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医学实验动物学实验报告(二)实验名称:大鼠的一般操作实验日期:姓名:学号:专业:一、实验目的和要求掌握大鼠的一般操作方法:抓取和保定、性别鉴别、给药、采血、处死、解剖等。二、实验准备1、动物:SD大鼠,雌雄各一只。2、器械:毛笔,解剖剪,解剖镊、眼科剪,眼科镊,解剖板,灌胃针,头皮针,注射器,干棉球、酒精棉球,50ul采血针3、药物:苦无酸,0.9%生理盐水及10%水合氯醛三、实验操作1、抓取和保定将大鼠放置于桌面,右手抓取其尾部,左手放在大鼠背部,左手食指和中指使其颈部保定,左手半握状,大拇指压住大鼠右前肢,四指压住大鼠左前肢,将大鼠翻转。2、性别鉴定抓住大鼠后,观察动物肛门与生殖器之间的距离,距离远的为雄性,距离近的为雌性;观察生殖器附近,雄性成年大鼠睾丸降至阴囊内,有明显突起;成年雌性大鼠有6对乳头。3、给药(1)灌胃:大鼠保定好后,右手持灌胃器,从大鼠左嘴角灌入,灌胃针轻压其上腭部,使其口腔与食道成一直线,灌胃针进入深度为2/3左右,右手食指轻推注射器是0.9%生理盐水缓慢进入大鼠胃内(2)腹腔给药:左手抓取和固定大鼠,右手持注射器,从左下腹部腹股沟上约0.5cm,腹中线旁外1cm进针,进针时针头与腹部平面形成45度,进针深度约1cm。(3)静脉注射:①将大鼠放入固定的笼内,尾巴滞留在外,消毒尾部,并挤压尾根部用左右拇指和食指控制大鼠尾巴角度。右手持注射器,使其与尾两侧的静脉平行(小于15°),从尾下1/5处(约距尾尖3-5cm)进针,将注射器外套置于拇指与中指交叉处,保持针头刺入点、血管、注射器成一条直线。②向充盈的尾静脉刺入约5mm,保持针头刺入点、血管、注射器成一条直线,稍回抽见有回血,说明针头已经准确插入静脉内。食指及中指夹住注射器外套,拇指推注射器,将0.9%生理盐水按一定速度推入。刺入后先缓注少量生理盐水,如无阻力,表示针头已进入静脉,可继续注入,若注射时有较大阻力,说明针头未刺入血管,应重新向尾根部移动注射。医学实验动物学实验报告(二)③注射完毕后按压止血。4、眼眶后静脉丛穿刺采血采血时左手拇指、食指从背部紧握大鼠的颈部,当取血时轻轻压迫大鼠颈部两侧,使眶后静脉丛充血,大鼠眼球暴露,取长约2~3cm、内径0.5~1mm消毒备用的毛细吸管,时毛细吸管与大鼠面颊成45°夹角,由内眦刺入,刺入深度约4~5mm。当感到有阻力时停止推入,轻轻旋转毛细吸管,血液便能自然流入毛细吸管中。通常弃去第一滴血,从第二滴血开始收集,当得到所需的血量后,及除去加于颈部的压力,同时将毛细吸管拔出,用消毒棉球按压穿刺处止血。5、处死大鼠处死可采用引颈法,此法快速而且痛苦小,对一般实验结果无影响。6、解剖固定大鼠,以下腹部最低点起始,V字开口,沿中线剪开皮肤到剑突,再剪开腹膜,暴露腹盆腔器官。腹腔内器官包括肝脏(分六叶,无胆囊),脾脏,胰腺(位于中部与脾脏相连的分散的脂肪样结构,粉色),胃,肠道,肾脏(推开肠管可见),输尿管,膀胱,生殖器官(雌性:子宫和卵巢;雄性:将睾丸挤入盆腔内,可见两个椭圆形白色物质)。继续剪开胸部皮肤和肋骨,可见两侧肺脏和中间心脏,向上气管。剪开头部皮肤暴露颅骨,剪开颅骨。(1)胃由前后两部分组成,前胃为无腺区,后胃为有腺区,前后两部分由一个界限嵴分开,食管通过界限嵴的一个褶进入胃小弯,此褶时大鼠不能呕吐的原因。