罗氏ECL1010

罗氏电发光ECL1010/2010/E170罗氏(Roche)Elecsys系列Elecsys有三种系列产品,1010/2010和E170前身为德国宝灵曼产品与日本日立公司联合开发其Elecsys系列Elecsys1010为Roche自己设计生产Elecsys2010和E170为日本日立公司OEM产品配套试剂使用ECL技术,为另一家美国IGEN公司的专利技术ECL检测技术原理二价的三联吡啶钌在电场的作用下,失去一个电子氧化成三价的三联吡啶钌同时,在电场作用下,三丙胺也失去一个电子被氧化,然后脱氢成三丙胺自由基三丙胺自由基传递一个电子给三价的三联吡啶钌使之进入激发态激发态的三联吡啶钌不稳定,以发射一个波长为620nm的光子的形式释放能量而回到基态三联吡啶钌不被消耗,即发光标记物可循环发光ECL原理图CH3CH2CH2-N-CH2CH2CH3CH2CH2CH3CH3CH2CH2-N-CH2CH2CH3+e-CH2CH2CH3CH3CH2CH2-N-C-CH2CH3CH2CH2CH3+H+CH3CH2CH2-N-HCH2CH2CH3+CH3CH2CHO氧化电极.+..H氧化Ru(bpy)33+Ru(bpy)32++Ru(bpy)32+还原三丙胺(tripropylamine,TPA)ECL的测定模式ECL其它技术特点标记物三联吡啶钌分子量小,可标记任何抗原,抗体及核酸,水溶性,高稳定,确保反应的高效和稳定,无噪音干扰链霉亲和素-生物素包被技术聚苯乙烯直径2.8微米的磁性微球电化学发光标记物---三联吡啶钌N羟基琥珀酰胺(NHS)酯直径2.8微米磁性微粒子固相亲和素-生物素亲和素-生物素ECL的优势注:试剂表现不仅仅表现在灵敏度和宽线性,还有特异性,重现性,线性回归,携带率,准确性和临床符合性等多种表现灵敏度高(10-12~10-18)检测线性宽(7个数量级)Elecsys2010系统浏览系统控制中心样品转盘样品和试剂探针试剂搅拌棒蒸溜水液体废物固体废物反应管和Tip头TPA和洗液检测系统机械抓手探针试剂转盘Elecsys2010系统浏览内置样品盘外置样品盘Elecsys2010系统浏览样品转盘:30个位置试剂转盘:18个位置,15个试剂位置(另外3个放预稀释液和预处理液),运行时不能随意添加,非冷藏温度Elecsys2010系统浏览试剂样品探针,使用一次性Tip头,一个测试2~3只,仍需蒸溜水请洗混匀搅拌棒,蒸溜水清洗Elecsys2010系统浏览•反应杯架:60X3(最多5架)•Tip头架:120X3(最多5架)•孵育架:32个位置(有限)•机械抓手,容易机械故障Elecsys2010系统浏览固体废物:800个(反应杯和Tip头),不能运行时更换蒸溜水:2个探针,1个搅般棒液体废物:不能运行时更换Elecsys2010系统浏览Elecsys2010系统浏览Elecsys1010系统浏览系统控制键盘样品和试剂转盘样品和试剂探针试剂搅拌棒蒸溜水TPA和洗液探针废液桶Elecsys1010系统浏览6个试剂位置,手工开盖,不能放同种试剂66个样品位置,2个急诊位置不能随时加样和试剂反应杯位置128个不能随时添加手工加入和清除Elecsys1010系统浏览样品探针与搅拌棒在同一臂上,影响检测速度反应液探针,蒸溜水清洗—污染Elecsys1010系统浏览特设急诊位标准品和质控试剂和条码二点定标二点定标二点标准品ECL流动比色池光电倍增管测量池磁颗粒结合的标记物液流激发区磁铁工作电极未结合标记物计数电极ECL应用技术测量池电极电极工作电极磁铁光电倍增管ECL应用技术测量池电极电极工作电极磁铁光电倍增管TPATPATPATPAECL应用技术测量池电极电极工作电极磁铁光电倍增管TPATPATPATPAECL应用技术测量池电极电极工作电极磁铁光电倍增管TPATPATPATPAECL应用技术测量池电极电极工作电极磁铁光电倍增管Elecsys的弱点流动读数池—