稀有血型志愿者资料库的临床应用

2009年～2011年太原地区稀有血型志愿者资料库的临床应用左江涛1，2聂继盛1张德梅2冯国强2张欣2武云香2王菲2（1.030001山西医科大学公共卫生学院，2.030024太原市红十字血液中心）摘要：目的通过检测太原地区2009年～2011年临床送检受血者标本的抗体种类，应用稀有血型志愿者资料库的信息，及时、有效地为受血者提供适合的血液产品。方法为临床受血者筛查不规则抗体，筛查阳性者用盐水法、抗球蛋白法和聚凝胺法鉴定抗体的种类，以便于在资料库中选择适合的稀有血型志愿者，为受血者提供血液产品。结果依据抗体对应抗原的概率，在志愿者资料库中选择适合的志愿者捐献血液或在红细胞产品库中筛选适合的红细胞供应临床。结论建立红细胞稀有血型志愿者资料库，提供太原地区红细胞血型分布的理论依据，为临床受血者及时输注安全、有效的红细胞产品提供保障。关键词：稀有血型志愿者资料库Abstract:objectivethroughthedetectionintaiyuanin2009~2011clinicalinspectionreceptorantibodyspecimentypes,theapplicationofrarebloodtypevolunteersdatabaseinformation,timelyandeffectivelyfortheblooddonorstoprovidesuitablebloodproducts.Methodsforclinicalreceptorscreeningirregularantibody,byscreeningwithbrinemethod,antiglobulinmethodandfuzzysetaminemethodappraisalantibodytype,inordertoselectthedatabaseofrarebloodtype,volunteersfortheblooddonorstoprovidebloodproducts.Resultsaccordingtothecorrespondingantigenantibodyofprobability,thevolunteersdatabasetochoosesuitablevolunteersdonatedbloodorinredbloodcellproductslibraryscreeningforredsupplyclinical.Conclusiontoestablishcellrarebloodtypevolunteersdatabase,providingintaiyuanredbloodtypedistributionofthetheoreticalbasisforclinicalreceptortimelyinfusionsafeandeffectivecellproductsprovidesecurity.Keywords:rarebloodtypevolunteersdatabase随着输血医学的发展，输血疗法被广泛应用于临床，但随之也带来了一系列由于红细胞抗原抗体反应引起的免疫学问题。红细胞ABO以外的不规则抗体是引起输血反应、新生儿溶血和输血无效的主要原因[1]，特别是对有妊娠史、输血史和短期内大量输血的患者[2]更为重要。有意义的抗体多为IgG类，主要是输血或妊娠等免疫刺激产生[3，4]。对于具有ABO以外抗体患者的输血，常不能及时提供适合的血液产品，故需储备志愿者，检测志愿者除ABO以外、对临床有意义的红细胞血型抗原，建立红细胞稀有血型志愿者资料库。为建立该资料库，笔者于2008年4月～8月从血液中心无偿献血者共19164名中经过征询，筛选了511名血型为O型的志愿者加入稀有血型志愿者资料库。入库时，共检测了511名志愿者红细胞血型系统中的8个系统共19个抗原，初步建立了稀有血型志愿者资料库[5]。现将2009年～2011年应用情况报告如下。