海水胁迫对马齿苋抗氧化及其光合生理特性的影响初稿马青云

分类号：学校代码：11460学号：10220906南京晓庄学院本科生毕业论文海水胁迫对马齿苋抗氧化及其光合生理特性的影响SeawaterStressonAntioxidantpurslaneandPhotosyntheticPhysiologicalCharacteristics所在系(院）：教师教育学院学生：马青云指导教师：张边江研究起止日期：二○一三年九月至二○一四年五月二○一三年五月学位论文独创性声明本人郑重声明：1.坚持以“求实、创新”的科学精神从事研究工作。2.本论文是我个人在导师指导下进行的研究工作和取得的研究成果。3.本论文中除引文外，所有实验、数据和有关材料均是真实的。4.本论文中除引文和致谢的内容外，不包含其他人或其它机构已经发表或撰写过的研究成果。5.其他同志对本研究所做的贡献均已在论文中作了声明并表示了谢意。作者签名：日期：海水胁迫对马齿苋抗氧化及其光合生理特性的影响作者：马青云指导老师：张边江摘要：本实验以马齿苋为对象，通过模拟不同程度的海水胁迫试验，测定马齿苋在不同海水浓度下的净光合速率、蒸腾速率、气孔导度、细胞间co2浓度以及荧光数据。旨在探究马齿苋对海水胁迫的光合生理特性以及抗氧化酶活性的变化。本实验为盐碱滩涂植物资源开发与利用提供参考。关键词：马齿苋；海水胁迫；抗氧化酶；光合生理特性目录引言.............................................................................................................................................41材料与方法.............................................................................................................................51.1实验材料............................................................................................................................51.1.1植物材料.........................................................................................................................51.1.2实验器材及工具.............................................................................................................51.1.3实验试剂.........................................................................................................................51.2处理方法............................................................................................................................51.2.1植物材料的处理.............................................................................................................51.3生理生化指标的测定........................................................................................................51.3.1抗氧化酶的测定.............................................................................................................51.3.2可溶性蛋白含量的测定.................................................................................................61.3.3游离脯氨酸含量的测定.................................................................................................61.3.4可溶性糖含量的测定.....................................................................................................61.4光合速率（Pn）、蒸腾速率（Tr）、气孔导度（Gs）及胞间CO2浓度（Ci）测定...................61.5数据分析............................................................................................................................72结果与分析...........................................................................................................................72.1马齿苋的抗氧化酶活性.......................................................................................................72.2马齿苋的可溶性蛋白含量...................................................................................................92.3马齿苋的游离脯氨酸含量...................................................................................................92.4马齿苋的可溶性糖含量.....................................................................................................102.5光合速率(Pn)、蒸腾速率（Tr）气孔导度(Gs)及胞间CO2浓度(Ci)的分析................102.5.1光合速率（Pn）的分析..............................................................................................102.5.2蒸腾速率（Tr）的分析...............................................................................................112.5.3气孔导度（Gs）的分析..............................................................................................112.5.4胞间CO2浓度（Pn）的分析......................................................................................123讨论............................................................................................................................................参考文献.......................................................................................................................................马齿苋为马齿苋科一年生草本植物。肥厚多汁，无毛，高10～30cm，生于田野路边及庭园废墟等向阳处。国内各地均有分布。该种为药食两用植物。全草供药用，有清热利湿、解毒消肿、消炎、止渴、利尿作用；种子明目。现代研究，马齿苋还含有丰富的SL3脂肪酸及维生素A样物质。SL3脂肪酸是形成细胞膜，尤其是脑细胞膜与眼细胞膜所必需的物质；维生素A样物质能维持上皮组织如皮肤、角膜及结合膜的正常机能，参与视紫质的合成，增强视网膜感光性能，也参与体内许多氧化过程。此外，马齿苋还可作兽药和农药；嫩茎叶可作蔬菜等。盐胁迫是影响植物生长发育和农作物产量和产值的主要环境胁迫因子之一，土壤盐渍化和作物盐害是世界性的问题[1]。盐碱地在地球上广泛分布，面积约占陆地的25%。我国的盐碱地面积约有5亿余亩即约2700万hm2，主要分布于长江以北的辽阔内陆地区，以及辽东半岛、渤海湾和苏北滨海狭长的地带，其中已开垦的约1亿亩；但因灌溉不当还造成了相当一部分的次生盐渍化土壤，约占耕地总面积的10%[2]。土壤盐渍化严重影响着农业生产。要解决这一问题,除了土壤改良技术措施外,选育抗盐的植物品种是一项具有长远经济效益的任务。因此深入研究植物的耐盐性,对减轻该地区土壤盐渍化对作物栽培的影响,扩大种植范围,提高生产力,具有积极意义[3]。植物在逆境条件下，细胞代谢受阻而产生大量的超氧物阴离子自由基、羟基自由基、过氧化氢、脂质过氧化物和单线态氧，即通常所说的活性氧[4]，这些活性氧会对细胞质膜进行过氧化，导致膜系统损伤和细胞伤害。在受到活性氧伤害后，植物会主动或被动地调动抗氧化酶类及其它抗氧化物质来清除这些活性氧和自由基，来减缓和抵御活性氧对细胞伤害。1材料与方法1.1实验材料1.1.1植物材料马齿苋的叶片1.1.2实验器材及工具分光光度计、离心机、分析天平、托盘天平、研钵、恒温水浴锅。1.1.3实验试剂考马斯亮蓝G-250、50mmol·L-1pH7.18磷酸缓冲液、95%乙醇、85%(m·v-1)磷酸、3%磺基水杨酸溶液、冰乙酸、2.5%酸性茚三酮溶液、甲苯、蒽酮乙酸乙酯、浓硫酸。浓度分别为0、5%、10%、20%、30%、50%、100%的海水溶液。1.2处理方法1.2.1植物材料的处理供试验马齿苋为江苏野生品种收集。种子用0.1%的HgCl2消毒10min并充分冲洗，然后用蒸馏水浸泡24h后播种于盛有蛭石的周转箱中，每天浇水保持蛭石湿润，自然光照。待种子萌发后选取2对叶完全展开的幼苗移栽到装有石英砂下部有孔的塑料盆钵中。用50%Hoagland营养液浇灌，正常养护至4对叶完全展开后，选取长势一致的幼苗开始用不同浓度的海水处理，每盆定苗5株。重复7次，为期一周。1.3生理生化指标的测定1.3.1抗氧化酶的测定SOD、POD、CAT活性和MDA含量测定，剪取处理后叶片，立即投入液氮中贮存。0.15g叶片加少许PVP冰浴研磨，提取缓冲液为50mmol·L-1pH7.18磷