杭太俊-药物分析15章甾体激素类药物的分析

药物分析第十五章:甾体激素类药物的分析CompanyLogo年间，从腺体中获得雌酮(1932)、雌二醇(1932)、睾酮(1935年)及皮质酮(1939)等的纯品结晶。3.随后，发明用薯蓣皂甙(Diosgenin)为原料进行半合成生产甾体药物，使生产规模扩大，成本降低4.发现肾上腺皮质激素治疗风湿性关节炎及其在免疫调节上的重要价值，使甾体药物成为医院中不可缺少的药物5.甾体口服避孕药的研究成功，使人类生育控制达到了新水平CompanyLogo第一节基本结构与性质一、肾上腺皮质激素OHOOHOCH2OHHHH311172021氢化可的松(hydrocortisone)OHOOHOHFHOCH3OHCH3醋酸地塞米松(dexamethasoneacetate)16α-甲基21-酯化17α-羟基9α-氟3-酮1,2-双键11β-羟基20-酮CompanyLogo)CH3OCompanyLogo酮基,为共轭体系,在波长240nm附近有紫外吸收,部分药物在C1-C2之间有双键,也有紫外吸收CompanyLogo位上为α-醇酮基,具有还原性.多数药物有C17-α-羟基,部分药物α-醇羟基与酸成酯.CompanyLogo位由卤素取代,呈相应的卤化物反应CompanyLogo二、雄性激素及蛋白同化激素第一节基本结构与性质CH3HHCH3HOHCH3O甲睾酮(methyltestosterone)OOHHHHOCH3丙酸睾酮(testosteronepropionate)OOHHHHO苯丙酸诺龙(nandrolonephenylpropionate)17β-羟基CompanyLogo甲睾酮(methyltestosterone)A环Δ4-3-酮基C17位上为羟基,部分药物的羟基被酯化雄性激素上的母核为19个碳原子,蛋白同化激素在C10位上一般无角甲基,母核只有18个碳原子CompanyLogo第一节基本结构与性质三、孕激素COHHHCH3O黄体酮(progesterone)CH3OCH3OCH3OHHHO醋酸甲地孕酮(megestrolacetate)OHCH3HHOHCH3N米非司酮(mifepristone)CompanyLogo第一节基本结构与性质四、孕激素OHCH3HOHHH炔诺酮(norethisterone)H3C左炔诺孕酮CompanyLogo第一节基本结构与性质三、孕激素COHHHCH3O黄体酮(progesterone)A环Δ4-3-酮基C17位上有甲酮基或乙炔基.多数在C17位上羟基部分药物的羟基被酯化CompanyLogo第一节基本结构与性质四、雌性激素HOHHHOHCH3H雌二醇EstradiolHOHHCH3H炔雌醇EthyinylestradiolCOHCHCompanyLogo第一节基本结构与性质四、雌性激素HOHHHOHCH3H雌二醇Estradiol有些药物在C17位上有乙炔基,构成19-去甲孕甾烷母核A环为苯环,C3位上有酚羟基,有的药物C3位上的酚羟基成酯C17位上有羟基有些药物C17位羟基成酯.CompanyLogo种类主要活性基团△4-3-酮C17-α-醇酮基△4-3-酮C17-β-羟基△4-3-酮C17-甲酮基C17-乙炔基A环为3-OH苯环UV、与重氮苯磺酸盐反应C17-乙炔基C17-羟基与硝酸银反应可成酯可成酯UV、与羰基试剂反应与亚硝基铁氰化钠反应与硝酸银反应UV、与羰基试剂反应性质还原性UV、与羰基试剂反应肾上腺皮质激素雄性激素及蛋白同化激素孕激素雌激素第一节基本结构与性质总结如下CompanyLogo物理常数的测定化学鉴别法制备衍生物测定熔点UVIRTLCHPLC理化性质与鉴别试验CompanyLogo一、物理常数的测定1.