1资料统计1.1材料与试剂1.1.1受血者情况统计2009年1月～2011年12月，太原市辖区各临床医疗机构送检、申请使用红细胞的受血者标本共计1523例，受血者年龄为1月～90岁，其中男性797名，女性726名。1.1.2试剂筛选细胞为Immucor公司产品，谱细胞和抗球蛋白试剂均为上海血液生物有限公司产品，聚凝胺为Baso公司产品。所有试剂均在有效期内使用。1.1.3仪器离心机为日本久保田血型血清学专用离心机。每年均做定期校验，保证仪器运行正常。1.2方法[6]所有临床医疗机构送检、申请使用红细胞的受血者标本均做抗体筛选，抗体筛选阳性标本再用谱细胞做抗体鉴定。所用方法如下：1.2.1抗体筛选1.2.1.1盐水法在3支试管中均加入受血者血清100μl，再分别加入筛选红细胞50μl，混匀，离心，观察溶血和凝集反应，记录结果。红细胞有溶血或凝集都视为阳性结果。除室温条件外，须将试管置4℃30分钟、37℃3分钟，以确认是否有不规则抗体。1.2.1.2抗球蛋白法在3支试管中均加入受血者血清100μl，再分别加入筛选红细胞50μl，混匀，37℃温育30～60分钟，离心，观察溶血和凝集反应（如有溶血或凝集，均视为阳性结果），用盐水洗涤3次，最后一次洗涤后，弃掉全部盐水，将试管边缘盐水用滤纸吸干，按试剂说明书加最适稀释度抗球蛋白血清，离心，观察凝集反应，记录结果。如结果为阴性，应加IgG致敏的红细胞1滴，离心并观察结果，如果未见凝集，表示实验无效，必须重做。1.2.1.3聚凝胺法（按照试剂说明书进行操作）在3支试管中均加入受血者血清100μl，再分别加入筛选红细胞50μl，混匀，加入低离子液0.6ml混匀，加入凝聚按2滴混匀，离心，弃去上清液，悬浮红细胞，观察凝集反应（有凝集进行下一步操作，无凝集实验重做），加入悬浮液2滴，轻摇，观察溶血和凝集反应，1分钟内记录结果。红细胞有溶血或凝集均视为阳性结果。1.2.2抗体鉴定在10支试管中均加入受血者血清100μl，再分别加入筛选红细胞50μl，混匀，依据标本抗体筛选结果，分别选择盐水法、抗球蛋白法、聚凝胺法继续实验，操作步骤如上，记录结果。参照谱细胞格局表分析抗体的性质及种类。1.2.3抗原验证根据抗体种类，用标准血清检测受血者标本所对应抗原。如对应抗原为阴性，则上述抗体种类的分析正确，可以确定该受血者不规则抗体的种类；如对应抗原为阳性，则重新分析。1.3抗体种类及血型分布统计1523例标本中抗体筛选及抗体鉴定结果如下：共检出不规则抗体689例，其中抗-E55例，O型21例，A型10例，B型16例，AB型8例；抗-D3例，O型1例，B型1例，AB型1例；抗-M21例，O型7例，A型5例，B型8例，AB型1例；抗-cE33例，O型13例，A型12例，B型4例，AB型4例；抗-c2例，A型1例，B型1例；抗-Ce5例，O型1例，A型2例，B型1例，AB型1例；抗-e7例，O型1例，A型2例，B型4例；抗-（Ce+Jka）1例，AB型；亚型4例，A亚型2例，AB亚型2例，均检出抗-A1抗体；冷抗体47例，自身抗体511例，均未作ABO血型统计；其余834例标本均未见异常。表1抗体种类及血型统计抗体血型合计OABAB抗-E211016855抗-D1113抗-M758121抗-cE13124433抗-c112抗-Ce12115抗-e1247抗-（Ce+Jka）11ABO亚型224冷抗体47自身抗体511未检出抗体834合计15232应用统计2.1抗体ABO分型统计临床医疗机构送检标本中，经过抗体筛选和抗体鉴定，有特异性的不规则抗体共131例，其中A型受血者42例，B型受血者34例，O型受血者35例，AB型受血者16例；亚型4例，A亚型2例，AB亚型2例。2.2应用情况统计2.2.1抗-（Ce+Jka）受血者为AB型，在资料库中仅找到5例Ce抗原、Jka抗原均阴性志愿者资料；与临床医生沟通、征得医生同意后，积极与志愿者联系，排除了不适合献血的情况，有2名志愿者捐献了血液，及时供应临床。