嵌合型抗原受体T细胞治疗技术在B细胞肿瘤中的研究进展第56届美国血液学会年会报道

自堕疸：鲎旦疸!Q!!至!旦箜丝鲞箜!塑!!!婴堂!!堡!!!翌垫鱼垃里P!!坐!：堡!翌!卫垫!!!!!!：丝!堕!：兰·国际进展速递·嵌合型抗原受体T细胞治疗技术在B细胞肿瘤中的研究进展：第56届美国血液学会年会报道邓碧萍刘红星童春容【摘要】嵌合型抗原受体T细胞(chimericantigenreceptorTcell，CAR—T)在B细胞肿瘤临床试验中已经显示了良好的前景，但是CAR．T的设计、肿瘤抗原的选择、T细胞的来源、CAR．T的临床应用策略等还有待进一步开发完善。CAR-T免疫细胞治疗技术是2014年第56届美国血液学会(ASH)年会的热点话题之一，其基础研究及临床试验均有突破性进展。【关键词】嵌合型抗原受体T细胞；CDl9；B细胞肿瘤；美国血液学会年会ProgressofchimericantigenreceptorTcellimmunotherapyinBcellhematologicmalignancies：reportsfromthe56thAmericanSocietyofHematologyannualmeetingDengBiping,LiuHongxing,TongChunrong．LuDaopeiHematology&OncologyCenter,HebeiYandaHospital,Longfang065201．ChinaCorrespondingauthor：乃增Chunrong,Email：[e-mail]【Abstract】ChimericantigenreceptorTcell(CAR—DtherapyhasshownpromisingperspectiveinclinicaltrailsofBcellhematologicmalignancies．Meanwhile，thistherapystillneedtobefurtherimprovedinthefollowingaspects：designofCAR-T，cancerantigensselection，Tcellsorigin，andclinicalapplicationstrategy．CAR—Timmunotherapyisoneofhottopicsinthe56thAmericanSocietyofHematology(ASH)annualmeeting．Somebreakthroughshavebeenreportedinbothbasicresearchandclinicaltrails．【Keywords】ChimericantigenreceptorTcell；CDl9；Bcellhematologicmalignancies；AmericanSocietyofHematologyannualmeeting嵌合型抗原受体T细胞(chimericantigen届美国血液学会(ASH)年会在旧金山召开。免疫细胞receptorTcell，CAR．T)是通过基因改造后获得靶抗治疗尤其是CAR．T免疫治疗是本次ASH会议的热点原单克隆抗体单链可变区(scFv)的T细胞。CAR—T通话题之一，来自全球的多个研发中心报告了CAR．T的过抗原抗体结合的原理特异性识别肿瘤细胞表面的最新研究及临床试验结果。抗原，因此无主要组织相容性复合体(MHC)限制性，1CAR．T在B细胞肿瘤中的应用还可以避免因肿瘤细胞MHC下调或丢失导致的免疫经过近26年的研究，CAR．T技术已经发展出三逃逸。而且通过在嵌合基因设计时增加共刺激分子信代[1。。第一代CAR—T在细胞内只有1个T细胞CD3f号，可增强CAR．T细胞的肿瘤杀伤活性。经过20多年受体的信号区；第二代在第一代基础上增加了1个共的发展，CAR．T的设计已经越来越完善，手段也越来越刺激分子信号；第三代则在第一代基础上增加了2个多样化。共刺激分子信号。