熔点HO+COClKOHCOO+KCl+H2O炔雌醇m.p.201℃OCCH3O+2HONH2NCHOCH3NOH+2H2O黄体酮双肟m.p.238℃CompanyLogo~185℃分解OCOCH2CH2OC6H5+NH2CNHNH2OHClNCH2NOH+H2O+HAcOCOCH2CH2N+H2OOHO+CH3CH2COOHOCOCH2CH3OKOH丙酸睾丸素m.p.150~156℃第二节IdentificationCompanyLogo二、化学鉴别法2.比旋度3.吸收系数与强酸的呈色反应官能团的反应1.与强酸的呈色反应甾体激素类药物硫酸、磷酸、高氯酸、盐酸呈色CompanyLogo官能团的反应①C17-α-醇酮基——还原性A.呈色反应C17-α-醇酮基四氮唑盐OH-呈色B.沉淀反应C17-α-醇酮基氨制硝酸银银镜反应C17-α-醇酮基碱性酒石酸铜Cu2O↓CompanyLogo②C3–酮基和C20–酮基甾酮类2,4-二硝基苯肼呈色异烟肼、硫酸苯肼OOHNCONHNH2HClCONHNOHN异烟腙（黄色）睾酮CONHNCCH3NHNOCNN异烟双腙（黄色）OCCH3O2NCONHNH2HCl黄体酮CompanyLogo③甲酮基或活泼亚甲基第二节Identification亚硝基铁氰化钠间二硝基酚/芳香醛呈色COCH3O]NOCNFe[OHH2O2+-4Fe5CNNOCHCOO蓝紫色黄体酮④卤素⑤酚羟基雌激素类重氮苯磺酸红色偶氮染料CompanyLogo⑥乙炔基第二节IdentificationRCCHAgNO3RCCAg↓OHCCHHO炔雌醇3AgNOOHCCAgHO白⑦酯基CompanyLogo黄体酮三、UV四、IR第二节Identification酚羟基醇羟基炔键羰基苯环骨架振动CompanyLogo五、TLC制剂分析对照品法炔诺酮六、HPLCCompanyLogo一、TLC地塞米松磷酸钠中杂质检查CompanyLogo供试品3.0mg/mlCHCl3-MeOH(9:1)溶剂硅胶GF254二氯甲烷-乙醚-甲醇-水385:60:15:2展开后晾干105℃干燥10min碱性四氮唑蓝显色CompanyLogo对照溶液——0.02mg/ml供试液——1mg/ml二、HPLC第三节PurityTest黄体酮中有关物质检查供试品溶液的杂质峰数不得超过1个，其面积不得大于对照液的主峰面积的3/4CompanyLogo三、硒的检查来源合成中用二氧化硒(SeO2)脱氢46SeSe盐酸羟胺氧瓶燃烧有机药物苯并苯硒二唑二氨基萘5,43,24Se..pHnmA环己烷四、溶剂残留甲醇和丙酮(GC)0.3%0.5%CompanyLogo五、游离磷酸盐检查OnHMoOPHPOHPOMoOH24103433424还原钼蓝钼酸铵磷钼酸740nm，UVCompanyLogoHPLCUV比色法非水溶液滴定法四氮唑比色法异烟肼比色法柯柏反应比色法CompanyLogo一、HPLC对照液供试液己烯雌酚黄体酮CompanyLogo二、UV化合物结构λmax(nm)肾上腺皮质激素雄性激素孕激素雌激素280△4-3-酮240醋酸地塞米松CompanyLogo三、比色法肾上腺皮质激素类有色甲瓒四氮唑盐醇酮基17COH-[还原]CC6H5NNNNC6H5C6H5+Cl2e(H)CC6H5NNNNC6H5C6H5H2,3,5-TriphenyltatrazoliumchlorideTTC(RedtatrazolineRT)甲潜(Formazan)深红色λmax480~490nmCompanyLogo