山东省科技发展计划合同书

项目编号：2013YD21006密级：山东省科技发展计划项目合同书项目名称：β-葡聚糖酶的研发及产业化项目主管部门：聊城市科技局项目负责人：刘钦松联系人：郭宝柱联系电话：[phone]起止年限：2013年01月至2013年05月山东省科学技术厅制填写说明1．本合同书系省科技厅为组织山东省科技发展计划项目研究而设计，合同书甲方为科技发展计划项目主管部门，乙方为项目承担单位。2．本合同书一式四份，由项目主管部门与项目承担单位签订，项目主管部门一份，项目承担单位一份；省科技厅两份。3．合同书应用钢笔填写或计算机打印填报（A4），字迹要工整清楚。4．项目密级由项目承担单位提出建议，省科技厅项目主管处室认定。一、项目研究目标和主要研究内容（要解决的主要技术难点和问题，研究的创新点和内容等）主要技术难题和问题：1、菌种构建及其选育2、菌种培养条件及其诱导产酶表达3、发酵后期纯化处理工艺优化4、酶喷雾干燥包埋技术项目研究的创新点：1、现在市场上的β-葡聚糖酶大多有霉菌发酵提取得到，本项目的工程菌是毕赤酵母，更近于哺乳动物的真核生物，用其发酵产生的β-葡聚糖酶没有内毒素，而且是美国FDA批准的生物药物生产载体。2、通过将BRP分泌系统克隆整合到表达菌株中，使目的产物β-葡聚糖酶更容易分泌到胞外，避免产物在胞内聚集，也使得后期的分离纯化更简单，易于进行。3、通过培养基和发酵参数优化，该项目的工程菌产生的产物β-葡聚糖酶活力很高，根据β-葡聚糖酶的国际酶活标准，重组毕赤酵母胞外产酶量达到12000IU/mL以上，远高于市场商品酶活。项目的先进性：1、该项目技术已非常成熟，重组毕赤酵母生产β-葡聚糖酶已经完成1000L的中试发酵实验，无需再进行条件摸索，进一步研发，可直接进入生产阶段，节约时间和研发成本；2、公司现有的设备和条件已基本满足该项目的生产，无需再进行大量的投入，节约原始成本；3、现阶段市场对于β-葡聚糖酶酶活规定比较混乱，有的企业采取自己的酶活定义，使酶活不统一，现有市场上的商品酶大约1000～3000IU/mL，该项目重组毕赤酵母胞外产酶量达到12000IU/mL以上，远高于现在市场的产品酶活量；4、该项目产品β-葡聚糖酶分泌到胞外，无需破菌，下游纯化较简单，菌体分离即可得粗酶液，直接用于销售或者喷雾干燥。项目研究内容：本项目将β-葡聚糖酶从枯草芽孢杆菌中获得的β-葡聚糖酶基因（杂交基因）和BRP分泌系统克隆到质粒pLF3和pET中，将β-葡聚糖酶基因经密码子优化后导入重组毕赤酵母，极大地提高了β-葡聚糖酶的耐热度和表达量，并使β-葡聚糖酶分泌到培养基中，胞外产酶量达12000IU/mL以上。结合细胞高密度发酵技术建立和优化发酵β-葡聚糖酶生产工艺；建立和优化β-葡聚糖酶制备下游提取工艺。本研究所的重点是采用细胞高密度发酵技术提高β-葡聚糖酶的表达量。二、项目考核指标〔包括①主要技术指标：如形成的专利、新技术、新产品、新装置、论文专著等数量、指标及其水平等；②主要经济指标：如技术及产品应用所形成的市场规模、效益等；③项目实施中形成的示范基地、中试线、生产线及其规模等；④其它应考核的指标〕①主要技术指标：该项目预期完成后计划申请发明专利2项，发表著作2篇，技术水平达到国际领先，进行大规模生产后可替代进口。②主要经济指标：本项目进行产业化生产建设，一方面能够填补国内市场的需求缺口，解决国内进口价格昂贵的现状，为企业迅速盈利，产生巨大的经济和社会效益；另一方面为打开更为广阔的国际市场提供了先机。本项目技术尖端，研发成功后，将提高β-葡聚糖酶的产量，使之能大范围应用，生产的产品广泛应用于啤酒、饲料、医药、制糖、纺织、造纸和生物防治等行业，带动行业的发展；兼之利用生物方法，能有效保护环境，节能降耗。