注射剂的制备

实验四注射剂的制备一、实验目的1．掌握注射剂生产的工艺过程和操作要点。2．熟悉注射剂成品质量检查标准和方法，3.了解影响成品质量的因素。二、实验原理注射剂系指用药物制成的供注人体内的无菌溶液、乳状液和混悬液，以及供临用前配制成溶液或混悬液的无菌粉末。注射剂的特点是起效迅速；剂量准确，特别是常作急救危重病人用的静脉滴注的输液，由于注射剂直接注人体内，吸收快，所以对生产过程和质量控制，都要求极其严格。往射剂的质量要求包括无菌、无热原、澄明度合格、使用安全、应无毒性和刺激性；注射液的ph值应接近体液，一般控制在4－9范围内；凡大量静脉注射或滴注的输液，应调节渗透压与血浆渗透压相等或接近；稳定性合格，即在储存期内稳定有效；含量合格；在水溶液中不稳定的药物，常制成注射用无茵粉末，以保证往射剂在储存期内稳定、安全、有效。生产灭菌制剂的厂房设施必须根据《药品生产质量管理规范》（GMP）的原则设置，厂房必须按生产工艺和产品质量的要求划分沽净级别。一般可分为一般生产区、控制区、洁净区。一般生产区指无洁净度要求的生产或辅助房间。控制区是指对空气洁净度有一定要求的生产或猜助房间。洁净区是指有较高洁净度和菌落数要求的生产房间。房间设计的布局要合理，人流物流要严格分开。洁净级别要求高的厂房对相邻的洁净级别低的厂房一般呈相对正压。生产车间及各岗位操作区，均应按生产和洁净级别的要求进行清污、消毒。洁净厂房内空气的尘粒数和活微生物数应符合规定．温度和相对湿度应与其生产及工艺要求相适应。注射剂的灭菌方法，应根据灭菌的药物及其制剂的稳定性进行选择。热压灭菌法是制备注射剂和滴眼剂最常使用的方法。热压灭菌器系受压容器，使用时要谨慎．应遵守正规的操作规程，以免发生事故。手提式热压灭菌器的便用方法见“七、附注”。三、实验仪器与试剂安瓿瓶、垂熔玻璃漏斗、微孔滤膜及其装置、二氧化碳钢瓶、灌注器、熔封灯、澄明度检查袋置、蒸锅、天平、灭菌锅、干燥箱、减压滤过装置、容量瓶、玻璃棒、烧杯等，热压灭菌器、量筒、量杯等。维生素C,碳酸氢钠、焦亚硫酸钠、依地酸二钠、盐酸、注射用水、葡萄糟、检漏用色素溶液、稀洗液、l%－2%硝酿钠硫酸洗液等。四、实验内容与操作1.处方维生素C2.6g（即按104％投料）碳酸氢钠约1.2g焦亚硫酸钠0.1g依地酸二钠0.0025g注射用水50ml2操作（1）灭菌制剂室的地面、台面先用水擦拭，然后用2％煤酚皂擦拭，uv照射1h。（略）（2）安全瓶的处理（略）目前国内大多使用易折安瓿，生产安瓿时已经将安瓿进行了切割和圆口．可直接进行洗涤。手工洗涤应先用水冲刷外壁，然后灌满蒸馏水或去离子水．加热100℃，30min。趁热甩水，再用过滤蒸馏水洗两次，澄明度合格的注射用水洗一次，倒置插盘中，120--140℃烘干备用。（可根据空安瓶清洁度而选择是否采用热处理或酸处埋）。（3）注射液的配制1）容器处理：配制用的一切容器，均需清洗保证洁净，避免引人杂质及热原。2)滤器等处理；（略）垂熔玻璃漏斗：先用水反冲，除去药液留下的杂质，沥干后用洗液（1％－2％硝酸钠硫酸洗液）浸泡处理，用水冲净，最后用注射用水过滤至滤出水检查ph值不显酸性，并检查澄明度合格为止。徽孔滤膜。常用的是由醋酸、硝酸纤维素混合酯组成的微孔滤膜。经检查合格的微孔滤膜（孔径有0.65um、0.8um）浸泡于注射用水中1h，煮沸5min，如此反复三次，或用80℃注射用水浸泡4h以上，室温则需浸泡12h，便滤膜中纤维充分膨胀，增加滤膜韧性。使用时用镊子取出滤膜且使毛面向上，平放在膜滤器的支撑网上，注意滤膜不被皱褶或刺破，装好后应完整无缝隙，无泄露现象，用注射用水过滤，滤出水澄明度合格，即可将滤器盖好备用。乳胶管：先用水揉洗，再用0.5%－1％氢氧化钠液适量，煮沸30min，洗去碱水；0.5％－1％盐酸适量，煮沸30min，蒸馏水洗至中性，再用注射用水煮沸即可。3）惰性气体的处理：（略）因本品极易氧化，故配制时需通惰性气体，常用的是二氧化碳或氮。