茵陈蒿汤醇提物对机体抗氧化能力影响

茵陈蒿汤醇提物对机体抗氧化能力影响更新日期：2011-05-18点击：洪敏朱荃李晓冬孙小玉提要为探讨茵陈蒿汤醇提物的保肝作用与机体抗氧化能力的关系，实验观察茵陈蒿汤醇提物在D-氨基半乳糖+脂多糖(D-GalN+LPS)和卡介苗+脂多糖(BCG+LPS)模型中对ALT、GST、LPO、SOD及GSH的影响。结果：茵陈蒿汤醇提物ig.6g/kg和9g/kg明显降低D-CalN+LPS肝损伤小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)活性，降低谷胱甘肽-S-转移酶(GST)水平，减少肝匀浆中脂质过氧化物(LPO)含量，对超氧化物歧化酶(SOD)活性无明显影响；4g/kg，6g/kg和9g/kg显著降低BCG+LPS免疫性肝损伤小鼠血清ALT水平，6g/kg和9g/kg增加肝匀浆还原型谷胱甘肽(GSH)含量。表明茵陈蒿汤醇提物经口给药能明显提高小鼠抗自由基损伤的能力，为其保肝作用的机理之一。关键词茵陈蒿汤醇提物；BCG+LPS免疫性肝损伤；D-GalN+LPS肝损伤AntilipoperoxidationActivityofAlcoholExtractofCapillarisDecoctionHongMin,ZhuQuan,LiXiaodong,etalNanjingUniversityofTCM,210029AbstractThemechanismofprotectingmicefromexperimentalliverinjuryofalcoholextractofCapillarisdecoctionwereobserved.ElevatedserumALT,GSTactivityinD-GalN+LPSliverinjurymodelwerereducedbyadose-dependenteffectofalcoholextract,corespondingwithreducedLPOlevel.AfteradministrationofBCG+LPS,serumALTlevelincreasedsignificantly.AlcoholextractreducedALTactivityandincreasedGSHlevelapparently.TheseresultssuggestalcoholextractofCapillarisdecoctionmightprotectmicefromexperimentalliverinjury,throughawayofantilipoperoxidation.KeywordsAlcoholextractofCapillarisDecoction;BCG+LPSliverinjury;D-GalN+LPSliverinjury茵陈蒿汤出自《伤寒论》，是治疗湿热黄疸的要方，临床用于多种黄疸证及传染性肝炎、急性病毒性肝炎、重型肝炎的治疗。茵陈蒿汤保肝作用得到多数学者的认可，韩德五等研究表明茵陈蒿汤对四氯化碳(CCl4)所致的肝损伤显示出良好的保肝作用［1］；对于大鼠异硫氰酸α－萘酯(ANiT)造成的黄疸型肝炎模型，茵陈蒿汤醇提物能使升高的谷丙转氨酶、谷草转氨酶降低，肝组织病理改变减轻［2］；孙学惠等研究提示［3］茵陈蒿汤醇提物对抗四氯化碳肝损伤的作用强于水煎液。茵陈蒿汤保肝作用的机理研究不多，林利光研究表明茵陈蒿汤中含有β－葡萄糖醛酸酶抑制活性物质［4］，认为可能是其抗肝损伤的机制之一。本文研究了茵陈蒿汤对D-氨基半乳糖+脂多糖(D-GalN+LPS)肝损伤及卡介苗+脂多糖(BCG+LPS)免疫性肝损伤小鼠血清ALT、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)、脂质过氧化物(LPO)、超氧化物歧化酶(SOD)及还原型谷胱甘肽(GSH)的影响，观察其对机体抗氧化能力的影响。1实验材料1.1动物：ICR小鼠，昆明种小鼠，南京中医药大学动物房，苏动(质)95038。1.2药材：茵陈蒿、栀子、大黄，购自南京中医药大学门诊部。1.3试剂：联苯双酯滴丸(Biphenyldimethyldicarboxylate,BDD)，广州星群(药业)股份有限公司生产，970109；脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)，SIGMA公司产品；D-氨基半乳糖(D-galactosamine,D-GalN)，重庆医学院，881030；卡介苗(BCG)，上海生物制品研究所，970501；还原型谷胱甘肽(ReducedGlutathiou,GSH)上海酵母厂生产，840903；硫代巴比妥酸(TBA)，江苏宜兴第二合成化厂，960301；1，1，3，3－四乙氧基丙烷(TEP)，FlukaChemika产品；谷丙转氨酶测定试剂盒，SOD测定试剂盒，GSH测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。2方法及结果2.1茵陈蒿汤醇提物对D-GalN+LPS诱导小鼠肝损伤ALT、LPO、SOD及GST的影响：ICR小鼠，♂，70只，(20.8±1.3)g，随机分为8组，即正常组(Normal)、D-GalN+LPS模型组(D-GalN+LPS)、联苯双酯组(BDD)、醇提物(B)1.78g/kg，2.67g/kg，4.0g/kg，6.0g/kg，及9.0g/kg组。给药组灌胃给药，正常组给等量生理盐水，1次/d，共3d，末次给药1.5h后，正常组腹腔注射10ml/kg生理盐水，其余各组腹腔注射D-GalN450mg/kg和LPS100μg/kg，15h后，小鼠眼眶取血，分离血清，测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷胱甘肽-S-转移酶(glutathioneS-transferase,GST)活性［5］；同时取肝脏0.2～0.3g，制成10%的匀浆，匀浆再以3500rpm离心10min，取上清测脂质过氧化物(lipidperoxidation,LPO)［6］和超氧化物歧化酶(superoxidedismutese,SOD)活性。结果见表1。由表1可见，茵陈蒿汤醇提物6g/kg，9g/kg，对D-GalN+LPS诱导的小鼠血清ALT升高有明显的降低作用(P＜0.01，P＜0.01)，且作用随着剂量的增大而增强；茵陈蒿汤醇提物6g/kg、9g/kg可显著降低D-GalN+LPS诱导的肝损伤小鼠血清GST活性的增高(P＜0.05)。茵陈蒿汤4g/kg，6g/kg，9g/kg可显著降低D-GalN+LPS引起的肝组织匀浆LPO水平升高(P＜0.05，P＜0.01)；茵陈蒿汤醇提物对小鼠肝匀浆SOD活性无明显影响(P＞0.05)。表1茵陈汤醇提物对D-GalN+LPS诱导小鼠肝损伤ALT、LPO、SOD及GST的影响(±s)组别剂量〔g/(kg.d)〕ALT(U)LPO(μmol/L)SOD(NU/ml)GST(IU/L)Normal-25.50±5.210.768±0.094395.28±29.1017.97±3.16D-GalN+LPS-171.72±81.51***1.139±0.210**363.07±75.8040.04±9.93***BDD0.1552.78±39.37##B1.78168.70±25.40***0.923±0.198399.91±26.0241.23±12.562.67150.40±23.97***0.878±0.214376.20±55.1742.57±18.184.0120.57±17.68***0.826±0.202#382.35±54.4839.63±10.406.072.29±15.88***0.806±0.120##409.10±28.6426.25±9.46#