探究决明子对糖尿病模型小鼠血糖量的影响

1顺序号中山医学院《实验生理科学》探索性实验课题申请书项目名称：探究决明子对糖尿病模型小鼠血糖量的影响申请者：戚华津所在年级：2008级指导教师：陆立鹤申请者电话：[phone]电子邮件：[e-mail]申请日期：2010-11-19中山大学中山医学院2一、简表课题名称探究决明子对糖尿病模型小鼠血糖量的影响申报学科实验生理科学申请金额300元研究时间2010年11月～12月指导教师姓名陆立鹤单位及联系方式（电话和EMAIL）[e-mail]职称讲师项目组情况主要成员（申请者写在第一行）姓名性别学号班级项目中的分工手机Email戚华津男083980184班实验操作，结果分析[e-mail]刘慧婷女083980914班设计实验，实验操作[e-mail]刘宇航男083980284班设计实验，实验操作[e-mail]王荀女083980824班实验操作，结果分析[e-mail]林莉莉女083980844班实验操作，结果分析[e-mail]路宽男083980574班实验操作，结果分析[e-mail]肖少杰男083980374班设计实验，实验操作[e-mail]张玲女083980924班设计实验，实验操作[e-mail]研究内容和意义摘要目的：探讨决明子水煎剂对四氢嘧啶致糖尿病小鼠的降血糖作用。方法：将40只小鼠随即抽取30只，并随机分为高血糖空白对照组、高血糖治疗组A、高血糖治疗组B，每组10只；并选10只作为空白对照组。按200mg/kg分别向高血糖模型组小鼠腹腔注射四氧嘧啶。模型建立后，分别给高血糖治疗组A、B两组按200mg/kg、800mg/kg以决明子水煎液灌胃，灌胃后恢复正常饮食。在实验第7天禁食6h,将治疗组小鼠断尾取血测血糖。最后根据实验数据的特征选择适当的统计学方法，对实验数据进行分析和比较。3主题词糖尿病，决明子，降血糖二、立论依据1、研究意义糖尿病在我国发病率逐年升高，其发病年龄日渐低龄化，且多数患者常合并各种慢性并发症，因而糖尿病及其并发症的防治刻不容缓。本实验旨在通过研究决明子对糖尿病糖、脂代谢的影响，探讨中药防治糖尿病及其并发症的机制，为临床防治糖尿病提供实验及理论依据。2、国内外研究现状大量实验已证实决明子有保肝，明目，降血压，降血脂、抗动脉硬化等药理作用，表明它可作为一安全有效的降脂药物。其降脂的确切机制尚不明确，可能是决明子中蒽醌类化合物具有导泻作用，能减少肠道对胆固醇等的吸收及增加其排泄，通过减少外源性脂质的吸收及增加排泄而降低血脂的。对糖尿病糖代谢和脂代谢的影响未见报道。[1]3、本项目的构思或设计思路从中医角度来看，糖尿病是由于素体阴虚，五脏柔弱，复因饮食不节，过食肥甘，情志失调，劳欲过度，而导致肾阴亏虚，肺胃燥热；病机重点为阴虚燥热，而以阴虚为本，燥热为标；病延日久，阴损及阳，阴阳俱虚；阴虚燥热，耗津灼液使血液粘滞，血行涩滞而成瘀；阴损及阳，阳虚寒凝，亦可导致瘀血内阳。从西医角度来看糖、脂代谢紊乱是糖尿病主要病理生理特点以及各种并发症的基础。降低并稳定血糖浓度是治疗糖尿病的关键所在。决明子为豆科植物决明或小决明的干燥成熟种子，性味甘、苦、咸、微寒，归肝、大肠经，有清肝明目，利水通便之功效。[2-3]药理研究表明，决明子含大黄素、大黄酸、大黄、素蒽酮、大黄素甲醚等化学物质，具有降血脂、降血压、利尿、抗血小板聚集等作用。[4][因此，本小组猜测决明子可通过加速糖、脂代谢而达到降血糖治疗糖尿病的目的。[5]设计思路如下：首先从40只小白鼠中随机选取30只予腹腔注射四氢嘧啶并以25%葡萄糖溶液代替原饮用水来建立高血糖模型。然后，随机分成高血糖对照组、高血糖治疗组（分为A、B两个浓度组），每组410只。另有10只作为空白对照组。两个高血糖治疗组分别用不同浓度的决明子水煎剂（A.200mg/kgB.800mg/kg）连续灌胃，至实验的第7天，测定血糖水平并记录数据；最后分别把实验结果数据与治疗前的血糖水平数据对比，并同时比较不同实验组的实验数据。利用适合的统计学检验方法观察药物决明子是否具有降低血糖的作用，以及不同浓度的决明子水煎液的不同作用。4、本项目的创新之处目前糖尿病的治疗方法中，西医常用的药物有：1口服药物治疗：常用促胰岛素分泌剂、双胍类、格列酮类、AGI等；2胰岛素治疗；3、胰升糖素样多肽1类似物和DPPIV抑制剂。中医常用药物有麦冬门、茯苓、甘草、知母、生地黄、黄芪、五味子、人参、熟地黄、山药、当归等多味药剂，主要是清热药和补益药，外加理气、温里、利水渗湿等类药物。