微生物复习题1

微生物复习题1、咽试子采集方法（抬头/压舌/涂抹/接种）1）要求病人头微抬2）压舌板轻轻压下舌根部3）用1根用生理盐水湿润后的棉试子深入口腔，适度用力涂抹咽后壁粘膜，注意避免触及舌部。4）及时接种相应的平板或放入相应采样液中。2、血清标本采集方法1）通常采用肘部静脉，幼儿可采用颈外静脉。2）采血前按检验项目要求，准备好采血器材。3）患者取卧或坐位，手臂伸直平放在床边或台面垫枕上，暴露穿刺部位。4）找好合适采血静脉后，消毒、穿刺采血，至所需血量后，解开压脉带、用无菌干棉球（签）压住伤口，拔出针头。5）采血完毕，再次核对病人姓名和号码，应将用过的器材放在固定的回收箱内，决不能随意丢弃，污染环境。6）采集量要求5ml，以空腹血为佳，使用真空负压采血管。3、尿液标本的采集1）一般采随机新鲜尿。2）盛尿的容器必须洁净。3）采集中段尿，尿液取量一般为5-10ml左右。4）尿标本尽量在使用抗生素前收集，要防止混入其他异物。5）标本应立即送检和处理。若不能及时检验，可将标本置冰箱保存，若加入防腐剂，保存效果更佳。4、大便（肛拭子）标本的采集1）争取在发病早期，服用抗菌药物之前采集。2）可用棉拭采取自然排出的新鲜大便，亦可用直肠棉拭或采便管由肛门插入直肠内3-5cm处采取。3）水样便采1-3ml，成形便采取指甲大小的粪量。脓血便采取脓、血和粘液部分。5、食品样品采集注意事项1）无菌操作。采样用具必须无菌。2）尽量采集有包装的食品。3）若包装太大或没有包装，则需用采集工具采集样品。4）混合均匀：粉末状的样品，应边取样边混合，液体样品应振摇混匀。5）保存状态：冷冻食品应保持冷冻状态，非冷冻食品需保持在0℃~5℃中保存。6、食品采集方法1）重量法：采样数量一般不少于200g。2）拭子法：检出的活菌总数不高。3）灌洗法：比拭子采样法捡出率高。7、直接食用的小包装食品抽样方法：取原包装，不要开封，以防污染。8、大容器包装的液体食品抽样方法：1）抽样前摇动或搅拌，使其达到均质。2）将抽样用具浸入液体内略加漂洗后再取样。3）装人盛样容器的量不应超过其容量的四分之三。4）取完样品后，应用消毒的温度计测量食品的温度，并作记录。5）如为非冷藏易腐食品，应迅速将所抽样品冷却至0-4℃。9、大容器包装的固体和固体食品抽样方法：1）用灭菌抽样器采取不同部位样品，放入一个灭菌容器内。2）不要使样品过度潮湿，以防细菌增值。10、大容器包装的冷冻食品抽样方法：1）从不同部位抽样。2）送检前，要保持冷冻状态。一旦融化，不可再冻，保持冷却即可。11、大气样本的采集方法1）自然沉降法：通常设置5个采样点，采样高度为1.2～1.5m。采样点远离墙壁1m以上，避开空气流通处。将采样平板置于采样点，打开皿盖，暴露5分钟，盖上皿盖，翻转平板，及时送检。2）撞击法：固体撞击式采样器、液体撞击式采样器。3）其他采样器：离心式采样器，过滤阻留式采集器、热沉降和静电沉降采样器等。12、水样标本的采集方法1）无菌操作。容器应清洁无菌。2）自来水样品采集：先用清洁布试干水龙头，再用酒精烧灼水龙头周围，将水龙头全打开，放水5～10分钟，再将其关小取样。3）井水及江、湖、河、游泳池水样采集：将灭菌瓶安装在采水器上，距水面10～15cm处采样。4）加氯消毒水样采集：每500ml应加1.5％硫代硫酸钠2ml中和余氯。13、土壤样品的采集方法：1）选择有代表性的土壤。2）按对角交叉（五点法）取样。3）用灭菌工具先除去地表枯枝落叶，再铲除1cm左右表层土，用烧过的勺或铲取土样约200～300g，装于灭菌容器内，4）混合后，做好标识。14、食品样品的保存和运送方法及其注意事项1）尽快送检。2）如不能及时送检，冷冻样品在-20℃保存；冷却和易腐食品在0-4℃保存；其他食品可放在常温冷暗处。不超过36h。3）冷冻和易腐食品应低温运送。4）盛样品的容器应消毒处理，不能在样品中加入任何防腐剂。5）样品由专人立即送检。不能由专人携带时，也可托运。6）作好样品运送记录，运送人签字。