生技08B卷参考答案

1河南农业大学2009—2010学年第二学期《微生物学》考试试卷（B卷）参考答案及评分标准一、名词解释（每小题2分，共16分）1.微生物：是指肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。包括细菌、放线菌、霉菌、酵母菌和病毒等大类群。2.假根：是根霉属真菌在与基质相接触处分化形成的起固着和吸收营养作用的根状菌丝。3.鉴别培养基：培养基中加有能与某一菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂，从而用肉眼就能使该菌落与外形相似的它种菌落相区分的培养基，就称鉴别培养。4.生长因子：凡是微生物本身不能自行合成，但生命活动又不可缺少的特殊营养物称生长因子。5.致死时间：在一定温度下杀死微生物所需要的最短时间。6.原生质体：是指在人为条件下，用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制新生细胞壁合成后，所得到的仅有一层细胞膜包裹着的圆球状渗透敏感细胞，一般由革兰氏阳性细菌形成。7.ELISA：是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的用来测定抗原或抗体的固相免疫测定技术。8.表面抗原：指包围在细菌细胞壁外层的抗原，主要是荚膜或微荚膜抗原。二、填空题（每空1分，共24分）1.营养菌丝、气生菌丝、孢子丝2．底物水平磷酸化电子传递水平磷酸化氧化磷酸化3．17.2min3.3224．无隔菌丝有隔菌丝5．高、低6．螺旋、廿面体、复合7．接合孢子、孢囊孢子8．脱色9．好氧微生物、兼性厌氧微生物、微好氧微生物、耐氧微生物、厌氧微生物三、选择题（每小题1分，共10分）1．D2．D3．D4．D5．D6．A7．A8．A9．A10．A四、简答题（每小题6分，共30分）1．为什么说土壤是微生物生长发育的良好环境？答：土壤是微生物生活的最良好环境，土壤有微生物生活的大本营之称号，主要是由于以下几个方面的原因：(1.5分)岩石中含有铁、钾、镁等多种矿质元素，一般都能满足微生物生长的需要。(1.5分)耕地土壤中各种动植物有机残体和有机肥料是绝大多数微生物良好的营养和能量来源。(1.5分)有大小不同的孔隙，小孔隙的毛细管作用强，经常充满水分，大孔隙中常为土壤空气。(1.5分)此外，土壤的pH值多在4～8.5之间，而且土壤的保温性和缓冲性都比较好。2．什么叫芽孢？细菌的芽孢有何实践重要性？1.细菌的芽孢有何实践重要性？答：(3分)某些细菌在其生活史的一定阶段于营养细胞内形成的一个圆形或椭圆形或圆柱形结构。芽孢具有较强的抗热、抗辐射、抗静水压和抗化学药物的能力。对于微生物来讲可以使微生物渡过不良的环境条件。2(3分)（1）灭菌指标；（2）菌种鉴定；（3）菌种保藏3．叙述革兰氏染色的原理及步骤。答：(3分)简要方法步骤：涂片→干燥→冷却→结晶初染→碘液媒染→酒精脱色→番红复染→干燥→镜检(3分)原理：与两类细菌的细胞壁成分结构有密切关系。革兰氏阴性菌的细胞壁中含较多的类脂质，当用酒精脱色时，类脂质被溶解，从而增加了细胞壁的通透性，使初染后的结晶紫碘的复合物易于渗出，结果细胞被脱色，经复染后则呈现复染剂的颜色。而革兰氏阳性菌细胞壁中肽聚糖含量多且交联度大，类脂质含量少，经酒精脱色后，肽聚糖层的孔径变小，通透性降低，因而细胞仍保留初染时的颜色。4．营养丰富的食品容易由于微生物的污染而腐烂变质，试根据微生物学知识分析哪些方法可被用于延长食品的保存期？答：答任意三条即可（每条2分）（1）温度条件：放入冰箱等低温进行保藏以延长保质期；（2）氧气条件：可以采取真空包装隔绝防止好氧微生物生长引起食品变质；（3）采取杀菌措施处理后进行密封保藏；（4）采取盐或糖等高渗透压来保存食品。5．指出下列物品灭菌或消毒的方法及条件：接种针、培养皿、明胶培养基、皮肤、无菌室、果汁?答：每种物品1分接种针：酒精灯火焰（直接灼烧）；培养皿：烘箱（170度2个小时）；明胶培养基：高压蒸汽灭菌（121℃30分钟）；皮肤：75%酒精（擦拭消毒）；无菌间：高锰酸钾和甲醛处理后保持10分钟以上或紫外灯照射15分钟以上；果汁：巴氏消毒（62-63度30分钟）五、问答题（每小题10分，共20分）。1．什么叫纯培养？详述分离获得纯培养的主要方法。答：(4分)纯培养(Pureculture)：微生物学中将在实验室条件下从一个细胞或一种细胞群繁殖得到的后代称为纯培养。(2分)1)稀释平皿分离法：在适宜的培养基和培养条件下，一个活细胞或孢子只产生一个菌落，这样通过将样品进行稀释，将较高稀释度的菌悬溶液进行倒平析或涂平板，每个细胞可在平板上长成一个菌落，分离平板上的菌落即可获得纯培养。(2分)2)平皿划线分离法：将样品制成较高浓度的菌悬溶液，利用接种环在平板上进行划线，经过培养即可在平板上获得单菌落，从而获得纯培养。(2分)3)单细胞挑取法：利用单细胞挑取器在显微镜下将单个细胞挑出，接到相应培养基上进行培养后获得单菌落，从而得到纯培养。2．什么叫细菌的生长曲线？分成几个时期？每个时期有何特点？答：(2分)（一）定义：把少量纯种单细胞微生物接种到恒容积的液体培养基中后，在适宜的温度、通气等条件下，它们的群体就会有规律地生长起来。如果以细胞数目的对数值为纵坐标，以培养时间为横坐标，就可以划出一条有规律的曲线，这就是微生物的典型生长曲线。（二）生长曲线的四个阶段：(8分，每一时期2分)延迟期、对数期、稳定期、衰亡期延迟期特点：1）生长速率常数为零；细菌数量不增加或增加很少。2）细胞形态变大或增长，许多杆菌可长成丝状。3）合成代谢十分活跃，核糖体、酶类和ATP的合成加速，易产生各种诱导酶。4）对外界不良条件如NaCl溶液、温度和抗生素等理、理化因素反应敏感。对数期：1）生长速率常数R最大代时最短，生长速度最快；32）细胞稳定（平衡）生长：细胞内各种物质按比例生长，菌体成分均匀；3）酶系活跃，代谢旺盛。稳定期1）生长常数为零，新生=死亡，达到动态平衡；活菌数的总量达到最大值；2）胞内的储藏物开始形成（如肝糖粒、脂肪粒等）；3）某些芽孢菌的芽孢开始形成；4）某些细菌过量积累次级代谢产物，如抗生素、维生素等。衰亡期1）细菌代谢活性降低；2）细菌衰老并出现自溶；3）产生或释放出一些产物；如氨基酸、转化酶、外肽酶或抗生素等。4）菌体细胞呈现多种形态，有时产生畸形，细胞大小悬殊；有些革兰氏染色反应阳性菌此时会变成阴性反应