第十一章胺类药物的分析(2011)

第十一章胺类药物的分析第一节盐酸普鲁卡因及其制剂的分析一、盐酸普鲁卡因：具芳伯氨基可重氮化，酯基可水解、盐酸盐（一）鉴别：1、水解反应NH2COOCH2CH2N(C2H5)2.HClCOOCH2CH2N(C2H5)2H2NHClNaOHCOOCH2CH2N(C2H5)2H2NH2NCOONaNaOHHCl使湿润红色石蕊试纸变蓝H2NCOOH白色HOCH2CH2N(C2H5)2溶解状态沉淀溶解+使试纸变色气体沉淀溶解2、红外光谱法（芳伯氨基、苯环、酯基）波数(cm-1)振动类型归属3315，3200NH2伯氨（双峰）1692C=O羰基1271，1170，1115C-O酯基1604，1520C=C苯环（双峰）3、氯化物的检查：与AgNO3反应白色沉淀；二氧化锰氯气使湿润KI淀粉试纸显蓝色。4、芳香第一胺反应：盐酸酸性下与亚硝酸钠，-萘酚反应产生橙红色沉淀。NH2COOCH2CH2N(C2H2)2HCl+NaNO2+2HClNCOOCH2CH2N(C2H2)2+NaCl+2H2ONClNCOOCH2CH2N(C2H2)2NCl+OH+NaOHNCOOCH2CH2N(C2H2)2N=OH+NaCl+H2O橙红色沉淀（二）杂质检查：酸度、溶液的澄清度、干燥失重、铁盐和重金属等新增-对氨基苯甲酸：反相液相色谱法检查色谱条件：十八烷基硅烷键合硅胶为色谱填充柱；0.1%庚烷磺酸钠的0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（pH3.0）-甲醇（68:32）为流动相；检测波长279nm。对氨基苯甲酸对照品同时进样，浓度为1ug/ml；按峰面积计，不得过0.5%。（三）含量测定：分子结构中含有芳伯氨基，亚硝酸钠滴定法测定含量。滴定剂：亚硝酸钠；指示终点方法：永停法；反应原理：芳伯氨基与亚硝酸钠形成重氮盐。反应摩尔比为1:1；滴定度为27.28.二、盐酸普鲁卡因注射液的分析（一（一）特殊杂质：对氨基苯甲酸，检查方法-同原料药中对氨基苯甲酸检查项下，对照品溶液浓度为2.4ug/ml，限量为不得过标示量的1.2%。（二）含量测定：采用反相离子对色谱法色谱条件：十八烷基硅烷键合硅胶为色谱填充柱；0.1%庚烷磺酸钠的0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（pH3.0）-甲醇（68:32）为流动相；检测波长290nm。盐酸普鲁卡因对照品对照，浓度：0.02mg/ml。第二节、盐酸利多卡因的分析脂烃胺侧链，碱性，芳酰胺结构（空间位阻，不易水解）鉴别：1、与硫酸铜试液反应，生成蓝紫色配合物，转入氯仿显黄色；2、红外光谱法；3、氯化物反应NHCOCH2N(C2H5)2CH3CH3.HCl杂质检查：酸度、澄清度、水分、炽灼残渣和重金属含量测定：《中国药典》（2010年版）采用HPLC法测定盐酸利多卡因含量。色谱条件：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；磷酸盐缓冲液[1mol/LNaH2PO4(1.3ml)和0.5mol/LNa2HPO4(32.5ml)用水稀释至1L]——乙腈（50:50），磷酸调pH至8.0为流动相；检测波长254nm。以利多卡因为对照品，外标法，峰面积计算，结果需乘以1.156，即盐酸利多卡因与利多卡因的分子量比值。