高携带率PMT和电极—寿命短(10万次),费用高磁性颗粒—比重比水重,试剂不均匀冲洗方式—表面被动冲洗,如酶标板,有残留蒸溜水探针清洗—高携带率试剂混匀—搅拌棒,有携带一次清洗—Hook效应质控—只控制低值或中值区域链霉亲和素-生物素包被技术—增加对样品的要求Elecsys的干扰•生物素•链霉亲和素•HAMA效应•Hook效应•流动池AxSYM与Elecsys主要性能比较AxSYMElecsys优势仪器类型立式台式符合现代实验室自动化需要方法学三种技术单一技术具有多种技术，可针对待测物质的理化性质的不同选择采用不同的方法,获得最优化结果运行方式随机,任意,持续,急诊批式,随机,急诊真正第三代全自动仪器,符合实验室自然工作流程,可任意增加样品,试剂和消耗品测试方式一步法,二步法,三步法,夹心法和竞争法一步法,夹心法(大多为一步法)根据待检物理化性质的不同灵活选择不同的检测原理和测试方式加以组合以取得最佳实验结果包被载体高分子材料,0.5μ磁颗粒.2.8μ悬浮性好,试剂更均匀信号检出方式速率法和终点法终点法速率法快且准确冲洗方式灵活,立体主动冲洗固定,表面被动冲洗根据不同被检物的特点设计不同冲洗次数,冲洗量,全面彻底的清洗,避免非特异性反应和前带效应反应时间灵活固定(9,9,9分钟)根据待检物理化性质的不同灵活选择不同的反应时间以取得最佳实验结果检测速度80~120T/h60~90T/h提高工作效率样本位一次60~90个,随时添加30,66,75个不等大量样品位,各种样品管类型,并可随时添加试剂位20个,随时添加6,15个,不可添加大量试剂位,并可随时添加,适合大批量,多项目连续运行消耗品可随时添加有条件限制可连续进行大批量运行AxSYM与Elecsys主要性能比较AxSYMElecsys优势反应区每个测试独立反应区流动池结构AxSYM每个测试均在独立的反应空间内进行，互相之间没有干扰且利于同时使用不同的检测方法。ECL采用流动池，测试之间存在干扰，影响结果试剂混匀方式仪器自动震荡混匀搅拌棒混匀避免污染试剂稳定性2~8℃尽效期,室温连续112~336小时,开瓶效期与标贴效期一致2~8℃尽效期,室温累积20小时,开瓶效期12周(2~8℃)雅培试剂不受试剂开瓶影响,并可长期上机,无须冷藏,试剂更稳定定标周期稳定一个批号试剂7~30天,Elecsys10103~7天,每个试剂盒试剂稳定性的表现标准品1,2和6点定标,可使用无限不同批号试剂2点,只能使用5个批号试剂,开瓶12周,上机5小时提供用户多种选择,节省标准品的费用和试剂费用,并保证结果高质量质控高,中,低三种,配L-J图低,中二种,都在低,中范围配合L-J图全面控制分析的整个线性范围灵敏度(TSH)0.01uIU/ml(第三代)0.014uIU/ml(第三代)极好的功能灵敏度精密度批内5%,批间10%,采用NCCLS的EP5-T2标准批内4%,批间7%,采用NCCLS的EP5-T标准雅培采用更严格的标准依然表现极佳的精密度携带率6×106IU/Lβ-HCG交叉测定于阴性标本时携带率＜1μIU/L；2g/L重组HBsAg交叉测定于阴性标本时携带率＜0.1μg/L因采用流动池设计，携带率较高，据报道，hCG，TSH，AFP，CEA有前带效应,特别1010,探针亦有携带,肝炎假阳性高Elecsys的多种项目因采用一步法并使用流动池，具有较高携带率并有前带效应。也不符合ATA、AACC对这些项目的推荐要求。