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实验报告课程名称:生理科学实验指导老师:陆源成绩:实验名称蟾蜍坐骨神经干动作电位的研究同组学生:一、实验目的和要求(必填)二、实验内容和原理(必填)三、主要仪器设备(必填)四、操作方法和实验步骤五、实验数据记录和处理六、实验结果与分析(必填)本人Email:蟾蜍坐骨神经干动作电位的研究(浙江大学医学院级临床医学七年制生理科学实验班组,浙江杭州310058)[摘要]目的:测定蟾蜍坐骨神经干复合动作电位(compoundactionpotential,CAP),探讨蟾蜍坐骨神经干动作电位的特性、双相动作电位形成机制及神经损伤、药物对神经兴奋传导的影响。方法:制备坐骨神经干,测定中枢端引导的BAP,引导电极间距离与动作电位振幅和时程的关系,测定末梢端引导的双相动作电位,测定末梢端引导的双相动作电位,兴奋传导速度的测定,测定单相动作电位,观察刺激强度(U)与动作电位振幅的关系,测定KCl处理前后AP振幅,测定procaine处理前后BAP振幅。结果:中枢引导时,在刺激电压1.0V,波宽0.1ms的方波刺激下,第一、二对引导电极引导出的动作电位之间,正相与负相振幅大小均有显著性差异(P0.05),正相与负相时程长度之间均有显著性差异(P0.05);末梢引导时,在刺激电压1.0V,波宽0.1ms的方波刺激下,第一对引导电极引导出的动作电位的正相振幅与负相振幅大小间有显著性差异(P0.05),正相时程与负相时程长度间有显著性差异(P0.05);末梢引导时,用刺激电压1.0V,波宽0.1ms的方波刺激,当引导电极距离为10/20/30mm时,动作电位的正相振幅与负相振幅大小间均有显著性差异(P0.05);引导电极距离10mm时动作电位的正相振幅/负相振幅与引导电极距离20mm时相比均有显著性差异(P0.05);引导电极距离10mm时动作电位的正相振幅与引导电极距离30mm时相比有显著性差异(P0.05)。夹伤神经后,测定得的末梢单相动作电位振幅与时程相较双相动作电位均有显著性差异。经3molKCl处理2分钟后,正相动作电位振幅与负相动作电位振幅与处理前均有显著性差异(P0.05)。经4%procaine处理5分钟后,正相动作电位振幅与负相动作电位振幅与处理前均有显著性差异(P0.05)。结论:ApAn与DpDn有统计学意专业:临床医学姓名:学号:日期:2013.3.14地点:教C义。Ap和An分别由R1和R2引导所得。NF传导速度的不同使ApAn。BAP是由不对称正相波和负相波叠加而成。[关键词]坐骨神经干;双相动作电位;刺激伪迹;单相动作电位;时程1材料和方法1.1实验动物(laboratoryanimal)蟾蜍(中华蟾蜍指名亚种,ZhuoshanToad),性别、体重。1.2药品(drug)任氏液、4%普鲁卡因、3mol/L氯化钾1.3器材(Experimentalapparatus)RM6240生物信号处理系统(RM6240multichannelphysiologicalrecordingandprocessingsystem)(成都仪器厂)、神经标本盒(nervechamber)。1.4制备坐骨神经干(preparationofsciaticnervetrunk)蟾蜍毁脑脊髓,去上肢和内脏,下肢剥皮浸于任氏液中。蟾蜍下肢背面向上置于蛙板上,剪去尾椎;标本腹面向上,用玻璃分针分离脊柱两侧神经丛,用线在近脊柱处结扎,剪断神经;将神经干从腹面移向背面。标本背面向上固定,从大腿至跟腱分离坐骨神经。坐骨神经标本置任氏液中备用。1.5仪器连接和参数(Apparatusjunctionandparameter)神经干标本盒两对引导电极分别接微机生物信号处理系统1、2通道。刺激器输出接刺激电极。1、2通道时间常数0.02s、滤波频率3KHz、灵敏度5mV,采样频率:100KHz,扫描速度:0.2ms/div。单刺激方式,电压1.0V,波宽0.1ms,延迟1ms,同步触发。2观察2.1测定中枢端引导的BAP用1.0V电压,波宽0.1ms方波刺激神经干末梢端,测定中枢端BAP正、负相振幅(amplitude)和时程(duration)(表1数据)2.2引导电极间距离与动作电位振幅和时程的关系用1.0V电压,波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干中枢端,测定第1对引导电极间距为10、20、30mm时的BAP正相振幅和时程。(表2、3)2.3测定末梢端引导的双相动作电位用1.0V电压,波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干中枢端,测定末梢端BAP正、负相振幅和时程。(表4数据)2.4兴奋传导速度的测定利用前一实验结果测定第1和第2对引导电极引导CAP起点的时间差Δt,根据υ=SR1-R2-/Δt计算出AP的传导速度。(表6)2.5测定单相动作电位(monophasicactionpotential,MAP)用镊子夹伤对1对引导电极间的神经干,然后用1.0V电压,波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干中枢端,测定末梢端MAP振幅和时程。(表4数据)2.6观察刺激强度(U)与动作电位振幅的关系刺激波宽0.1ms,刺激电压从0.1V开始,按步长0.01V增加,刺激电压每增加一次刺激神经干一次,并记录刺激电压和MAP振幅。(表5数据)2.7测定KCl处理前后AP振幅刺激电压1.0V,刺激波宽0.1ms,记录3mol/LKCl处理前,处理后2min时BAP的振幅。(表7数据)2.8测定procaine处理前后BAP振幅刺激电压1.0V,刺激波宽0.1ms,记录4%procain处理前,处理后5min时BAP的振幅。(表8数据)3.实验结果3.0实验所用蟾蜍体重记录表0.