甘草甜素是甘草酸及其盐类通称

甘草甜素是甘草酸及其盐类通称，属五环三萜皂甙，含量为6%～14%［1］，具有解毒、抗炎、抗变态反应及改善脂肪代谢作用，临床用于治疗胃溃疡和慢性肝炎，获明显疗效。动物实验证明，对化学物所致肝癌，具有保护肝的作用［2］。1986年以来还发现甘草具有防治艾滋病的效果，更引起人们的重视。甘草提取物还有用作烟草及食品添加剂，作甜味或矫味剂，还可作润肤化妆品［3］。但它的生产工艺中提取溶剂丙酮价格昂贵，毒性较大，回流提取易结块，冷却时间长，有待改进。为此，笔者对提取工艺的改进进行了探讨，报告如下。1实验材料与方法1.1仪器与药品751G型紫外分光光度计；甘草酸粗品，甘草酸三钾盐(由九芝堂制药厂提供)；冰醋酸、硫酸、丙酮均为化学纯，95%乙醇，氢氧化钾为分析纯，汽油为工业用。1.2提取方法1.2.1原生产工艺甘草洗净，打成粗粉，用水加热提取，过滤得提取液，浓缩调至酸性，得沉淀用水洗后，干燥得甘草酸粗品，用丙酮回流得提取液，调至碱性，沉淀，将沉淀干燥得甘草酸三钾盐，烘干再用冰醋酸热熔冷却后，析晶得甘草酸单钾盐。1.2.2新生产工艺的筛选(1)温度对甘草酸单钾盐收率的影响：取甘草酸三钾盐50g，共6份，分别加入50℃、60℃、70℃、80℃、90℃、100℃的冰醋酸，恒温，结果显示甘草酸三钾盐用60℃冰醋酸热溶，单钾盐收率最高，见表1。表1不同温度对单钾盐收率影响组别三钾盐重(g)加热温度(℃)单钾盐重(g)收率(%)析晶情况150.05021.843.6较快，底部有棕黑色物质250.06028.456.8快，白而纯350.07024.248.5快，无棕色物450.08016.633.2慢，有棕色胶状物550.09010.220.4慢，有较多棕色胶状物650.01005.811.6慢，有较多棕色胶状物(2)溶剂对提取方法影响：取甘草酸粗品50g，共14份(其中1～7号为加热回流提取，8～14号为冷浸法提取)，分别加入不同的溶媒提取3次(溶媒用量为3、2、2倍量，提取时间为2、1、1h)，合并滤液，用20%氢氧化钾溶液调至pH7.5～8，放置沉淀，过滤得沉淀物，干燥后用4倍量60℃冰醋酸热溶，恒温放置24h，析晶。抽滤，用95%乙醇洗至无酸味，60℃干燥得单钾盐，结果用95%乙醇∶汽油(10∶4)冷浸提取收率最高，见表2。2产品质量考察2.1含量测定取甘草酸单钾盐80.0mg，用95%乙醇溶解至100.0ml，精密量取2ml稀释至50.0ml，摇匀，在248nm处测吸收度，按E1%1cm＝132计算，结果两组工艺生产的甘草酸单钾盐含量原工艺组为(98.00±1.95)%，新工艺组为(98.71±1.69)%，经t检验，无显著性差异，且均符合湖南省药品标准规定。表2乙醇、丙酮、汽油3种不同溶剂对单钾盐收率的影响比较组别甘草酸粗品(g)提取溶剂(95%乙醇∶汽油)单钾盐重(g)收率(%)1※50.011.422.82△50.012.424.8350.010∶113.727.4450.010∶214.228.4550.010∶314.829.6650.010∶415.731.4750.010∶514.428.88※50.010.821.69△50.011.823.61050.010∶113.226.41150.010∶213.827.61250.010∶314.629.21350.010∶416.232.41450.010∶513.927.8注：※单用丙酮溶剂，△单用95%乙醇溶剂。2.2检查取甘草酸单钾盐进行炽灼残渣、重金属盐含量检查［4］，结果新工艺生产的甘草酸单钾盐炽灼残渣含量、重金属盐含量均符合湖南药品标准，见表3。表3两种工艺检查结果对比表组别取样量(g)炽热残渣重(g)含量(%)重金属盐含量(ppm)原工艺1.07620.09658.96＜201.09630.09568.74＜20新工艺1.08340.08738.06＜201.08550.09528.77＜203新工艺3.1新工艺流程根据实验结果，在原工艺基础上拟定出改良工艺流程为：甘草粗粉→预浸2h，用(15、10、10、8)倍量水，以(2、2、1、1)h煮提4次→提取液→浓缩至相对密度1.1(40℃测定)→浓缩液→加50%硫酸(25℃)至pH3，放置24h→棕黑色沉淀→用水洗3次，至pH4.5，抽滤，60℃干燥，研细→甘草酸粗品→用95%乙醇：汽油(10∶4)冷浸3次，经常搅拌(溶媒同量为3倍、2倍、2倍，提取时间为2h、2h、1h)→提取液→加20%氢氧化钾溶液调pH至7.5～8，放置2h，抽滤，80℃～90℃干燥→甘草酸三钾盐→粉碎后用4倍量冰醋酸(加热至60℃)进行热溶，保温，放置，析晶24h，抽滤→甘草酸单钾盐→用少量95%乙酸洗涤2次，抽滤，60℃左右干燥→甘草酸单钾盐精品。3.2新工艺、原工艺提取对比实验取甘草酸粗品50.0g，共10份，其中按原工艺提取5份，按新工艺提取5份，结果原工艺提取单甲盐为(22.56±0.83)g，新工艺为(32.76±1.01)g，新工艺比原工艺提取甘草酸单钾盐收率提高10.2%。用t检验，有非常显著性差异(P＜0.01)。4讨论原工艺采用丙酮加热回流提取方法，提取过程中提取液需要冷却，提取时间较长，并且提取中间产物甘草酸三钾盐发黄结块，成品回收率较低，新工艺改用95%乙醇：汽油(10∶4)冷却提取，缩短了提取时间，所得中间产物甘草酸三钾盐色白而疏松，无结块现象，方便下步单钾盐提取操作，提高成品回收率。新工艺并且能节省能源，减少成本，降低溶剂的毒性，故具有比原工艺更大的实用性，值得推广应用。