苦杏仁甙的镇痛作用和无身体依赖性研究

苦杏仁甙的镇痛作用和无身体依赖性研究苦杏仁甙具有缓解癌症晚期患者疼痛和改善症状的作用。它在保健、医疗领域的应用因其对健康细胞的不作用而备受关注，本次实验，西安源森生物实验室以醋酸扭体法和小鼠热板法研究苦杏仁甙的镇痛作用且无耐受性。一、苦杏仁甙镇痛且无耐受性实验（一）实验材料苦杏仁甙；盐酸吗啡注射液系；氢澳酸烯丙吗啡；阿斯匹林；冰醋酸和二甲苯(均AR级)；巴豆油，西安源森生物实验室从巴豆种子中提取而得；昆明种小鼠和Wistar大鼠；以上材料均为专业厂家提供。（二）苦杏仁甙镇痛作用实验1.小鼠热板法雌性小鼠，体重18~22g，选用痛反应时间少于15s者，sc苦杏仁甙或阿斯匹林，每剂量组8~10鼠，给药后30~60min痛反应时间延长1倍以上者作为有镇痛作用。机率单位法计算半数有效量(ED50)，sc苦杏仁甙和阿斯匹林的ED50分别为457(371~564)mg/kg和501(406~618)mg/kg(表1)。2.醋酸扭体法雄性小鼠100只，体重18~23g，随机均分为10组，先分别sc不同剂量的药物，90min后ip0.7%醋酸10ml/kg，5min后开始记录15min内小鼠扭体次数，结果见表2。同上法计算苦杏仁甙和阿斯匹林的ED50分别为288(234~355)mg/kg和240(195~296〕mg/kg。3.镇痛作用维持时间雌性小鼠30只，体重18~22g，随机均分为3组，给药组sc苦杏仁甙100,300mg/kg，对照组sc生理盐水10ml/kg。sc苦杏仁甙30~45min后开始产生镇痛作用，1.5~2h镇痛作用最强，此后作用缓慢下降，镇痛作用可维持4h以上(图1)。（三）苦杏仁甙身体依赖性试验1.镇痛作用耐受性选择热板法测痛反应时间少于15s之雌性小鼠20只，均分为2组，分别每天sc苦杏仁甙300mg/kg或盐酸吗啡20mg/kg，连续10天，热板法测痛。苦杏仁甙组小鼠随给药天数的增加痛阈提高未见有明显减弱，而盐酸吗啡组小鼠随给药天数的增加，镇痛作用明显减弱（图2）。2.小鼠竖尾试验雌性小鼠40只，体重19~23g，均分为4组，分别ip盐酸吗啡20，30mg/kg或苦杏仁甙0.5，1.0g/kg，观察2h。吗啡组小鼠全部出现竖尾反应，兴奋走动，苦杏仁甙组小鼠无竖尾反应,安静少动。3.小鼠跳跃试验雄性小鼠27只，体重20~24g，均分为3组，分别sc苦杏仁甙、盐酸吗啡或生理盐水。第1天注射5次(时间为9:00,10:00,11:00,14:00,16:00)，第2天注射2次(时间为9:00,11:00)。吗啡剂量由2.5mg/kg开始，按几何级数递增，苦杏仁甙起始剂量为200mg/kg，每次递增50mg/kg，于末次给药后2hip烯丙吗啡50mg/kg，随即记录10min内小鼠跳跃反应。吗啡组小鼠在ip烯丙吗啡后出现跳跃反应，苦杏仁试组和对照组小鼠均不出现跳跃反应(表3)。4.依赖吗啡大鼠撤药戒断症状替代试验Wistar大鼠24只，雌雄兼用，体重127~189g，各大鼠单只饲养，每天上下午各sc盐酸吗啡25mg/kg一次，连续给药12周后，大鼠对吗啡产生依赖，然后突然撤去吗啡，大鼠外观呈现抑制少动，不饮不食，体重在24h后明显下降。此时给12只大鼠sc盐酸吗啡25mgk/g，外观行为很快由抑制转入兴奋，频繁吃食饮水，活动增多，8h内体重回升到停给吗啡前水平。给另外12只大鼠sc苦杏仁甙500mg/kg后，外观仍处于闭目、俯伏的抑制状态，给药后8h体重未见回升(图3)。（四）苦杏仁甙抗炎试验1.鼠耳二甲苯致炎法雄性小鼠40只，体重19~24g，均分为4组，按表4所示ip给药1h后，尾静脉注射1，伊文思蓝溶液10ml/kg，立即在小鼠左耳滴上二甲苯2滴，15min内观察耳片显色情况，对照组全部显亮蓝色(表4)。2.局部巴豆油致炎法雌性小鼠32只，体重19~24g，均分为4组，ip给药后每鼠右耳涂以巴豆油致炎液(2%巴豆油，5%水，20%无水乙醇，73%乙醚)0.1ml，4h后剪下双耳，分别称重，计算肿胀度(肿胀度=右耳重一左耳重)，结果见表5。二、苦杏仁甙镇痛作用和无身体依赖性实验结果与讨论（一）实验结果1.苦杏仁甙在醋酸扭体法和小鼠热板法中均显示镇痛作用（表1，2），且其镇痛作用不产生耐受性。2.苦杏仁甙是不同于吗啡的镇痛剂，不具有身体依赖性。小鼠竖尾反应与药物依赖性有一定的平行关系，以吗啡特有的S形竖尾反应为指标与苦杏仁甙比较，结果表明苦杏仁甙不同于吗啡类镇痛药。反复给与吗啡后，应用吗啡拮抗剂烯丙吗啡诱发的小鼠跳跃反应为戒断症状指标之一，以推测身体依赖性程度。用两天法给不同剂量苦杏仁甙的小鼠无跳跃反应，而吗啡组小鼠有明显的跳跃反应(表3)。苦杏仁甙对吗啡成瘾大鼠突然停药后出现的戒断症状，没有替代作用(图3)。3.苦杏仁甙无抗炎作用。小鼠耳二甲苯致炎法和巴豆油致炎法（表4，5）实验表明苦杏仁甙无抗炎作用。4.苦杏仁甙口服之后会在肠胃道分解产生氢氰酸引起中毒，但实验研究已经表明，人体肌注或静注苦杏仁甙之后，在体内几乎不发生分解，而是以原形由尿液排泄。（二）实验结果讨论以上实验结果表明，苦杏仁甙对人体具有镇痛作用，可临床用于癌症晚期患者的辅助治疗和改善症状的作用。苦杏仁甙的无身体依赖性避免了吗啡镇痛引起的副作用，这对于苦杏仁甙的医学保健领域应用具有十分重要的意义。