神经生长因子及其受体在缺血缺氧性脑损伤中的作用机制

目录一、中文摘要········································I二、英文摘要········································II三、引言·········································1四、正文材料与方法········································3结果············································5讨论········································10结论········································20参考文献········································21五、综述正文·········································24参考文献··········································29六、后记········································33中文摘要目的：通过对大鼠缺血缺氧性脑损伤模型注射不等含量的神经生长因子，并和正常大鼠模型的不同部位神经生长因子浓度和受体含量进行对比，得出神经生长因子和其受体在缺血缺氧性脑损伤中的作用机制，为临床指导治疗缺血缺氧性脑损伤提供依据。方法：1.大鼠模型资料：选取南方医科大学动物中心的16-18周大鼠若干只，雌雄不限，模型均随机筛选，统计结果无统计学差异。2.方法：将这些随机抽取的大鼠模型一共50只，按照是否手术和手术注射神经生长因子的情况的不同分为5组，A组的大鼠模型正常喂养，B组的大鼠模型做左颈动脉结扎手术，并且在持续喂养时每日注射生理盐水；C组的大鼠模型做左颈动脉结扎手术，并且在持续喂养时每日注射鼠神经生长因子30ug；D组的大鼠模型做左颈动脉结扎手术，并且在持续喂养时每日注射鼠神经生长因子60ug；E组的大鼠模型做左颈动脉结扎手术，并且在持续喂养时每日注射鼠神经生长因子90ug，比较这五组大鼠模型在术后1天、术后一周、术后两周、术后四周这几个时间段头部、腹部和尾部不同部位神经生长因子浓度和TrkB受体含量的变化情况。3.数据分析：各组大鼠模型的基本资料情况经正态性检查，服从正态分布，且各组间无统计学差异。使用SAS6.12统计学软件按照2*2析因设计进行统计学分析，分别通过对大鼠模型术后的统计指标结果做出评估。数值型变量以均数±标准差表示。结果：五组大鼠模型在术后相同时间内同组不同部位的神经生长因子浓度和TrkB受体含量的统计学差异具有统计学意义（P＜0.05）；在术后相同时间内不同组别同部位的神经生长因子浓度和TrkB受体含量的统计学差异具有统计学意义（P＜0.05）；在术后不同时间内同组别同部位的神经生长因子浓度和TrkB受体含量的统计学差异具有统计学意义（P＜0.05）。关键词：神经生长因子；TrkB受体；缺血缺氧性脑损伤；作用机制AbstractsObjective:Basedontheratswithhypoxiaischemiabraindamagemodelofinjectionunequalcontentofnervegrowthfactorandnerveindifferentpartsofthemodelofnormalratgrowthfactorconcentrationandreceptorcontentcomparison,drawsthemechanismofnervegrowthfactoranditsreceptorinhypoxicischemicbraindamageintheclinicalguidanceforprovidethebasisforthetreatmentofischemiaandhypoxiainjurycerebral.Methods:1.Datafromratsmodel:selectionofanimalcenterofSouthernMedicalUniversity16-18weeksseveralbigrats,maleorfemale,themodelswererandomlyselected,nostatisticaldifferenceinresults.2.Methods:theratmodeloftherandomsampleof50intotal,accordingtothedifferentoperationandoperationwhetherinjectionofnervegrowthfactorconditionsinto5groups,normalfedratsinmodelgroupA,modelgroupBtheratleftcarotidarteryligationoperation,andinthecontinuousfeedingdailyinjectionsofphysiologicalsaline;theratmodelofCgrouptodotheleftcarotidarteryligationoperation,andinthedailyinjectionofmousenervegrowthfactor30ugcontinuousfeeding;ratmodelofDgrouptodotheleftcarotidarteryligationoperation,andinthedailyinjectionofmousenervegrowthfactor60ugcontinuousfeeding;ratmodelofEgrouptodotheleftcarotidarteryligationoperation,andinthedailyinjectionofmousenervegrowthfactor90ugcontinuousfeeding,thecomparisonofthefiveratsinthemodelgroupat1daysafteroperation,oneweekafteroperation,twoweeksafteroperation,postoperativearoundthisseveraltimeperiods,abdomenandtailheadindifferentpartsofnervegrowthfactorconcentrationandTrkBreceptorcontentchanges.3.Dataanalysis:basicdatainmodelratswithnormalinspection,obeythenormaldistribution,andeachgrouphadnostatisticaldifference.Accordingtothe2*2factorialdesignstatisticalanalysiswasperformedusingSAS6.12statisticalsoftware,accordingtothestatisticalindexofratmodelofpostoperativeresultsevaluated.Numericvariablestomean+standarddeviationsaid.Results:StatisticallysignificantstatisticaldifferencebetweenthefivegroupsofratsinthemodelafterthesametimeindifferentpartsofthesamegroupofnervegrowthfactorconcentrationandTrkBreceptorcontent(P0.05);statisticallysignificantstatisticaldifferencesbetweendifferentgroupsofnervegrowthfactorconcentrationandTrkBreceptorcontentatthesametimeinpostoperative(P0.05);statisticallysignificantstatisticaldifferencewiththegrouppartsofthesameconcentrationofnervegrowthfactorreceptorandTrkBreceptorcontentatdifferenttimeafteroperation(P0.05).Keywords:Nervegrowthfactor;TrkBreceptor;hypoxiaischemiabraindamage;mechanismofaction1引言神经生长因子（NGF）是神经营养因子中最早被发现，目前研究最为透彻的，具有神经元营养和促突起生长双重生物学功能的一种神经细胞生长调节因子，它对中枢及周围神经元的发育、分化、生长、再生和功能特性的表达均具有重要的调控作用。在将小鼠肉瘤180移植于3日龄鸡胚体壁时，与移植片连接的脊髓感觉神经节及交感神经节增大20%—40%，基于比克尔的这一发现，科恩等从小鼠肉瘤180和37中成功地分离出具有同一活性的核蛋白质，以后从蛇毒中分离出具有千倍活性和从小鼠颚下腺分离出具有万倍活性的蛋白质，这种蛋白质被称为神经生长因子。科恩等认为，其有效成分是分子量约为2.2万的蛋白质，由两个亚单位构成的二合体或多合体显有活性。另一方面，瓦恩认为，活性成分是分子量约为14万的蛋白质，具有分子量约为3万的α、β、γ三种亚单位，仅β表现有NGF活性。将精制的NGF注射于鸡胚或初生小鼠，则发育中的感觉和交感神经节细胞的有丝分裂频率增高，细胞数增加，神经节体积显著增大。将兔的NGF抗血清注射于怀孕小鼠或初生小鼠等哺乳类，则生出来的幼体及实验个体的交感神经细胞出现选择性的坏死（免疫去交感）。对于培养中的神经节，其促进纤维生长和再生效果也是显著的，例如对7日龄的鸡胚分离的感觉神经节的培养，若向培养液中加NGF（0.01毫克/毫升），则在24小时内在神经节周围即可见到神经纤维呈旺盛的放射状伸长（晕圈效应），这种现象可被用于鉴定NGF的效果。NGF含于马、猪的颚下腺和小鼠肉瘤、小鼠胚胎及成体的交感神经细胞、小鼠尿和唾液、鸡胚的多种器官和一切哺乳类的血清中。神经生长因子（NGF）是神经营养因子中最早被发现，目前研究最为透彻的，具有神经元营养和促突起生长双重生物学功能的一种神经细胞生长调节因子，它对中枢及周围神经元的发育、分化、生长、再生和功能特性的表达均具有重要的调控作用。NGF包含α、β、γ三个亚单位，活性区是β亚单位，由两个118个氨基酸组成的单链通过非共价键结合而成的二聚体，与人体NGF的结构具有高度的同源性，生物效应也无明显的种间特异性。低亲和力受体：快NGF受体，跨膜糖蛋白，分细胞外部分、跨膜连接区、胞浆部分，具有G蛋白偶联的信号转导功能。神经生长因子分为高亲和力受体和低亲和力受体，高亲和力受体：慢NGF受体，跨膜糖蛋白，具有酪氨酸蛋白激酶活性。低亲和力受体：快NGF受体，跨膜糖蛋白，分细胞外部分、跨膜连接区、胞浆部分，具有G蛋白偶联的信号转导功能。在胚胎发育的一定时期内，NGF为效应神经元生存所必须。体外实验证实，如果培养液中不加NGF，神经细胞即不能长出轴突，也不能存活。NGF及其受体也广泛分布于中枢神经系统，由海马和脑皮质产生的NGF可通过胆碱能神经逆行运输至前脑基底核，维持胆碱能神经元的存活和功能。在胚胎发育早期，中枢NGF的含量决定胆碱能神经的密度。在无胆碱能神经支配的小脑区和下丘脑，NGF含量也较高，表明除胆碱能神经外，NGF对其他类神经元也有营养作用。如上所述，在切断轴突后给予NGF将减少某些神经元的变性与死亡，无疑这将有助于提高