经临床反馈，受血者血红蛋白值提高15.8g/L。2.2.2抗-e7例受血者分别为：O型1例，A型2例，B型4例。资料库中e抗原阴性的比例是7.46%[5]，经过与临床医生的沟通，从资料库中选择e抗原阴性的志愿者，排除不适合献血的情况后，共有10名志愿者捐献了血液供应临床。经临床反馈，七位受血者血红蛋白值均有明显提高。2.2.3抗-Ce5例受血者分别为：O型1例，A型2例，B型1例，AB型1例。Ce抗原阴性的比例在资料库中是7.06%，O型受血者直接从资料库中寻找志愿者捐献血液；其他血型的受血者与临床医生沟通后选择志愿者捐献血液及时供应。经临床反馈，五位受血者血红蛋白值增加，临床症状明显改善。2.2.4抗-D3例受血者分别为：O型1例，B型1例，AB型1例AB型。经联系曾在血液中心献血的各型Rh(D)阴性献血者，为受血者捐献血液，及时为受血者进行手术。2.2.5资料库中c抗原阴性的比例为41.5%，cE抗原阴性的比例为40.3%，E抗原、M抗原阴性的比例分别为50.8%和29.1%，比例均较高，选择红细胞产品时均使用相应标准血清筛选ABO同型红细胞成品中抗原阴性者发往临床。2.2.6亚型4例患者，经与临床医生沟通，均使用O型洗涤红细胞供应。经反馈，受血者临床症状明显改善，血红蛋白值增加，为进一步治疗提供了保障。3讨论输血前血型血清学试验包括三个内容（ABO和RhD血型检定、不规则抗体抗体筛查和交叉配血）。如果三项试验结果准确，是不应该发生溶血性输血反应的。但是如果非实验技术原因，而是人为差错事故，就会导致溶血性输血反应[7]。不规则抗体在汉族患者及孕妇中检出率为0.38%～2.38%[8]，它是引起输血不良反应、新生儿溶血病（HDN）、血型鉴定困难以及疑难配血、不明原因贫血、Hb不升或下降的主要原因[9,10]。为及时解决临床用血申请，最有效的方法是建立红细胞稀有血型志愿者资料库。资料库中的信息有利于帮助了解太原地区各种抗原的频率分布，特别是抗原阴性频率低的几种抗原，在实际工作中可以尽可能利用资料库中的信息，减少交叉配血操作过程中可能出现的人为差错，最大限度保证临床受血者获得安全、及时和有效的红细胞产品。如上述有抗-（Ce+Jka）的受血者，在资料库中仅找到5位与受血者相应抗原阴性的志愿者信息，经过与临床医生的沟通，与志愿者的积极联系，为受血者及时提供了红细胞产品，为临床治疗提供了血液保障。目前的志愿者资料库，虽然运转良好，但是随着时间推移，会有志愿者超龄而自动退出；会有志愿者由于献血间隔时间不够而无法在需要的时刻捐献血液；也会有志愿者由于工作、学习等原因而流失。故，需要定期补充志愿者入资料库，扩充库容，以达到及时有效供应临床的目的。最理想的状态是检测所有献血者的红细胞抗原分型，建立电子档案，在受血者提出用血申请时，在资料库中查找适合的志愿者为其提供红细胞产品。这样，可以省去交叉配血的步骤，减少人为差错的发生，最大可能保障受血者用血的安全、有效和及时。参考文献1张秋会，陈蕤，穆士杰，等.应用全自动血型/配血系统检测不规则抗体效果的分析.临床输血与检验，2011，13（4）：3442AndersenAS,PreaetoriusHL,etal.Prognosticvalueofscreeningforirregularantibodieslateinpregnancyinrhesuspositivewomen.ActaObstetGynecolScandJT.ActaObstetriciaetGynecologicaScandinavica,2002,81(5):407-4113柯秋高，彭秀春，杨毓明，等.2638名患者红细胞血型不规则抗体调查.中国输血杂志，2009，22（6）：4634徐基平，练正秋，李翠莹.不规则抗体筛查与临床安全输血.中国输血杂志，2012，25（9）：876-8775冯国强，张德梅，左江涛等.多种红细胞血型库的建立及意义.现代检验医