并适应测量蛋白质磷酸化活细胞实时

并适应测量蛋白质磷酸化活细胞实时。Rac激活Rac是一个小三磷酸鸟苷结合蛋白的Ras和家人扮演不同角色在信号包括调节细胞形态和肌动蛋白细胞骨架。它的活动状态由三磷酸鸟苷结合的程度。一旦三磷酸鸟苷绑定,Rac可以与下游效应器分子如蛋白质激酶,PAK1。Rac-GTP-bindingPAK1域(PDB)标签荧光Alexa546染料,这是注入细胞表达功能Rac-GFP融合蛋白(Rucktascheletal.2000年)。Rac激活被报道烦恼Rac-GFP和PBD-Alexa546之间。这是观察到发生在膜俄文该组织和领导边缘蔓延到人为能动的细胞诱导的伤口。这应该是一个技术是适应小GTP-binding的其他成员蛋白质的家庭,有一个已知的效应蛋白nucleotide-specific的方式结合。领先的边缘蔓延到人为能动的细胞诱导的伤口。这应该是一个技术是适应小GTP-binding的其他成员蛋白质的家庭,有一个已知的效应蛋白nucleotide-specific的方式结合。荧光Alexa546染料,这是注入细胞表达功能Rac-GFP融合蛋白未来本文中描述的研究仅代表细胞生物学的革命的开始!没有疑问,GFP已经完全改变了我们的看法什么是可能的在细胞信号的研究。一个未来的问题将GFP的大小。尽管它是27kDa,似乎很少影响的亚细胞定位的蛋白质标记,许多控制仍然是需要确保父蛋白质行为希望本地同行。绕过这问题,我们已经开始看到介绍标记蛋白质的技术与规模小得多的cell-permeantarsenical-based荧光化合物等这些钱用于FLASH开发的系统同事(Griffinetal.1998年)。另一个问题中心当前require-ment过标记蛋白质,这本身导致各种各样的潜在文物。然而,技术内生同源蛋白质的标记重组现在可以和结合FLASH标签系统可以帮助克服这个import-ant限制。毫无疑问,过去的五年里细胞生物学的主要革命,我们只能等待在屏息以待,指望我们的技术这些钱用于FLASH开发的系统在接下来的十年。确认在作者的实验室工作由赠款支持来自英国医学研究理事会,威康信任和英国糖尿病。英国高级JMT是一个糖尿病研究员。引用阿莱西博士&唐斯CP1998π3-kinase在胰岛素的作用行动。BiochimicaetBiophysica学报1436151-164。安德森KE,CoadwellJ,斯蒂芬斯LR&1998年霍金斯PT易位的PDK-1质膜是很重要的当代生物学允许PDK-1激活蛋白激酶b.8684-691。AndjelkovicM,阿莱西博士,MeierR,费尔南德斯,羊新泽西,抑郁症科恩M,CronP,P,LucocqJM&Hemmings英航1997的作用易位激活和蛋白激酶B的函数。生物化学杂志》272年31515-31524。BairdGS、撒迦利亚达&钱RY2000生物化学、muta-genesis,寡聚化域,一个红色的荧光蛋白从珊瑚。PNAS9711984-11989。Bastiaensπ&乡绅1999荧光寿命成像显微镜:细胞生化过程的空间分辨率。细胞生物学948-52的趋势。BastiaensπR&Pepperkok2000观察蛋白质在自然栖息地:活细胞。生化趋势Sciences25631-637。鲍曼CA,日本梦梦V,KanzakiM,瑟蒙德,莫拉年代,Shigematsu年代,BickelPE、2我&SaltielAR2000上限罚款第二个刺激葡萄糖所需信号通路交通工具。大自然407年202-207。安德森BotelhoRJ,前线M,DierckmanR,R,水井,纽约JD,MeyerT&Grin斯坦2000年本地化两相的变化phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate吞噬作用的网站。杂志细胞生物学1511353-1368。基,RapizziE,ToselloV,PintonP,DeVirgilio我FogartyK&R睡梦中2001重组发光蛋白质和绿色荧光蛋白质是细胞信号传导的研究的有效工具。生化355年1-12》杂志上。小CofferPJ,JinJ&Woodgett1998蛋白激酶B(c-Akt):a磷脂酰肌醇的多功能中介3-kinase激活。生化Journal3351-13。角膜,JanovickJA,Maya-NunezG&ConnPM2001促性腺激素释放激素受体microaggregation.Journal生物化学2762153-2158。