐霉利是一种内吸性杀菌剂，对葡萄灰霉病兼有保护和治疗的作用[5]。农药对植物的生理影响表现在很多方面，如光合作用、营养物质、次生物质、根系活力、生长调节物质等。农药对作物主要营养物质的影响受农药品种和作物种类两个因素的共同决定。许多杀菌剂和杀虫剂对各种作物的产量、生理、生长有反面的影响，也就是说他们可以增加害虫的营养价值、增强对害虫的诱导以及可能会降低作物的自身防卫，间接增强害虫再爆发，例如杀虫剂溴氰菊酯的使用可以降低了感虫水稻中氮与碳水化合物的比例，增加了游离氨态氮的水平[6,7]。本研究通过对比分析农药腐霉利浸润葡萄对葡萄蛋白质、氨基酸、糖含量、酸度的影响，目的为葡萄的种植过程和储藏过程中提供用药依据。1材料与方法1.1试验材料供试材料为盐城市仰徐现代农业科技有限公司葡萄基地中3年生夏黑葡萄。果穗不用膨大素处理。选择长势良好的葡萄植株，在选定植株采摘上6～8个成熟果穗，实验室存放备用。供试农药品种为腐霉利，又名速克灵。化学名称为N-(3,5-二氯苯基)-1,3-二甲基环丙烷-1,2-二羰基亚胺，由山东哈维斯生化科技有限公司生产，商品剂型为50%可湿性粉剂。其他试剂均为国产分析纯。1.2试验方法将采摘好的果穗在实验室内分成两组，每组3～4个，其中一组葡萄用清水浸润30s，另一组用50%腐霉利可湿性粉剂1000倍液浸润30s，之后分别悬挂在通风处，在葡萄果穗处理后0h、12h、24h、48h和72h取样进行葡萄内在品质测定，每个处理取三个重复样品测定，以平均数比较分析。1.3测试内容和方法：1.3.1可溶性糖含量用葡萄糖标准液制备标准曲线，采用蒽酮比色法测定葡萄果粒中可溶性糖含量[8]。葡萄糖标准曲线y（糖浓度）=1635x（吸光度）+11.178，R2=0.9995**。1.3.2游离氨基酸用亮氨酸标准液制备标准曲线，采用茚三酮比色法测定葡萄中游离氨基酸含量[8]。标准曲线y（游离氨基酸含量）=0.9649x吸光度）+0.2953，R2=0.9997**。1.3.3可溶性蛋白质用牛血清蛋白制备标准曲线，采用考马斯亮蓝G-250染色法测定可溶性蛋白质含量[8]。蛋白质标准曲线为y(蛋白质浓度)=2.61x-0.019，R2=0.9937**1.3.4酸度测定将葡萄果粒液体分离出后，准确吸取制备的滤液50mL，加入酚酞指示剂2-3滴，用0.01mol/L标准碱液滴定至微红色30s不褪色，记录用量，同时做空白实验。以下式计算样品含酸量。式中：c---标准NaOH溶液的浓度，mol/L，V--滴定消耗标准NaOH溶液的体积，mL，m---样品质量或体积，g或ml，V0--样品稀释液总体积，mL;V1--滴定时吸取的样液体积，mL;K---换算为适当酸的系数，即1mol氢氧化钠相当于主要酸的克数，分析葡萄及其制品时，用酒石酸表示，其K=0.075。1.4数据统计所有数据3次重复，试验数据用DPS2000和Excel软件进行相关统计分析。2．结果与分析2.1药剂处理后对夏黑葡萄可溶性蛋白质含量的影响数据表明，葡萄果粒可溶性蛋白质的含量随着采摘后时间的延长而先下降，后上升，清水与药剂浸润处理后的趋势一致(见图1)，同一样品不同时间之间F(清水)值为3.08，F(农药)值为2.12。不同样品在同一个取样时间时的含量之间均在α=0.05水平上没有差异，但分析具体数据，清水处理的葡萄蛋白质含量变化率随着处理时间的延长而逐渐变大，药剂处理后的葡萄蛋白质含量变化幅度较大，在24h尤其明显(图2)。图1.葡萄蛋白质含量变化趋势及差异性4图2.葡萄蛋白质含量变化率（%）2.2药剂处理对夏黑葡萄可溶性氨基酸含量的影响数据表明，葡萄果粒氨基酸含量基本上不受处理后时间的影响，清水处理的葡萄在0～72h内氨基酸含量在1.92～2.04µg/g，腐霉利农药处理的葡萄在0～72h内氨基酸含量在1.86～1.92μg/g，不同取样时间之间在p=0.05水平上没有显著性差异（F(清水)=0.064，F(药剂)=0.126），清水与农药处理之间在同一取样时间点的测定值经过t测验，在α=0.05水平上均没有达到显著性差异(图3)。