磁性纳米颗粒金纳米颗粒生物条形码PCRDNA探针大肠杆菌O157H7硕士论文

应用生物功能化纳米颗粒检测大肠杆菌O157：H7的研究.【摘要】大肠杆菌O157：H7(EscherichiacoliO157:H7,E.coliO157:H7)是肠出血性大肠杆菌的一个主要菌型,曾在世界范围内多次暴发,严重威胁着人们的健康并造成巨大经济损失。本文建立了两种生物功能化纳米颗粒对大肠杆菌0157：H7进行检测的方法,并用于对人工污染牛奶样品的检测,主要研究方面如下：生物功能化纳米颗粒的制备。利用柠檬酸钠还原法制备粒径为13nm的金纳米颗粒(Au-NPs),用大肠杆菌O157：H7多克隆抗体、巯基化捕获DNA链、条形码DNA链、探针DNA链等制备生物功能化Au-NPs,利用UV-vis、TEM等对制备和修饰过程进行表征。通过共沉淀法制备粒径为27±4nm的磁性纳米颗粒(MNPs),采用3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)修饰和戊二醛交联制备得到大肠杆菌0157：H7单克隆抗体功能化的MNPs。生物功能化纳米颗粒检测大肠杆菌0157：H7方法研究。利用生物功能化的MNPs和Au-NPs与目标物大肠杆菌0157：H7进行免疫反应,形成MNPs/目标物/Au-NPs三明治”式复合体,磁场分离后去杂交将Au-NPs上标记的条形...更多还原【Abstract】E.coliO157:H7(EscherichiacoliO157:H7,E.coliO157:H7)istheenterohemorrhagicE.coliserotypemostoftenassociatedwithdiseaseoutbreaksandwiththeonsetofseverediseaseinworldwide,whichresultedinseriousthreatforpeoplehealthandhugeeconomiclosses.Inthispaper,wedescribetwomethodsforE.coliO157:H7objectdetectionbasedbiofunctionalizednanoparticles,andappliedmethodsforthedetectionofcontaminationofmilkbyE.coliO157:H7.Themainresearchareas:Pre...更多还原【关键词】磁性纳米颗粒；金纳米颗粒；生物条形码；PCR；DNA探针；大肠杆菌O157:H7；【Keywords】magneticnanoparticles；goldnanoparticles；bio-barcodes；PCR；DNAprobes；EscherichiacoliO157:H7；摘要5-6Abstract6第一章引言7-151.1传统的检测方法71.2免疫学检测方法7-91.2.1酶免疫测定技术7-81.2.2免疫层析技术81.2.3免疫磁珠分离技术8-91.3分子生物学检测方法9-101.4纳米技术及其在生物分析中的应用10-141.4.1纳米材料概述101.4.2纳米技术在生物分析中的应用10-141.5立题背景及本文的主要研究内容14-15第二章材料与方法15-232.1材料15-162.1.1实验用微生物152.1.2培养基152.1.3化学试剂152.1.4生化试剂15-162.1.5主要仪器和设备162.1.6主要溶液的配制162.2方法16-232.2.1抗体和寡核苷酸双修饰金纳米颗粒的制备16-182.2.2探针修饰金纳米颗粒的制备182.2.3生物功能化的磁性纳米颗粒制备18-192.2.4食源性病原微生物的制备192.2.5基于生物条形码的常规PCR检测方法的建立19-202.2.6基于生物条形码探针和金纳米颗粒检测方法的建立20-212.2.7对人工污染牛奶中的大肠杆菌O157:H7的实测21-23第三章结果与讨论23-413.1生物功能化金纳米颗粒和磁性纳米颗粒的制备和鉴定23-283.1.1金纳米颗粒的鉴定结果23-243.1.2抗体和DNA双修饰金纳米颗粒的制备及鉴定结果24-263.1.3探针修饰的金纳米颗粒的鉴定结果26-273.1.4生物功能化磁性纳米颗粒表面抗体偶联效率测定27-283.2生物功能化纳米颗粒检测大肠杆菌O157:H7方法研究28-363.2.1基于生物条形码的常规PCR检测大肠杆菌O157:H728-323.2.2基于生物条形码和金纳米颗粒检测大肠杆菌O157:H732-363.3对人工污染牛奶中大肠杆菌O157:H7检测结果36-413.3.1基于生物条形码的常规PCR对人工污染牛奶检测结果36-373.3.2基于生物条形码和金纳米颗粒对人工污染牛奶检测结果37-41结论41-43致谢43-45参考文献【索购全文】Q联系Q：1381137211030850491全文提供服务费：25元RMB即付即发支付宝账号：[e-mail]【说明】1、本站为中国学术文献总库合作代理商，作者如对著作权益有异议请与总库或学校联系；2、为方便读者学习和引用，我们可将图片格式成WORD文档，费用加倍。