15、水样的运输和保存及其注意事项1）2小时内尽快送检。不能送检，应放冰箱保存，不超过4小时。2）运送时，避免溢出和容器破损。3）需冷藏样品，需配备制冷剂。16、病毒分离标本的保存和运送1）采集后立即冷冻保存。2）不能及时接种，则置－70℃或以下保存。3）样品运送液可用Hankˊs液，并加入抗生素。17、血清标本的保存与运送1）分装冷冻保存，24小时带冰送检。2）尽快接种分离，48小时内接种者，可置4℃保存，不能接种者－70℃或以下保存。3）可在4℃存放1周，长期保存置－20℃或以下。18、脑膜炎奈瑟氏菌寄居部位以及传播方式？1）脑膜炎奈瑟氏菌定居在人的鼻咽腔粘膜2）人类是他的唯一自然宿主3）通过呼吸道传播19、脑膜炎双球菌生物学性状1）染色及形态：脑膜炎双球菌为革兰氏阴性双球菌，呈肾形或豆形，0.8umx0.6um大小，常成对排列，邻近两边扁平凹陷。2）营养要求：该菌要求营养较高，在普通琼脂培养基上不生长，接种到巧克力色琼脂平板上，初次分离在5%CO2，37℃培养24h。3）菌落形态：菌落的直径约1mm，表面突起、光滑、湿润、圆整、略带灰白色、半透明、不溶血、无色素。培养时间延长，菌落增大，变成浅黄色，不透明。4）生化特征：该菌能产生自溶酶，培养时间过长，菌体易裂解自溶。绝大多数菌株分解葡萄糖和麦芽糖，产酸不产气。不分解蔗糖、果糖和乳糖。氧化酶试验阳性。5）抵抗力：脑膜炎双球菌对理化因素的抵抗力很弱，对寒冷、干燥、热与阳光及紫外线等均极敏感。20、脑膜炎双球菌的属种群及菌型1)根据血清群特异性荚膜多糖（CPS）的结构与组成成分，脑膜炎双球菌可分为13个血清群（A、B、C、D、29E、H、I、K、L、W135、X、Y、Z）。90％以上流脑的病例是由A、B、和C群引起的。2)根据外膜蛋白(OMP)可将B和C群脑膜炎双球菌分成不同的血清型以及血清亚型。由于目前用于分型的单克隆抗体的种类有限，故有不少Nm菌株尚不能分型和亚型。对于A群Nm以4型，P1.7与P1.9亚型多见。3)脂寡糖（LOS）是其内毒素的主要成分，可分成13个免疫型，其中A群LOS以L10和L11免疫型多见，B群以L3,7,9复合免疫型多见。21、在流脑的流调及病例诊断中常采取哪些标本？咽拭子、脑脊液、血液、淤血点、血清。22、流脑样品的处理和运送应注意些什么？1）早期采集样品:应尽可能采集病人用药前的早期样品.2）及时处理样品:采集样品后,应尽可能地做到床边接种,若无可能则应在最短的时间内送至实验室进行接种培养.3）保温运送:脑膜炎双球菌对温度较为敏感,温度过低或过高均可导致菌株死亡.在运送样品或培养物时,应保持样品处于20℃～36℃之间,不能低温运送.用于检测抗体的血清标本应低温运送.23、常用脑膜炎双球菌分离培养基有哪些？分离培养基常采用卵黄双抗平板、巧克力双抗平板、血平板、巧克力琼脂平板24、阳性分离物的鉴定生化鉴定：氧化酶、触酶试验阳性，分解葡萄糖和麦芽糖，产酸不产气，不分解蔗糖、乳糖、果糖。在普通培养基上不生长。血清学鉴定：分别用脑膜炎球菌13种分群诊断血清做凝集。25、流感病毒生物学性状与致病性1）形态结构：流感病毒具有多形态，有的呈丝状、有的呈杆状，但一般为球形，病毒的直径为80～120nm。a．核心（核衣壳）其核酸为单股负链RNA。甲、乙型流感病毒为8个节段，丙型为7个节段（少一个编码NA的RNA节段），每一个节段就是一个基因，决定流感病毒的遗传特性b．病毒囊膜流感病毒囊膜由内向外，可分为内膜蛋白、类脂和糖蛋白三层。糖蛋白层由两种糖蛋白刺突组成，一种是神经氨酸酶（NeuraminidaseNA），一种是血凝素(HemagglutininHA)。血凝素：HA能与多种动物（如鸡、豚鼠）和人的红细胞表面的糖蛋白受体相结合，引起红细胞凝集。血凝集是流感病毒的主要中和抗原，其抗原性最易发生变异，它是流感病毒亚型划分的主要依据。神经氨酸酶和血凝素这两种抗原都具有易变异的特性，是流感病毒变异的主要原因。