第一代CAR—T在体内存在时间太短大量基础研究及临床试验证明，CAR．T在血液肿且临床效果不佳，第三代CAR—T已被用于套细胞淋巴瘤领域具有巨大的应用前景，成为近年来免疫细胞治瘤(MCL)及滤泡非霍奇金淋巴瘤(NHL)I临床试验，但疗的最大热点。各大制药公司及生物公司也纷纷加入其并未显示出比第二代更优的临床结果[zI。CAR．T的研发与临床转化大潮。2014年12月，第56目前在血液肿瘤临床应用上较为成功的主要是第二代CAR．T技术，转染的共刺激分子主要是CD28DOI：10．3760／cma．J．issn．1009-9921．2015．02．002或CDl37(4—1BB)[3-。CDl37一CAR—T比CD28．CAR．T具作者单位：065201廊坊，河北燕达医院陆道培血液·肿瘤中心通信作者：童春容，Email：[e-mail]有更强的存活能力及扩增能力，CDl37共刺激信号主万方数据·72‘旦堕疸：鲞旦疸!!!!堡!旦箜丝鲞筮!塑!!!塑坐芷坠!!塑堡鱼!±塑仑!!坐!!尘璺!翌!壁!i：!!!：丝!坠：!要产生中央记忆CAR—T，CD28共刺激信号主要产生自杀基因已有多种，可诱导的Caspase9转基因效应记忆CAR—T[4I。含CDl37结构域的CAR—T能在慢(iCasp9)是目前较理想的自杀基因，它无免疫原性性淋巴细胞白血病(CLL)或急性淋巴细胞白血病且能在24h内引起95jj；以上的转基因细胞快速凋(ALL)患者体内分别存在3年多或2年多[5]，增殖能亡。iCasp9介导的细胞凋亡可由小分子二聚体力甚至达到10万倍[6]。携带CAR编码基因的载体主APl903触发，具有很强的可操作性]。(4)目前报要是反转录病毒或慢病毒。对反转录病毒的长期观道的CAR．T临床前或临床试验都是用成熟T细胞改察发现其在临床使用相当安全[8]，而慢病毒的转染效造成的CAR—T，通常在体内持续时间短，而限制临床效率更高且能传递大片段DNA序列[9]。果并易导致肿瘤复发。几个研究中心开始探索将造血选择合适的肿瘤抗原作为靶标是设计安全有效干细胞基因修饰成CAR—T的可行性[17a引，这种CAR—TCAR一丁的关键。由于CDl9仅表达于各分化阶段的正可持续存在于体内(可达35周)并可分化成多系别常及恶性B细胞而不表达于其他非B细胞(如造血靶标特异性的免疫细胞。在HSCT过程中采用这种干细胞等)表面，因而CDl9．CAR．T被广泛用于B-ALL、CAR．T尤其有利。(5)其他一些新策略的报道，如能产B．CLL、MCL、NHL、多发性骨髓瘤(MH)等恶性B细胞肿生双特异性衔接分子的CAR—T(ENG—CAR—T)，通过持瘤的临床试验[z，，相关研究进展在本次ASH会议均有续产生抗CDl9及抗CD3同时募集B系肿瘤细胞和T报告。尽管如此，仍有5％一10％的患者因丢失CDl9细胞。这样不仅可利用CAR—T直接杀伤肿瘤细胞，雨抗原而逃避CDl9一CAR—T的识别与杀伤。因而还需要且募集的T细胞也有抗肿瘤作用。ENG—CAR．T比直接开发其他肿瘤抗原作为CAR—T的靶标，或联合应用多输注半衰期短的双特异性抗体具有更强、更持久的抗种靶标的CAR—T以避免肿瘤细胞的免疫逃逸。肿瘤作用[协驯。(6)针对单个靶标的CAR．T治疗时肿2第56届ASH会议报告中CAR—T技瘤复发或无效问题，一些中心开发出多靶标的CAR—T，临床前实验显示出更强的抗瘤效应[21】。CDl23可能术的主要进展是难治复发B-ALL的又一个重要肿瘤靶标。在临床前在本届ASH会议中，CAR．T的相关报告主要聚焦实验中，COl23一CAR—T对CDl9-ALL小鼠显示出强大的于血液肿瘤临床应用中的技术优化及临床试验的改抗肿瘤作用[22I。联合CDl9．CAR．T及CDl23．CAR．T治进，主要包括以下进展：(1)多个中心尝试开发通用疗B-ALL可能会有更好的效果。型CAR．T，即采用正常第三方细胞来源的T细胞。