实验9淀粉酶的纯化分析

实验九工业淀粉酶的纯化分析一．目的工业淀粉酶是粗酶制品，含有大量的杂质。本试验的目的是学习纯化的方法和步骤，掌握蛋白质（酶）纯化过程的基本概念。二．步骤1.工业淀粉酶g，加蒸馏水ml溶解；取ml，-20℃保存。其余70%饱和度硫酸铵沉淀，离心后ml溶解，分装后-20℃保存。2.取ml沉淀溶解液上样，saphedex-G25脱盐，收集蛋白部分共ml，-20℃保存。3.取上述保存的样品，分别测定酶的活力和蛋白质的含量。三．结果计算：数据、计算过程和结果请填入表格一其中，回收率是指（相对于初始时）总酶活力剩余的百分数；纯化倍数是指比活力提高的倍数。四．结果分析（分析该计算结果产生的原因）：纯化的目的是去除杂蛋白，同时尽可能减少目标蛋白的损失（丢失和失活）。所以正确的纯化步骤中，酶的总活力应该会。但是比活力会。但是本次实验总活力出现了相反的结果，请分析其中的原因（推测导致这个现象产生的原因）。提示：可以在图书馆检索有关文献，表一结果计算样品项目粗酶溶液70%硫酸铵沉淀溶解液脱盐后蛋白质收集液备注酶浓度（u/ml）总活力（u）活力回收率（%）100%蛋白浓度（mg/ml）总蛋白（mg）比活力（u/mg）纯化倍数1