2）培养特性a宿主范围：貂、鸡胚、原代人胚肾、猴肾、狗肾，现在常用狗肾细胞分离病毒。b红细胞凝集范围：鸡、豚鼠、和人“O”型红细胞。但O”相毒株对鸡红细胞不凝聚，在分离O”相毒株时，应用豚鼠或人的红细胞来检查。3）抗原变异:a相变异：甲1（H1N1）亚型流感病毒能凝集人或豚鼠的红细胞，而不凝集鸡红细胞。具有这种特性的毒株称“O”相或原生相毒株。可对鸡红细胞产生凝集，称为“D相或原生相毒株。b抗原性变异：指人甲型和乙型流感病毒表面HA和NA的抗原性变异。甲型流感病毒变异最强，常引起世界性大流行。流感病毒HA和NA抗原性变异有两种形式，一种为所有流感病毒所共有的抗原性漂移，指流感病毒内部经常发生小变异；另一种为甲型流感病毒所特有的抗原性转变，又称抗原大变异，形成新的亚型，常引起大流行。4）分类流感病毒属正粘病毒科，根据病毒粒核蛋白（NP）和膜蛋白（MP）抗原特点及基因特点的不同流感病毒分甲、乙、丙三型，其中甲型和乙型流感对人类威胁较大。与人感染有关的常见甲型流感病毒亚型有：甲1（H1N1）、甲2（H2N2）、甲3（H3N2），人的禽流感病毒亚型主要为H5N1、H9N2、H7N7，其中感染H5N1的患者病情重，病死率高。5）流感病毒的致病性与所致疾病。流感病毒经过飞沫传播，侵入呼吸道，通过其HA吸附于呼吸道粘膜上皮细胞膜上的HA受体上，然后浸入这些细胞进行增殖。经1～2天的潜伏期，感染者即可出现流感症状。病毒在呼吸道粘膜上皮细胞内增殖，造成这些细胞变性，坏死脱落，粘膜充血水肿，腺体分泌增加；出现喷嚏、鼻塞、咳嗽等症状。病毒在上皮细胞内复制，很少入血，但可释放内毒素样物质入血，引起全身中毒症状。6）流感病毒的免疫性。病后对同型病毒有免疫力，可维持1～2年。主要为分泌型lgA和血清中和抗体lgM、lgG共同的作用。26、实验室检验方法流感的实验室检查方法包括病毒分离、鉴定，血清抗体水平测定等。27、标本采集及处理。1）标本接种：a采样种类：采集流感样病例的咽、鼻拭子，必要时，可同时采集血清样本。b采样对象a）咽、鼻拭子：发病3天内，未服用抗病毒药物（金刚烷胺、金刚乙胺、达菲等）的流感样病例。b）急性期血清：发病后7天内的流感样病例。c）恢复期血清：发病后2～4周的流感样病例。c采样方法a）咽拭子采集：对婴幼儿患者采集样本时，先将聚丙烯纤维拭子用Eagle’s液（PH7.4）蘸湿，在试管壁挤干后，在被检者双侧咽扁桃体及咽后壁涂抹数次，然后将聚丙烯纤维拭子置于含有3mlEagle’s液的试管内送检。采集5岁以上患者样本时，拭子可不必用Eagle’s液蘸湿。b）鼻拭子：将棉签轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭两侧鼻孔。将棉签头部浸入3～4ml采样液中，尾部弃去。c）血清采集：采集静脉血5ml,离心后取上清液装至血清管中。血清样本应采集急性期与恢复期双份血清。d标本处理血液置室温数小时待血完全凝固，1500～2000rpm离心10分钟，收集血清于1.5ml无菌管中，做好标记。血清可置于4℃存放一周，存放超过一周需置–20℃或以下保存。含聚丙烯纤维的试子的采集标本，先将含聚丙烯纤维的试子再管壁反复挤压后取出。鼻腔或咽部拭子的标本，充分振荡标本管，将粘液打碎接种时，待其自然沉淀5～10分钟，取上清5ml。接种时，每2ml标本加0.2ml双抗，置4℃作用2h后直接接种或低温保存。e细胞分离采用MDCK细胞28、麻疹病毒生物学特性该病毒为多形性，一般成球形，直径120－250nm，基因组为单股负链RNA，不分节段，核衣壳呈螺旋状对称排列，病毒含脂质的外膜上有血凝素及血溶素二种表面抗原，相间插在脂质外膜上呈棘状突起。29、麻疹标本（血清、咽拭子和尿液）的采集时间、收集流程、贮存与安全运输要求1）检测IgM抗体，应在患者发病初期（10天内）采集。检测IgG抗体应采集急性期和恢复期双份血，分离血清，如果不能当天检测，应将血清之-20度冰箱保存。2）采集咽拭子标本，应在皮疹出现前