(2)腹部可见肝脏呈紫红色,约占体重的1/25,由四叶组成(右侧叶、中叶、左叶和尾叶)。肝脏再生能力强,部分肝切除术后仍可再生。成年鼠切除肝2/3,三周内肝脏重量可恢复到接近正常。大鼠无胆囊,各肝叶的胆管会合成胆总管,开口于十二指肠。胰腺位于胃和十二指肠的弯曲处,呈淡粉色,形状不规则,似脂肪。肾脏位于腹腔背侧脊柱两侧,呈暗红色、蚕豆状。每侧肾脏都和一条白色细长的输尿管相连,输尿管下接膀胱。肾上腺位于肾脏上方,距离肾脏大约0.3cm,为白色米粒样物质。(3)胸腔内肺脏为海绵状,淡粉色,位于胸腔中部,分为左、右两部分。左肺为一个大叶,右肺分为四叶(前叶、中叶、副叶、后叶)。心脏位于两肺之间。胸腺位于胸骨后,心脏前上方,为一团白色脂肪样组织。(4)大鼠的唾液腺包括腮腺、颌下腺和舌下腺。分别位于下颌骨后缘至锁骨的腹外侧、下颌骨后缘和胸腔入口的腹侧、颌下腺口侧。颈区肩胛部间沉积的脂肪组织呈腺体状,称冬眠腺,在产热中起重要作用。甲状腺在颈部环状软骨高度,位于气管两侧,白色的脂肪样物质,0.5—1mm。(5)大鼠的中枢神经包括脑和脊髓。解剖颅骨后,将大脑由前向后剥出,可见医学实验动物学实验报告(二)到位于视交叉后方的垂体窝,里面的白色物质即为垂体,垂体较软,可用镊子取出。四、实验注意事项1、在抓取和保定大鼠时,大鼠的牙齿锐利,容易伤人,抓取时应格外小心,可戴上纱手套以防被咬;大鼠向前抓时可拉直其身体,易于抓取,并且尽量多抓皮肤,尤其在进行摘眼球取血时,需抓头皮直至其暴露眼睛。2、灌胃时,插入时应该感觉较为通畅,如果阻力较大时可能还在口腔内,或插入其他软组织中,不可强行插入,应退回后掌握方向再尝试插入,否则可能损伤大鼠肺或食管。把灌胃针插入2/3左右,如果灌胃时液体可通畅进入,表示灌胃针插入大鼠的胃里,如哟液体注入是大鼠右呕吐或强烈挣扎,表示灌胃针没有插入胃内,需要重新操作。3、腹腔注射时,针头不能插入太深,选择进针部位应尽量靠近下腹部,尽可能避免刺伤肝脏、脾和膀胱。推药前应前回抽,确认无血液回流再给药,以免直接注射进血液。4、大鼠尾静脉注射时进针后注意稍将针头往上挑,由于大鼠血管较粗,所以进针后可以进行回抽,若针头有回血即表示针在血管里。推药时注意观察血管的颜色和尾巴是否水肿。大鼠尾静脉注射量控制在1ml内。五、实验讨论1、给药途径有经口灌胃法、经呼吸道吸入、经皮肤吸收和注射给药法等,选择歌谣途径的依据:(1)根据药物的性质悬着给药途径;如有刺激性的药物不适用于皮下、肌肉和腹腔注射,只能经口给药或静脉注射,如在消化道内破坏或吸收不好的药物应该注射给药。(2)根据实验要求选择给药途径;如要求药物作用出现快,可用注射给药。如要药物作用相对延长,可注射油剂。若为雾状药物或毒物则需要通过呼吸道吸入。有些毒物易经皮肤吸收,可采用皮肤给药。(3)根据剂型选择给药途径;水溶液可以采用任何给药途径,油剂溶液可经口给药,也可通过肌肉注射给药。2、眼眶后静脉丛采血法方法简单,便于掌握。血流较快,采血量多,能在较短时间内采到3-5ml血。伤口较小,愈合较快。成功率高,死亡率低。但本方法采血不能避免组织液的混入,对于血样要求较高的研究应谨慎使用。另外,多次使用易引起大鼠的感染,对后续试验结果存在一定影响。
本文标题:实验动物学报告2
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