用决明子降血糖未见相关报道，可作为一个新的研究点。决明子主要用于保肝，明目，降血压，降血脂、抗动脉硬化等药理作用，至于它对糖尿病糖代谢作用未见报道，可作为一个新的研究点。5、主要参考文献及出处[1]杨明正,张小如.决明子对糖尿病大鼠肾组织活化的影响.浙江中西医结合杂志,2006,16(3):149-150.[2]王俭.草决明糖浆对48例高脂血症的疗效分析.中国医院药学杂志,1987,7(9):395.[3]华海清.决明子的研究与临床应用.中国中药杂志,1995,20(9):566.[4]何菊香,刘松青.决明子的药理作用及其临床应用.医学实践杂志,2001,19(2):111-113.[5]吴红,孙艳,吴琦,等.决明子对糖尿病大鼠糖代谢、脂代谢的影响.牡丹江医学院学报，2006,27（2）：6-7.[6]陈建国，梅松，付颖，胡欣，王茵四氧嘧啶致小鼠高血糖模型的研究浙江省医学科学院学报2005,61:53-555三、研究方案研究目标：探究中药-决明子是否具有降低四氧嘧啶致糖尿病小鼠的血糖的功效。研究内容：通过建立高血糖小鼠模型以及应用相关统计学方法来探究中药-决明子是否具有降低四氧嘧啶致糖尿病小鼠的血糖的功效。拟解决的关键问题：①标准高血糖模型小鼠的筛选②如何适当地配置不同浓度的决明子水煎液③在灌胃过程中避免造成小鼠因机械性损伤而死亡④根据实验数据的特点来选用适合的统计学方法6２.拟采取的研究方法：通过给小鼠腹腔注射四氧嘧啶以及让小鼠饮用葡萄糖溶液来建立高血糖模型；通过灌胃的方法让小鼠进食决明子水煎液；利用微型血糖仪来测定各组小鼠的血糖浓度；采用相关的统计学方法来分析实验数据技术路线：测量空白组小鼠的血糖→建立高血糖小鼠模型→测量高血糖模型小鼠的血糖→给实验组小鼠灌决明子水煎液→测量治疗组小鼠的血糖→分析并比较实验数据实验方案：①将40只小鼠随即抽取30只，并随机分为高血糖空白对照组、高血糖治疗组A、高血糖治疗组B，每组10只；并选10只作为空白对照组。②将空白组小鼠禁食6h后，断尾取血测量血糖③取四氧嘧啶300mg,加20ml蒸馏水溶解，配成10mg/ml的溶液，按200mg/kg分别向高血糖模型组小鼠腹腔注射四氧嘧啶。④取50g葡萄糖配成25%的葡萄糖溶液代替原饮用水供小鼠饮用。在72h后将所用小鼠禁食4h后，将模型组小鼠断尾取血测血糖，以水平高于11.0mol/L为高血糖模型标准进行筛选。⑤分别给高血糖治疗组A、B两组按200mg/kg、800mg/kg以决明子水煎液灌胃，灌胃后恢复正常饮食。⑥在实验第7天禁食6h,将治疗组小鼠断尾取血测血糖。⑦根据实验数据的特征选择适当的统计学方法，对实验数据进行分析和比较。实验的可行性：首先，选用四氧嘧啶来建立高血糖小鼠模型的方法比较简单可行；且实验材料，如实验小鼠和血糖仪都是实验室里常备的，因而可由实验室提供；而选用决明子作为治疗药物，其价格比较实惠，较易支付；最后，由于我们组员均以学过相关的统计学方法，操作起来会比较容易7四、所需实验动物计划表班别：预防4班带教教师：陆立鹤填表日期：2010年11月14日探索性实验分组情况实验动物需求情况领用动物时间动物领取签收组别课题名称学生姓名联系电话品种/品系雌/雄体重数量（只）月日学生签名探究决明子对糖尿病模型小鼠血糖量的影响戚华津15920564073小鼠雄25g100填表人签名：带教教师签名：注：每个参加探索性实验的小班单独填写，带教教师签字后提交请于2010年11月26日前提交给教学中心王玲老师Tel:87330212or33372587;Email:[e-mail]8五、实验所需药品或药盒、仪器、器械或用具等预算表（一）.药品或药盒序号药品名称用量/数量规格单价总价格厂商或公司获得途径到货时间1四氧嘧啶粉剂1g2决明子1kg6元/kg6元3葡萄糖注射液一瓶500ml4生理盐水两瓶500ml56789101112131415(二).主要仪器设备序号仪器设备名称数量来源（提供单位/购买的公司）测量单个样品所需付费用总费用1微量血糖仪实验室提供2血糖试纸60345（三）.器械或用具序号器械或用具名称规格数量来源（提供单位/购买的公司）购买的到货时间购买的费用1灌胃管30实验室提供2注射器5ml10实验室提供3EP管100实验室提供4一次性手套双50实验室提供5手术剪刀2实验室提供6天平1实验室提供7纱布10实验室提供8镊子2实验室提供9马克笔2实验室提供