使用纯度较低的二氧化碳，可用分别装有浓硫酸，1％硫酸铜，1％高锰酸钾溶液的洗气瓶处理之，以分别除去水分、硫化物、有机物和微生物．最后经注射用水洗气瓶除去可溶性杂质和二氧化硫。现在生产常用的高纯氮（含N299.99％），可不经处理，或仅分别通过50％甘油、注射用水洗气瓶即可使用。二氧化碳在水中溶解度及密度都大于氮，故凡与二氧化碳不发生作用的产品通入二氧化碳比通人氮好，但注意二氧化碳会使药液的pH值下降。4）配液：按处方取配制量80％的注射用水，通入二氧化碳（约20－30min）使其饱和，称取并加入依地酸二钠溶解，加维生素C使溶，分次缓缓加入碳酸氢钠，并不断搅拌至无气泡产生，待完全溶解后．加焦亚硫酸钠溶解，调节药液pH值至5.8-6.2，最后加用二氧化碳饱和的注射用水至足量。用C3垂熔玻璃漏斗预滤，再用0.65nm的微孔滤膜精滤,检查滤液澄明度合格后．即可灌封。（4）灌封1）灌注器的处理：首先要检查灌注器玻璃活塞是否严密不漏水，用稀洗液浸泡再抽洗灌装器（用水冲洗、蒸馏水冲洗）至不显酸性，最后用注射用水抽洗至流出水澄明度检查合格，即可灌装药液备用。2）装量调节。在灌装前先调节灌装器装量，按药典规定适当增加装量，以保证注射液用量不少于标示装量；见“七、附注”。3）熔封灯火焰调节：熔封时要求火焰细而有力，燃烧完全。单焰灯在黄蓝火焰两层火焰交界处温度最高：双焰灯的两火焰应有一定夹角，火焰交点处温度最高4）灌封操作：将过滤合格的药液，立即灌装于2ml安瓿中。通人二氧化碳于安瓿上部空间，随灌随封。灌装要求装量准确，药液不沾安瓿颈壁，以免熔封时焦头，一般措施是使药液瓶略低于灌注器位置，灌注针头先用硅油处理，快拉慢压可以防止焦头。熔封时可将颈部放于火焰温度最高处，掌握好安瓿在火焰中停留时间，及时熔封。熔封后的安瓿顶部应圆滑、无尖头或鼓泡等现象。5）灭菌与检漏灌封好的安瓿，应及时灭菌，可用100℃沸水煮30min。灭菌完毕后立即将安瓿放入0.1％亚甲蓝的溶液中，挑出药液被染色的安瓿。将合格安瓿外表用水洗净、擦干、供质量检查用。3．质量检查与评定(1）装量：按照2000年版药典二部附录7页检查方祛进行．2ml安瓿检查5支，每支装量均下得少于其标示装量（见“七、附往’）。（2）澄明度；按药典关于注射剂澄明度检查规定迸行（见“七、附注’）。（3）ph值测定：应为5.0—7.0。（4）含量测定：按2000年版药典二部793页测定，应为标示量的90.0％－110.0%。测定方祛：精密量取本品适量（约相当于维生素C0.2g），加水15ml与丙酮2ml，摇匀．放置5min，加稀醋酸4ml与淀粉指示液lml，用碘滴定液（0.1mol／ml）滴定，至溶液显蓝色并持续30秒不退。每1ml碘滴定液（0.1mol／ml）相当于8.806mg的C6H8O6。5）热原：取本品依法检查（2000年版药典二部附录85页），剂量按家兔体重每1kg注射2ml，应符合规定。6）颜色：取本品，加水稀释成每1ml中合维生素C50mg的溶液，照分光光度法在420nm的波长处测定，吸收度不得大于0.06。（7）无菌；按无菌检查法项下检查。应符合规定4.成品印字和包装每支安瓿上印字应包括品名、规格、批号，字迹清晰，不易磨灭回5．注意事项（1）配液时，注意将碳酸氢钠撒入维生索C溶液中的速度应慢，以防产生的气泡使溶液溢出，同时要不断揽拌．以免局部过碱。（2）维生素C容易氧化变质致使含量下降，颜色变黄，尤其当金属离子存在时变化更快。故在处方中加人抗氧剂并通二氧化碳，一切容器、工具、管道不得露铁、铜等金屑。（3）掌握好灭菌温度和时间，灭菌完毕立即检漏冷却，避免安瓿因受热时间延长而影响药液的稳定性，同时注意避光。五、实验结果和讨论1．记录检漏结果2.记录澄明度检查结果．可见表1表1澄明度检查结果检查成品数成品数成品率总数／支玻屑纤维白点焦头其他总数／支／支／%2将质量检查各项结果进行分析付论。六、思考题1．影响注射剂澄明度的因素有哪些？2.维生素C注射液可能产生的质量问题是什么？