分析具体数据，清水与农药处理后的葡萄氨基酸含量变化率趋势一致，在48h时均有一个折点(图4)。图3.葡萄氨基酸含量变化趋势及差异性图4.葡萄氨基酸含量变化率2.3药剂处理对夏黑葡萄可溶性糖含量的影响农药处理葡萄后，葡萄可溶性糖含量有所变化，数据表明，葡萄采摘后随着置放时间的延长，葡萄含糖量逐渐增加，但农药处理后的增加幅度大于清水处理的，在72h的测定值表明了此点时农药处理后的样本糖含量与清水的在α=0.05水平上有显著性差异。其余时间点的测定值在清水与农药处理之间没有显著性差异(图5)。同一样品不同时间取样测定值之间经F测验，相互之间有差异，F(清水)=28.64**，清水处理的样品在48h和72h之间，0h、12h和24h之间在p=0.05水平上没有显著性差异，两组之间在p=0.01水平上存在极显著性差异。F(农药)=61.79**，测定值分成三个差异性组，即0～24h，48h和72h，同一个组内数值在p=0.05水平上没有显著性差异，不同组的之间在p=0.01水平上存在极显著性差异。样品可溶性糖含量随着时间的变化率趋势见图6，图示表明了两种处理的变化趋势一致，均在48h后增加趋势变缓，但相互之间有差异，最终导致农药处理后的含糖量明显高于清水处理的。图5.葡萄可溶性糖含量变化趋势及差异性图6.葡萄可溶性糖含量变化率2.4药剂处理对夏黑葡萄酸度的影响农药处理后，葡萄的酸度有所变化，数据表明，葡萄的酸度变化不是一直随时间的延长增加的，在这过程中有一个转折点，在24h的测定值表明了此点时农药处理后的样本酸度与清水的在α=0.05水平上有显著性差异。其余时间点的测定值在清水与农药处理之间没有显著性差异(表1)。清水处理的夏黑葡萄大约在24h的时候出现一个最低峰，而农药处理的在48h出现最低峰，F(清水)=20.11**，清水处理中，0h、12h、24h在p=0.05水平上没有显著差异，显著差异存在于48h、72h，两组数值之6间在p=0.01存在极显著差异，F(农药)=13.40**，农药处理后，可分三个数据组，0～12h、24～48h、72h，同组数据之间在p=0.05水平上没有显著差异，不同组数据之间在p=0.01存在极显著差异。表1不同处理葡萄酸度值及差异性分析取样时间清水处理农药处理t测验均值±标准差F=20.11**均值±标准差F=13.40**0h0.43±0.01bB0.42±0.01bcBC1.2212h0.44±0.03bB0.44±0.05bAB0.124h0.44±0.03bB0.38±0.02cdBC3.26**48h0.37±0.01cC0.37±0.02dC072h0.51±0.01aA0.5±0.02aA0.553．结论与讨论高品质高效益是现代葡萄生产追求的目标，鲜食葡萄生产是目前葡萄主要的种植方式。优质鲜食葡萄品种的品质要求主要包括外观品质(果穗、果粒、着色程度、果粒着生松紧度等)，内在品质(含糖量、含水量、酸度、蛋白质等成分)，贮运性能(硬度、贮藏性、货运寿命)及卫生标准等4个方面，含糖量是鲜食葡萄品质的重要指标之一，美国要求葡萄的可溶性固形物在16%以上，我国主栽的鲜食葡萄品种的平均含糖量在14%～19%，只有含糖量高于此值的品种此有可能成为优质葡萄[9]。葡萄的氨基酸和蛋白质在葡萄的成分含量中是非常少的，这些微量的成分不同于那些芳香性微量成分，它们不会影响葡萄的口感，但是这些成分就营养作用方面来说是非常重要的，葡萄的品质是由多因素综合作用的结果[10-13]。通过使用腐霉利浸泡夏黑葡萄，在不同的时间段测定其糖含量、酸度、氨基酸和蛋白质的含量，结果发现农药腐霉利浸润葡萄对葡萄蛋白质、氨基酸没有明显影响，对糖含量、酸度有影响，也就是说使用腐霉利可以延长葡萄的储藏时间，但在一定程度上影响葡萄的口感和营养成分,在葡萄病