通过3CDl9一CAR—T治疗B细胞肿瘤的临敲除内源性TCR基因以排除同种异体TCR导致的移植物抗宿主病(GVHD)，且能进一步提高CAR—T的杀床试验进展肿瘤效率[10-ii]。这种策略显著拓宽了CAR．T的细胞来目前临床试验最成功应用的仍然是CDl9．CAR．T源，避免因患者自体T细胞因数量低、功能不充分、扩治疗B细胞肿瘤。不同的B细胞肿瘤类型、CAR—T设增能力差等限制应用。第三方细胞来源的CAR．T还具计、基因转染方式、扩增培养技术、化疗方案等致使不备易于操作、重复性好等优势，更有利于大批量临床同研究中心报道的临床试验结果不同，目前尚难有统应用。(2)以往的研究报告更多用自体CAR．T联合化一的标准及结论。疗降低肿瘤负荷，以提高缓解率。而本次ASH会议上，美国国立癌症中心利用反转录病毒转染的Kebriaei等1报告了在同种异体造血干细胞移植l9．28zCAR—T治疗了30例不同类型的B细胞肿瘤。在(allo．HSCT)后复发的患者中，通过供者CAR．T清除27例可评估的患者中有22例获得完全缓解(CR)或免疫残留的探索及其应用意义。a11Q—HSCT后回输供部分缓解(PR)，最长的CR持续了37个月。该中心在者的CAR．T可有效防治白血病复发，并避免了自体肿本次ASH会议上报告了他们的最新进展：通过减低化瘤细胞污染[13]。而且供者来源的未转染T细胞还能疗剂量联合CAR．T治疗9例化疗耐药的弥漫大B细清除受者体内丢失了CDl9抗原的肿瘤细胞，可防止胞淋巴瘤，获得1例CR、4例PR、2例预后差的临床结因肿瘤抗原逃逸导致的复发。(3)对于CAR．T临床应果[23]，且9例患者均未产生明显的不良反应。提示低用的安全性，目前的主要策略是改用非病毒载体改造剂量化疗联合CAR—T对进展性B细胞淋巴瘤有可能CAR—T[12]，及通过自杀基因控制CAR．T的过度扩增及成为标准治疗方案。严重不良反应[n15]。本届ASH会议报道的非病毒基因美国斯隆一凯特琳癌症中心用自体19．28zCAR．T转染方式包括睡美人(SB)转座子系统和mRNA转染。治疗了16例难治复发的B-ALL，其中88％的患者获万方数据鱼鱼亟：鲞垦壅垫!!生!旦箜丝鲞笙!塑』型里堂堕堡!!!业!鱼坠z塑吐!翌!!里堂型!翌垫!!!!尘：!兰!塑!：!·73·得CR。大部分患者通过CAR—T治疗后为allo—HSCT创targetedCART—cells[J]．CurrGeneTher，2014，14(1)：3543．造了条件，甚至对移植后复发的Ph+．ALL也有效协Lj。[3]SadelainM，BrentjensR，RiviereI．TheBasicPrinciplesofChimericAntigenReceptorDesign[J]．CancerDiseov，2013，3(4)：388．宾州大学在本次ASH会议上报告了利用慢病毒转染398．的19．CDl37zCAR．T治疗B细胞肿瘤的最新临床结[4jKawalekarOU，ConnorRO，GuedanS，eta1．SignalingDomainof果，共治疗了30例儿童及成年人难治复发的B-ALL，ChimericAntigenReceptorsCanReprograrnTCells[J]．Blood，CR率达到90％，6个月无病生存率和总生存率分别2014，124(36)：551．为67％和78％[6,25一。[5]JuneCH，MansMV，PlesaG，eta1．EngineeredTcellsforcancertherapy[J]．CancerImmunol[mmunother，2014，63(9)：969．975，根据各中心的临床试验，目前可得出下列几点经[6JGruppSA，MaudeSL，ShawP，eta1．Tcellsengineeredwitha验[26]：(1)患者在CAR．T治疗前应用化疗降低肿瘤chimericantigenreceptor(CAR)targetingCDl9(CTL019)have