第三节、对乙酰氨基酚及其制剂的分析苯环、酚羟基、乙酰氨基杂质检查：对氨基酚及有关物质检查：HPLC，以对氨基酚和对乙酰氨基酚为对照品，对氨基酚不得过0.005%，其他杂质均不得大于对照溶液中对乙酰氨基酚峰面积（0.1%），杂质总量不得过0.5%。色谱条件：辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；磷酸盐缓冲液(8.95gNa2HPO4和3.9gNaH2PO4用水溶解至1L，加10%四丁基氢氧化铵溶液12ml)—甲醇（90:10)为流动相；检测波长245nm。鉴别：1、三氯化铁反应：酚羟基2、酸性水解后芳伯氨－－重氮化-偶合反应；3、红外光谱法OHNHCOCH3含量测定：紫外分光光度法，257nm波长下测定计算含量（%）=（A×250×103)/(E1%1cm）×5×W×（1-G）×100%G：干燥失重有关物质：HPLC，以对氯乙酰苯胺对照品，限量不得过0.005%。色谱条件：辛烷基硅烷键合硅胶为填充剂；磷酸盐缓冲液—甲醇（60:40）为流动相；检测波长245nm。二、对乙酰氨基酚制剂的分析（一（一）对氨基酚的检查：检查方法-反相高效液相色谱法片剂、咀嚼片、泡腾片、胶囊、颗粒及滴剂均需检查此项目色谱条件：RP-HPLC，以ODS为固定相，缓冲液或水-甲醇为流动相。限度为标示量的0.1%。咀嚼片和颗粒测定的色谱条件：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；0.05mol/L醋酸铵—甲醇（85:15）为流动相；检测波长257nm。9种制剂：片剂、咀嚼片、泡腾片、注射液、栓剂、胶囊、颗粒、滴剂及凝胶。（二）溶出度测定：片剂、颗粒与胶囊需检查此项目；紫外分光光度法，257nm测定；稀盐酸作溶出介质，限度80％（三）含量测定：普通片、咀嚼片、栓剂、胶囊及颗粒剂等采用紫外法测定；泡腾片、注射液、滴剂、凝胶剂采用HPLC法，以茶碱作内标，按内标法以峰面积定量滴剂含量测定的色谱条件：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；0.05mol/L醋酸铵—甲醇（85:15）为流动相；检测波长257nm。检查：原料有关物质的检查：主要控制偶氮苯、苯醌等，采用反相离子对色谱法，主成分自身对照，限度0.1%，总量不得过0.5%对氨基酚的检查：反相离子对色谱法，对氨基酚为对照，限度0.005%。制剂对氨基酚的检查：片剂、咀嚼片、泡腾片、胶囊、颗粒及滴剂6种制剂需作该项检查，HPLC法，限度0.1％。溶出度的测定：片剂、颗粒与胶囊需检查，方法UV吸收系数法，溶出度80％。对氯苯乙酰胺的检查：反相离子对色谱法，对氯苯乙酰胺为对照，限度0.005%。第四节、肾上腺素及其制剂的分析杂质检查：酸性溶液的澄清度与颜色特殊杂质：酮体，紫外法，310nm测定吸收度有关物质：反相离子对色谱法，单个杂质限量0.2%；各杂质和的限量不得过0.5%含量测定：烃胺侧链碱性，非水溶液滴定法溶剂：冰醋酸；滴定剂：高氯酸；指示剂：结晶紫OHOHHOHNH苯环、邻位酚羟基、烃胺侧链鉴别：1、三氯化铁反应翠绿色；氨试液紫色2、过氧化氢的氧化反应，被双氧水氧化显血红色二、肾上腺素注射液的分析（一（一）鉴别：三氯化铁反