蒙药地格达-4味汤对小鼠化学性肝损伤论文蒙药地格达-4味汤对小鼠化学性肝损伤的实验研究研究

蒙药地格达-4味汤对小鼠化学性肝损伤论文：蒙药地格达-4味汤对小鼠化学性肝损伤的实验研究【摘要】目的观察地格达-4味汤对D-半乳糖胺(D-GlaN)、硫代乙酰胺(TAA)所致小鼠肝损伤的防治作用。方法以护肝片作阳性对照,用不同肝毒剂造成小鼠急性肝损伤模型,分别测定动物血清相关指标,用t检验法比较各组间差异。结果地格达-4味汤组可降低因D-GlaN所致肝损伤小鼠的ALT及AST(P0.05)；明显降低因TAA所致肝损伤小鼠的ALT及AST(P0.01)。模型组肝组织学改变主要表现为碎片状坏死；护肝片组可见散在点状及小碎片状坏死；地格达-4味汤组可见散在点状坏死，有炎细胞浸润。结论地格达-4味汤对以上不同肝损伤模型有一定的防治作用,本研究为该药的功效及应用提供了实验依据。【关键词】地格达-4味汤;D-GlaN;TAA;急性肝损伤Abstract：ObjectiveToobservetheprotectiveandtreatmentactionofDigeda-4powderforD-GlaNandliverlesionofmiceinducedbyTAA.MethodsPositivelycontrolledwithHuganpian,theabove-notedliver-toxicagentswereadministeredtomakeacuteliverlesionofmicetomeasuretherelativeindicesofanimalserum.Methodoft-testwasusedtocheckthedifferencebetweenthegroups.ResultsDigeda-4powderdecreasedtheserumALTandASTofliverlesionmiceinducedbyD-GlaN(P0.05);andobvioslyloweredthetheserumALTandASTofliverlesionmiceninducedbyTAA(P0.01).Thechangeofhepatictissuesinmodelgroupsshowedthepiecemealnecrosis;thehepatictissuesinpositivecontrolgroupsshowedscatteredpunctiformanddiminpiecemealnecrosis;thehepatictissuesinDigeda-4powdergroupsshowedscatteredpunctiformanddiminpiecemealnecrosis;alsoitwasinfiltratedphlegmonosiscell.ConclusionDigeda-4powderhasprotectiveandtreatmentactionontheabovementioneddifferentliverlesionmodelstosomeextent.Thetestislikelytoprovidetheexperimentalbasisfortheeffectandapplicationofthisherb.Keywords：Digeda-4powder;D-GlaN;TAA;AcuteLiverLesion地格达-4味汤（又叫肋柱花四味汤）是蒙医常用方剂之一。本复方由肋柱花、瞿麦等蒙药材组成,具有清血热、分解精华与糟粕等功效。主要用于紊乱血热症，血热相搏，肝胆湿热，咽喉肿痛，口渴干燥等多种病证［1］。该实验主要观察了地格达-4味汤对D-GlaN和TAA所致肝损伤的保肝降酶作用。1材料1.1动物昆明小鼠,体质量18～22g,雌雄各半。合格证书：SCXK(辽)2003-0016，由沈阳医学院实验动物中心提供。1.2药品及仪器地格达-4味汤，内蒙古民族大学蒙医药学院内蒙古自治区教育厅重点实验室提供。D-半乳糖胺（D-GlaN），SIGMa公司，批号：58461。硫代乙酰胺（TAA），中国医药集团上海化学试剂公司，批号：458666。天门冬氨酸氨基转移酶(AST)：中生北控生物科技股份有限公司，批号：080120。丙氨酸氨基转移酶(ALT)试剂盒：中生北控生物科技股份有限公司，批号：080122。全自动生化仪(PRONTO-E型号),离心机(LD4-40),精密电子天平(BS210S型)。2方法2.1地格达-4味汤对D-GlaN所致小鼠急性肝损伤的影响［2］取小鼠48只，随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组、地格达-4味汤组等4组，每组12只。正常对照组和模型组给予0.9%生理盐水20ml/kg灌胃；阳性对照组给予护肝片0.6g·kg-1灌胃；地格达-4味汤组给予地格达-4味汤4.3g·kg-1灌胃，1次/d，连续1周。于末次给药后1h，除空白组外，其余3组小鼠均腹腔注射D-GlaN800mg·kg-1之后禁食不禁水，24h后断头处死动物，2500r·min-1离心10min,取血清测丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）。