氨在肝性脑病中的作用

氨在肝性脑病发病机制中的作用（一）目的原理1．观察血氨增高对中枢神经系统的毒性作用有哪些。2．验证肝脏对氨具有解毒作用。3．启发、引导同学思考血氨增高对呼吸系统及酸碱平衡的影响，并探讨三者之间的关系。培养同学应用已学过的知识进行横向联系和综合分析能力。（二）实验材料1．实验动物成年家兔，雌雄均可2．实验仪器BI-420F生物机能实验系统3．实验用药1％普鲁卡因、复方氯化铵溶液、复方谷氨酸钠溶液、生理盐水、1%醋酸。4．器械兔固定台、搪瓷圆盆、空心塑料导管或胶管（导尿管），粗、细棉线，5、10、50m1注射器，止血钳8把、手术刀1把、剪刀1把，眼科小剪刀1把，眼科镊子1把、气管插管1个、小圆针2个、动脉夹2个（三）实验方法1．甲兔肝大部结扎，肠腔内注入复方氯化铵溶液。（1）将家兔称重后仰卧固定。（2）以1％普鲁卡因进行局部浸润麻醉，行颈部正中切口，分离气管，插入气管插管，描记呼吸。（3）以1%普鲁卡因进行局部浸润麻醉，行上腹部正中切口，长约6-8cm。左手按压肝膈面，剪断肝与横膈之间的镰状韧带和肝脏面与胃连接的肝胃韧带（将食指与中指伸至肝脏膈面，分至镰状韧带两侧，下压肝脏，暴露出肝脏下面的镰状韧带，用手指剥离镰状韧带和肝胃韧带，使肝脏呈游离状态，注意不要伤及膈肌和肝脏），再将肝叶上翻，使肝脏的左外叶、左中叶、方形叶和右中叶(注意右中叶上附有胆囊)完全游离。然后以右手食、中指夹持粗棉线沿肝左外叶、左中叶、方形叶和右中叶之根部绕一周，并结扎以阻断血流。如果上述肝叶由红色变为暗褐色，证明肝脏大部分结扎成功。由于供应右外叶及尾状叶之门脉血管为独立分支，不会同时被结扎，因而得以保留。（4）沿胃幽门找到十二指肠，在肠系膜对侧肠壁表面作浆肌层荷包缝合，然后用眼科剪刀作一小切口，将细胶管沿肠管方向插入5cm，注意：指向空肠方向，荷包缝合结扎固定，将导管另一端移到腹腔外，用连续缝合的方法缝合腹腔肌层，用间断缝合的方法缝合切口皮肤，关闭腹腔。观察动物呼吸、角膜反射、瞳孔大小、对疼痛刺激的反应性。（5）每隔5分钟向肠腔内注人2.5％NH4Cl混合液5ml。观察动物呼吸、角膜反射、抽搐及痉挛发生所需的时间等变化，家兔出现全身抽搐时停止注射NH4Cl，计算所用复方氯化铵混合液的总量和每公斤体重的用量。（6）自耳缘静脉推注复方谷氨酸钠溶液同时十二指肠插管内注入1%醋酸(5ml/kg)，（观察中毒症状是否缓解）直至症状缓解（用量约为20～30ml／kg）。并可继续观察病情再度恶化乃至死亡之可能性，计算症状出现后的存活时间以与乙兔相比较。2．乙兔除不结扎肝脏和不进行实验性治疗外，其余方法步骤同甲兔。甲、乙兔结果进行比较甲兔乙兔呼吸（次/分）角膜反射用药致抽搐时间（分）复方氯化铵总用量（ml）/每公斤体重的用量复方谷氨酸钠用量（ml）（四）注意事项1.本实验手术操作及观察指标较多，实验者要明确分工各负其责，以保证前后结果的可靠性。2.由于动物是局部麻醉，所以在手术操作时动作要轻柔，尽量减少家兔挣扎。尤其牵拉肝脏及胃肠时，动作宜轻柔，避免过度刺激。3.剪镰状韧带时，慎防刺破横膈。游离肝脏时动作宜轻巧，以免肝叶破裂出血。结扎线应扎于肝叶根部避免勒破肝叶。在结扎肝叶时松紧要适中，以阻断血液为限。过紧可能造成肝叶撕裂出血，过松达不到阻断血流的目的。4.手术操作时要注意及时止血，以防失血过多。5．十二指肠插管要保证插入肠端，如果反向插入胃端，因胃没有吸收功能而影响实验结果。十二指肠插管要绝对固定好，以免脱出使复方氯化铵溶液漏入腹腔，影响实验结果。（五）液体配置1.复方氯化铵溶液配制氯化铵25g碳酸氢钠15g，以5％葡萄糖溶液稀释至1000m1。2.复方谷氨酸钠溶液配制谷氨酸钠25g、碳酸氢钠15g，以5％葡萄糖溶液稀释至1000ml(六)思考题1．肝脏处理氨的方式，通过哪种酶系统?2．氨对中枢神经系统的毒性作用?3．血氨增高对呼吸中枢的影响?最易引起哪种类型酸碱平衡紊乱?该种类型的酸碱平衡紊乱对机体的影响如何?