应（三）含量测定：反相离子对高效液相色谱法，流动相0.14%庚烷磺酸钠溶液-甲醇，65:35，磷酸调pH至3.0±0.1（离子对试剂庚烷磺酸钠），固定相C18；外标法定量含量测定原料药：非水滴定注射剂：反相离子对HPLC法（二）检查：pH值药物与三氯化铁试液反应与现象药物试验方法现象阿司匹林加热水解后，与三氯化铁试液反应紫堇色配位化合物丙磺舒加NaOH溶液，在pH5.0～6.0时加三氯化铁试液米黄色沉淀对乙酰氨基酚直接与三氯化铁试液反应显蓝紫色肾上腺素加盐酸溶解，与三氯化铁试液反应显翠绿色，加氨试液显紫色胺类药物的分析药物鉴别检查含量测定盐酸普鲁卡因重氮化－偶合反应水解反应氯化物反应红外光谱法原料和注射液对氨基苯甲酸（HPLC法)亚硝酸钠滴定法（原料药、注射剂，滴定剂亚硝酸钠，永停法指示终点）盐酸利多卡因与硫酸铜反应氯化物的反应、红外酸度、溶液的澄清度、水分、炽灼残渣、重金属HPLC(C18柱，磷酸盐缓冲液-乙腈流动相，利多卡因为对照，UV，1.156)对乙酰氨基酚三氯化铁反应水解后重氮化－偶合反应IR有关物质、对氨基酚（HPLC法）、对氯本乙酰胺（HPLC法）、溶出度（片剂、胶囊、颗粒UV法）UV法HPLC法（泡腾片、注射液、滴剂和凝胶）肾上腺素三氯化铁反应过氧化氢反应溶液的澄清度与颜色、酮体（UV法）、有关物质（RP-HPLC）非水滴定注射剂反相离子对HPLC法（庚烷磺酸钠）历年考题对乙酰氨基酚的含量测定方法为：若样品称样量为m(g),溶解于250mL，取5mL置100mL容量瓶中，测得的吸收度为A，E1%1cm=715，则含量百分率的计算式为：AA/715250/51/m100%BA/715100/52501/m100%CA715250/51/m100%DA715100/52501/m100%EA/7151/m100%A历年考题A对氨基苯甲酸B对氨基酚C对苯二酚D酮体E游离水杨酸下列药物中应检查的杂质为药典规定阿司匹林药典规定盐酸普鲁卡因药典规定对乙酰氨基酚药典规定肾上腺素EABD历年考题盐酸普鲁卡因注射液中应检查的杂质是A对氨基酚B苯甲酸C二乙氨基乙醇D对氨基苯甲酸乙酯E对氨基苯甲酸E能直接或水解后与三氯化铁试液反应呈色进行鉴别的药物是A对氨基水杨酸钠B苯巴比妥钠C对乙酰氨基酚D阿司匹林E青霉素钠ACD以下药物的含量测定方法：A非水滴定法B双相滴定法C溴量法D亚硝酸钠滴定法E沉淀滴定法肾上腺素盐酸普鲁卡因历年考题ADA薄层色谱法B高效液相色谱法C目视比色法D紫外分光光度法E气相色谱法肾上腺素中检查酮体阿司匹林中检查水杨酸对乙酰氨基酚中检查有关物质DBB历年考题用反相HPLC法测定盐酸肾上腺素注射液的含量，所采用的流动相系统为A甲醇-水B乙腈-水C庚烷磺酸钠溶液-甲醇D磷酸二氢钾溶液-甲醇E冰醋酸-甲醇-水CA.对乙酰氨基酚B.盐酸普鲁卡因C.盐酸利多卡因D.诺氟沙星E.盐酸氯丙嗪以下方法鉴别的药物是取供试品约0.1g，加稀盐酸5ml，在水浴上加热40分钟，取0.5ml加亚硝酸钠试液5滴和碱性-萘酚试液2ml，摇匀，即显红色取供试品约50mg，加稀盐酸1ml使溶解，加亚硝酸钠试液数滴和碱性-萘酚数滴，生成橙色或猩红色沉淀取供试品0.2g，加水20ml使溶解，分取10ml，加三硝基苯酚试液10ml，即生成沉淀，滤过，沉淀用水洗涤，在105℃干燥后，测定熔点为228℃232℃历年考题BAC