CurrieRA,沃克KS,灰色,迪克米,Casamayor,唐斯CP,科恩P,阿莱西博士&LucocqJ1999的作用磷脂酰肌醇3、4、5-trisphosphate调节活动3-phosphoinositide-dependent蛋白激酶1和本地化。生化Journal337575-583。天RN1998的可视化Pit-1转录因子的相互作用荧光共振能量转移的活细胞细胞核显微镜。分子内分泌学1214101410。EmmanouilidouE,TeschemacherAG)PouliAE,尼科尔斯,苏厄德EP&拉特GA1999成像Ca2+的浓度变化分泌小泡与重组目标表面变色。当代生物学9915-918。弗莱彻LM、威尔士GIOateyPB&TavareJM2000的角色微管细胞骨架在GLUT4囊泡运输fficking和调节刺激葡萄糖摄取。生物化学杂志352年267-276。份PGP,弗莱彻LMOateyPB,穆罕默德N,多莉乔&TavareJM1999蛋白激酶B刺激的易位GLUT4但不是3t3-l1GLUT1或转铁蛋白受体脂肪细胞的途径包括SNAP-23synaptobrevin-2,和/或cellubrevin。生物化学杂志》274年2808年构成复杂的Ca2+动员模式。科学2841527年-1530年。HoutsmullerAB&VermeulenW2001大分子动力学活细胞细胞核揭示了荧光后再分配光漂白。组织化学和细胞生物学11513-21。散步流言GJ&汉堡BMT1999Forkhead转录因子:新的洞察蛋白激酶B(c-akt)信号。《分子medicine77656-665。MahajanNP,林德K,贝瑞G,喜mR&Herman戈登•瓦1998B在线粒体中bcl-2、Bax交互探测绿色荧光蛋白和荧光共振能量转移。自然生物技术16547-552。MahajanNP、Harrison-Shostak直流MichauxJ&HermanB1999小说变异greenfluorescent蛋白质的蛋白酶底物显示specific期间还存在细胞凋亡的激活。化学和生物学6401-409。MatzMV,弗拉德科夫AF、腊八丫Savitsky美联社,ZaraiskyAG)马克洛夫毫升&LukyanovSA1999荧光蛋白nonbioluminescent珊瑚虫的物种。17日出版的《自然·生物技术》上969-973。MitraRD,席尔瓦CM&Youvan直流19普雷斯利摩根富林明,科尔NB,Schroer认为助教,HirschbergK,ZaalKJ&Lippincott-SchwartzJ1997ER-to-Golgi运输可视化活细胞。38981-85。雨j,塞利格L,德重用H、V的人群,瑞佛迪C,西蒙,LenzenG、FPetelWojcikJ,SchachtV,ChemamaY,Labigne一个&本书2001页的蛋白质交互地图幽门螺杆菌。大自然409年211-215。RucktaschelAK,格兰DK&基督B2000监管胰高血糖素(营)和胰岛素启动子的人磷酸烯醇丙酮酸carboxykinase基因(胞质)培养老鼠肝细胞和人类肝母细胞癌的细胞。生物化学杂志352年211-217。奥尔金,麦克卢尔M,桓gF&CarterR2000互动的EGF在活细胞受体和grb2可视化荧光共振2000年博士VanhaesebroeckB&AlessiPI3K-PDK1连接:不仅仅是PKB的道路。生化Journal346561-576。VarnaiP,洛特KI&BallaT1999磷脂酰肌醇3-kinase-dependent膜协会的布鲁顿酪氨酸激酶pleckstrin同源域可视化在单一的活细胞。生物化学杂志》274年10983-10989。VenkateswarluK,信息F,OateyPB,TavareJM&卡伦PJ1998年,一个神经生长因子和表皮生长factor-stimulated易位的ADP-ribosylationGRP1factor-exchange因素对PC12细胞的质膜需要激活磷脂酰肌醇3-kinase和GRP1pleckstrin同源性域。生化Journal335139-146。VenkateswarluKOateyPBTavareJM&卡伦PJ1998b胰岛素依赖型易位阿诺的质膜脂肪细胞磷脂酰肌醇需要3-kinase。当代生物学8463-466。VenkateswarluK,信息F,TavareJM&卡伦PJ1999egf与NGF-stimulated易位cytohesin-1的等离子体PC12细胞的膜需要π3-kinase激活和func-tionalcytohesin-1PH域。《细胞科学1121957-1965。/