中华蟾蜍指名亚种动物编号性别体重(g)1雄1222雄673雌1164雌985雄966雌1177雌1408雌879雄8410雌84x101.10s22.12816205x±s101.10±22.133.1中枢端引导的BAP刺激电压1.0V刺激波宽0.1ms的条件下:中枢引导时,在刺激电压1.0V,波宽0.1ms的方波刺激下,第一对引导电极正相的振幅和时程分别与负相的振幅和时程大小有显著性差异(P0.05),第二对引导电极正相的振幅和时程分别与负相的振幅和时程大小有显著性差异(P0.05)。第一、二对引导电极引导出的动作电位之间,正相与负相振幅大小均有显著性差异(P0.05),正相与负相时程长度之间均有显著性差异(P0.05)。见表1表1.蟾蜍坐骨神经干中枢引导的复合动作电位sampleA1chp(mV)A1chn(mV)D1chp(ms)D1chn(ms)A2chp(mV)A2chn(mV)D2chp(ms)D2chn(ms)16.423.981.132.672.541.491.572.6124.752.671.443.432.391.491.912.8934.012.431.222.43.222.391.732.444.22.641.282.514.511.432.042.6154.142.431.193.412.831.661.523.7365.582.111.553.913.052.081.533.4172.361.5271.212.771.050.941.53.3383.310.59812.122.221.821.532.2592.691.2091.422.621.7951.1241.732.59101.4530.6721.191.792.451.61.632.88x3.892.031.262.762.611.601.672.87s1.501.040.160.650.920.420.180.48x±s3.89±1.502.03±1.041.26±0.162.76±0.652.61±0.921.60±0.421.67±0.182.87±0.483.2引导电极间距离与动作电位振幅和时程的关系末梢引导时,用刺激电压1.0V,波宽0.1ms的方波刺激,当引导电极距离为10/20/30mm时,动作电位的正相振幅和时程分别与负相振幅和时程大小均有显著性差异(P0.05);引导电极距离10mm时动作电位的正相振幅/负相振幅与引导电极距离20mm时相比均有显著性差异(P0.05);引导电极距离10mm时动作电位的正相振幅与引导电极距离30mm时相比有显著性差异(P0.05)。(表2、3)表2.引导电极间距离对坐骨神经干动作电位振幅的影响(mV)sampleA10pA10nA20pA20nA30pA30n17.584.258.935.478.983.5324.562.5264.216.122.5435.692.998.886.849.598.4547.633.9712.036.712.557.0156.42.3611.335.9212.096.8965.452.277.694.827.853.7676.143.227.053.227.112.5588.380.9313.395.714.246.64910.064.0310.584.2910.963.85102.921.056.563.857.564.59x6.482.769.245.109.714.98s2.031.172.501.222.672.09x±s6.48±2.032.76±1.179.24±2.505.10±1.229.71±2.674.98±2.09表3.引导电极间距离对坐骨神经干动作电位时程的影响(ms)D10pD10nD20pD20nD30pD30n1.123.151.313.191.493.891.32.061.422.311.592.891.532.881.943.12.323.911.473.431.713.41.864.151.433.211.683.71.723.721.442.51.742.811.923.771.283.51.623.991.914.71.172.31.32.531.732.241.393.331.813.42.793.361.422.541.843.242.033.17x1.362.891.643.171.943.58s0.130.510.220.510.380.69x±s1.36±0.132.89±0.511.64±0.223.17±0.511.94±0.383.58±0.693.3测定末梢端引导的双相动作电位用1.0V电压,波宽0.1ms的单个方波激刺激神经干中枢端,测定末梢端BAP正、负相振幅和时程。(表4数据)通过单相与双相动作电位的比较,我们发现单相的时程大于双相(p0.01)而振幅则取决于正向波和负向波的相位差。这进一步证实了BAP是由不对称正相波和负相波叠加而成。表4.蟾蜍坐骨神经干双相和单相复合动作电位sampleAbp(mV)Abn(mV)Dbp(ms)Dbn(ms)Am(mV)Dm(ms)18.334.691.052.939.122.2825.112.861.21.95.633.5436.313.241.562.946.252.5547.824.081.522.757.062.3156.692.641.263.047.952.465.452.271.442.54.082.3376.143.221.283.55.452.6488.380.931.172.39.363910.644.291.53.9610.433.42102.921.051.422.542.612.41x6.782.931.342.846.792.69s2.141.270.170.592.470.47x±s6.78±2.142.93±1.271.34±0.172.84±0.596.79±2.472.69±0.473.4兴奋传导速度的测定AP的传导速度为23.71±6.61(表6)表6.蟾蜍坐骨神经干阈刺激、最大刺激和传导速度sampleUth(V)Umax(V)V(m/s)10.220.927.0320.290.8921.7430.320.8
本文标题:蟾蜍坐骨神经干动作电位的研究
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