AxSYM与Elecsys主要性能比较AxSYMElecsys优势线性范围(hCG)0~200,000mIU/ml0~10,000mIU/mlAxSYM自动稀释功能同样可达极宽的线性范围光路系统汞灯和卤钨灯,寿命长,费用低PMT和电极,寿命短,费用高二套光路系统,相互独立,读数时启动光源,寿命长,维修费用低,而PMT寿命短,且费用高,可达机价一半自动转测有无提高工作效率第一出结果时间8分钟9分钟急诊更快速吸样方式探针Elecsys2010,一次性Tip头增加隐含费用组合配套有,随意无限无用户使用更方便触摸屏有Elecsys1010无更有效地操作方式试剂盒自动开盖有Elecsys1010无试剂随用随取，避免试剂蒸发而造成的结果不准和浪费,并避免交叉污染试剂条码有,一维,可手工输入有,二维,只可仪器读避免条码破损引起不能操作,Elecsys试剂盒条码含标准曲线,一旦破损试剂盒就会报废标准曲线数4条不同批号曲线1条多条曲线同时可使用多个试剂盒,避免试剂盒的浪费或操作不便雅培与罗氏肝炎试剂比较(1)雅培罗氏种类甲,乙,丙肝炎乙肝定量项目HAV-IgG,AUSAB,HBeHBsAb检测步骤一步法(HAV,CORE),二步法(HBsAg,AUSAB,HBe,Anti-HBe,HCV)三步法(HAV-IgM,CORE-M)全部一步法检测抗体(HBsAg)固相抗体:鼠单克隆连接物抗体:羊单克隆固相和连接物都为鼠单克隆精密度(HBsAg)标准:6个panal,每个75份样品,每天4次,每次3个复管,超过2天,3个批号试剂.Intra-run4.3CV%Inter-run4.6CV%Intra-assay样品数21份,Inter-assay样品数9份,2组质控品,无其它任何说明Intra-assay6.9CV%Inter-assay7.6CV%*摘自各厂家试剂说明书雅培与罗氏肝炎试剂比较(2)雅培罗氏灵敏度(HBsAg)6组纯化的HBsAgad/ay亚型panal,每组panal每天测3次,测2天ad/ay的灵敏度为0.23ng/ml,最低可达0.17ng/ml样品用人HBsAg阴性血清样品进行系列稀释,无其它任何说明ad/ay的灵敏度为0.04U/ml(PEI)约0.4ng/ml可检测度(HBsAg)检测2052份献血员样品,835份住院病人样品,222份乙肝病人样品,分别为0.15%,0.60%和100%N/A特异性(HBsAg)99.95%99.84%*摘自各厂家试剂说明书雅培与罗氏质控品的比较范围质控1质控2质控3雅培0~35015~2564~96140~210罗氏0.605~12108.37~15.547~87无甲胎蛋白(AFP)范围质控1质控2质控3雅培0~100020~30120~180600~900罗氏0.1~100006.45~13.120.7~41.1无人类绒毛膜促性腺激素(HCG)罗氏不是标准品定标范围,而是可检测范围Saw,S.L.,2000.HepatitisBsurfaceantigenmutantdetectiononfourimmunoassayanalysers.Clin.Chem.46Supl.:A53.Shadedarea=cutoffornegative,RHBsAgmutantsample@1ng/mLArchitectAxSymElecsysVitrosECiHBsAgsubtype‘ad’0.2373.523.284.08Gln129-His0.1823.202.613.50Pro142-Ser+Gly145-Arg0.1774.940.4540.19Met133-Leu0.2554.183.083.47Thr126-Ser0.2142.932.783.05Gly145-Arg0.1613.630.5180.20Asp144-Ala+Gly145-Arg0.1435.270.5800.23Thr126-Ser+Gly145-Arg0.1353.990.6010.16Asp144-Ala0.2025.233.670.28Pro142-Leu+Gly145-Arg0.3758.080.5420.15Wildtype–adw20.3375.364.376.51HBsAgsubtype‘ay’0.4274.415.348.99NegCtrl0.0001.090.4560.13UnitsIU/mLS/NS/COS/COReactivecut-of