取肝大叶相同部位组织，用10％福尔马林固定，切片，HE染色，光镜观察组织变化。2.2地格达-4味汤对TAA所致小鼠急性肝损伤的影响［3］取小鼠48只，随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组、地格达-4味汤组等4组，每组12只。正常对照组和模型组给予0.9%生理盐水20ml/kg灌胃；阳性对照组给予护肝片0.6g·kg-1灌胃；地格达-4味汤组给予地格达-4味汤4.3g·kg-1灌胃，1次/d，连续1周。于末次给药后1h，除空白组外，其余3组小鼠均腹腔注射TAA80mg·kg-1之后禁食不禁水，24h后断头处死动物，2500r·min-1离心10min,取血清测丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）。取肝大叶相同部位组织，用10％福尔马林固定，切片，HE染色，光镜观察组织变化。2.3统计学处理各组数据均用SPSS10.0统计软件做统计学处理，结果以±s表示,应用两样本均数的t检验判定其差异,以P0.05作为显著性差异的标准。3结果3.1地格达-4味汤对D-GlaN所致小鼠急性肝损伤血清酶变化的影响结果见表1。表1地格达-4味汤对D-半乳糖胺所致小鼠急性肝损伤的影响（略）由表1结果可见，地格达-4味汤组小鼠血清ALT及AST较模型组降低。表明该药可降低因D-GlaN而造成的肝损伤升高的血清转氨酶。3.2地格达-4味汤对D-GlaN所致小鼠急性肝损伤组织形态学改变的影响见图1，表2。表2地格达-4味汤对D-半乳糖胺所致小鼠急性肝损伤组织形态学改变的影响只（略）由组织学图1及表2可见，模型组普遍存在肝组织碎片状或小碎片状坏死灶，并伴有大量淋巴细胞、中性粒细胞浸润，坏死区周围可见肝细胞脂肪变性和嗜酸性变；护肝片组可见散在点状及小碎片状坏死，以被膜下及小叶中央区为著，伴有淋巴细胞，以轻度肝细胞脂肪变性和水肿为主要改变。地格达-4味汤组肝组织损伤状况较轻，可见散在少数点状及小碎片状坏死，有淋巴细胞和中性粒细胞浸润，主要表现为肝细胞脂肪变性和水肿。表明地格达-4味汤对D-GlaN所致肝组织病理损伤具有保护作用。3.3地格达-4味汤对TAA所致小鼠急性肝损伤血清酶变化的影响结果见表3。表3地格达-4味汤对硫代乙酰胺（TAA）所致小鼠急性肝损伤的影响（略）由表3结果可见，地格达-4味汤组小鼠血清ALT及AST较模型组明显降低。表明该药可明显降低因TAA而造成的肝损伤升高的血清转氨酶。3.4地格达-4味汤对TAA所致小鼠急性肝损伤组织形态学改变的影响见图2及表4。表4地格达-4味汤对硫代乙酰胺（TAA）所致（略）由组织学图2及表4可见，模型组与正常组比较肝小叶结构不完整，可见肝组织碎片状坏死灶，并伴有大量淋巴细胞、中性粒细胞浸润，坏死区周围可见肝细胞脂肪变性和嗜酸性变；护肝片组可见散在点状及小碎片状坏死，以被膜下及小叶中央区为著，伴有淋巴细胞和少量再生肝细胞，以轻度肝细胞脂肪变性和水肿为主要改变。地格达-4味汤组只见少数小点状坏死，内有少量淋巴细胞和中性粒细胞浸润，主要表现为肝细胞脂肪变性和水肿。表明地格达-4味汤对TAA所致肝组织病理损伤具有保护作用。4讨论药理实验研究表明,D-半乳糖胺引起的化学性肝损伤模型,是目前国际上常用的肝炎模型之一,其中毒机制的研究也较为深入。D-半乳糖胺通过引起肝脏的代谢紊乱而导致肝损伤。一般认为,D-半乳糖胺与肝细胞内尿苷二磷酸(UDP)结合而形成(UDP-半乳糖胺复合物,使尿苷三磷酸(UTP)耗竭,尿苷类化合物环化不能进行,致使RNA和蛋白质合成受阻,质膜结构蛋白质合成减少,使UDPG-焦磷酸转移酶活性和数量均下降,引起糖(包括糖原和粘多糖)和磷脂代谢障碍,膜损伤加重,Ca2+内流增加,最后细胞中毒死亡。此模型中,肝细胞破损后释放出谷丙和谷草转氨酶,使血清中其二者均升高［3］。硫代乙酰胺,干扰RNA从细胞核到细胞质的转运过程,影响蛋白质的合成。其可能损害肝细胞膜,致使细胞的离子环境破坏,导致肝细胞坏死［3］。实验研究表明,地格达-4味汤对动物因D-半乳糖胺、硫代乙酰胺所造成的急性肝损伤,有一定的防护作用。该药可降低D-半乳糖胺、硫代乙酰胺所致肝损伤小鼠的血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶。地格达-4味汤对肝组织损伤坏死、变性有明显的改善作用。表明地格达-4味汤对D-半乳糖胺、硫代乙酰胺所致肝组织病理损伤具有保护作用,实验结果与该药血热相搏，肝胆热等有相符之处，为其临床应用及今后的有效开发利用提供了依据。【参考文献】［1］白清云．中国医学百科全书·蒙医学［M］．上海：上海科技出版社，1992:270.［2］万震，刘振国．百令胶囊对D-氨基半乳糖所致肝损害有关的酶学变化的实验研究［J］.中华实用中西医结合杂志，2003,16(3):2001.［3］曲莉莎，曾万玲，梁光义．民族药马蹄金提取物对D-GlaN、TAA、ANIT所致小鼠化学性肝损伤的药理作用研究［J］.中国医药学报，2003,18(2):84.