应如何控制工艺过程？3．溶液的ph值、灭菌温度和灭菌时间对维生素C注射液的制剂质量有何影响？4.如何保证葡萄糖输液热原与色泽合格？5.不溶性微粒对人体有何危害性？6.请找出你制备的注射剂中出现废品的原因。七、附注（一）手提式热压灭菌器的结构与使用方法手提式热压灭菌器的基本结构如图实4--1所示，锅盖上装有压力表、放气活门和安全活门。放气活门下接一放气软管，用以放出较蒸气重的冷空气。当锅内压力高至此种灭菌器不能耐受的压力时，（即高于1.4kg／cm2）时，锅内蒸气会推动安全活门弹簧，使活门开放，放出蒸气，以免发生事故。在锅盖上与压力表相对位置上有一小接头，上有两个小孔内装特制合金，当压力超过1.4kg／cm2时，合金即被熔融，从而放出蒸气可防爆炸。锅内有一铝桶（即内桶），供放置灭菌物品，桶内壁上装一方管，供插人放气软管用，灭菌完毕后可连同铝桶一起取出。使用方法：（l）将待灭菌制品包扎后放人铝桶的筛板上。（2）在锅内加人适量的蒸馏水。（3）将铝桶放进灭菌锅内，此时锅内的水不应进人桶内，将盖上的放气软管插入铝桶内壁的方管内。对准盖与锅的螺栓，顺序将翼形螺母均匀旋紧，使盖与锅密合。（4）将灭菌锅置热源上加热，开始时可将放气问手柄放在垂直开放位置上，以便锅内空气随加热而由阀孔逸出．当压力达到所需范围时。应适当调整热源．使维持恒压。或调节安全阀的螺丝帽，令其稍有蒸气放出，使锅内压力保持在所需范围，同时开始计算时间。（5）灭菌时间达到，除去热源，使其自然冷却．待压力恢复至零时。打开放气阀，待气放完后再开启锅盖，取出灭菌物品。（二）注射剂的装量为保证注射用量不少于标示量，灌装标示装量为50ml与50ml以下的注射液时，应按表实4－2适当增加装量。除另有规定外，供多次用量的注射液，每一容器的装量不得超过10次注射量，增加装量应能保证每次注射用量。检查法：注射液的装量为2ml或2ml以下者取供试品5支，2ml以上至10ml者取供试品3支，10ml以上者取供试品2支；开启时为逸兔损失，将内容物分别用相应体积的干燥注射器及注射针头抽尽，然后注人标化的量具内，在室温下检视；测定油溶液或混悬液的装量时，应先装温摇匀，再用干燥注射器及注射针头抽尽后，同前法操作，放冷至室温检视；每支注射液的装量均不得少于其标示量。注射剂的标示装量为50ml以上至500ml的按最低装量检查法（2000年版药典二部附录79页）检查，应符合规定。表实4一2标示装置为50ml及以下者的增加装置标示装置／ml增加量／ml易流动液黏稠液0.51251020500.100.100.150.300.500.601.00.120.150.250.500.700.901.5（三）澄明度的检查1．注射剂（l）检查装置1）光源：采用日光灯，无色溶液注射剂于照度1000-2000k的装置，有色溶液注射剂于照度2000-3000lx的位置。用目检视。2）式样；采用伞棚式装迂，两面用，如图实4--2·3）背景：用不反光的黑色绒布，在背部右侧1／3处和底部为不反光白色（供检查有色物质）。4）距离：光源距检品距离约为20cm，检品至人眼距离为20－25cm。（2）检查人员条件远距离和近距离视力测验，均为0.9或0.9以上（不包括矫正后视力）。应无色盲（3）检查方法及时限1）水（醇）溶液型注射剂将供试品如数抽取，擦净安瓿（瓶）外壁污痕（或保待外壁清洁），集中放置。检查时按表实4－3拿取支数连续操作，于伞棚边缘处，手持安瓿颈部使药液轻轻翻转，用目检视。50ml或50ml以上的注射液按直、横、倒三步法旋转检视。表实4－3不回规格注射剂每次拿取支数和检查时限的规定规格／ml抽检总数／支每次拿取数／支每次检查时限／sec1-22006185200416102003152020032150以上201152）油溶剂型注射液：油溶剂型注射液按水（醇）溶剂型注射液的检查方法检查，其检查时限延长—倍。如有结晶析出，可在80℃以下水浴中加热30min，振摇，放冷至