本项目建成投产后，预期年销售收入可达2844万元，年新增税收711万元，年新增利润1706万元。③项目实施中形成的示范基地、中试线、生产线及其规模等；本项目预期目标：通过基因工程手段构建基因工程菌高密度发酵生产，经分离得到粗酶液，重组毕赤酵母酶活单位可达12000IU/mL，酶活高于市场现有商品酶。达到国内领先水平，建设国际先进水平的β-葡聚糖酶生产与生物发酵基地，进行β-葡聚糖酶的研发、生产和销售一系列的工作。本项目地点位于山东省聊城高新技术产业开发区湖南路东首，山东博奥克生物科技有限公司新厂区内。目前，该项目的技术公司已与厦门大学进行沟通交流，需进行车间的建设及设备的购置。该项目进行生产车间建设，预期建成年产20吨的β-葡聚糖酶生产线，购置β-葡聚糖酶的生产设备，包括大型发酵设备、菌体分离纯化设备、喷雾干燥设备、菌体闪蒸干燥设备、40平米冷库等。保证β-葡聚糖酶的规模化生产。④其它应考核的指标：通过本项目的建设，培养造就一批具有高科技水平的专家。可以为研发人员提供平台，在创新实践中培养他们的探索兴趣和科学精神；发挥企业培养和吸引科技人才的优势。本项目建设完工后，通过聘用高层次科技人才和培养优秀科技人才，并给予政策支持等方式，吸引高等院校和科研院所的科技人员来企业兼职进行技术开发和高等院校和科研院所共同培养技术人才。三、项目年度计划及年度目标年度年度计划及年度目标2013年01月—2013年10月进行菌种构建、溶化、筛选，进行1L-3L实验室小试优化。2013年11月-2014年5月进行3L-100L中试发酵及后期纯化处理、工艺优化，由发酵工艺技术申请发明专利1项，相关著作1项。2014年6月-2015年6月进行100L-1OOOL优化大规模发酵，放大生产，进行β-葡聚糖酶的高效表达生产，申请下游包埋喷雾方面专利1项，相关著作1项。四、项目承担单位、参加单位及主要研究人员承担单位：主要参加单位：山东博奥克生物科技有限公司厦门大学项目负责人姓名性别年龄职务职称业务专业为本项目工作时间(%)所在单位刘钦松男42董事长企业管理90%山东博奥克生物科技有限公司卢英华男44院长/博导生物化学70%厦门大学主要研究人员刘钦松男42董事长企业管理90%山东博奥克生物科技有限公司卢英华男44院长/博导生物化学70%厦门大学王远鹏男44研究员/副教授分子生物学70%厦门大学姚传义男45研究员/副教授生物化学70%厦门大学敬科举男42研究员/副教授生物化学70%厦门大学董绍旺男31研发主任生物化学90%山东博奥克生物科技有限公司刘孟刚男32研发副主任分子生物学90%山东博奥克生物科技有限公司张丛丛女30研发副主任分子生物学90%山东博奥克生物科技有限公司郭涛男30研发组长分子生物学90%山东博奥克生物科技有限公司王兆守男42助理教授/研究员分子生物学70%厦门大学吴永坤男29生产部主任分析化学90%山东博奥克生物科技有限公司五、课题的经费预算单位：万元经费来源预算经费支出预算科目预算数科目预算数来源预算合计3200支出预算合计1264一、省级计划拨款200一、人员费305.89二、部门拨款0其中：课题负责人30.58三、地方拨款0主要研究人员275.31四、单位自筹2500二、设备费489.16五、其它来源5001．购置费402.032．试制费87.13三、相关业务费289.451．材料费92.012．燃料及动力费763．测试及化验费90.344．会议差旅费31.10四、其他费用179.49六、合同书签订各方意见项目主管部门（甲方）（公章）负责人（签字）年月日项目承担单位（乙方）项目负责人（签字）（公章）财务负责人（盖章）年月日省科技厅主管处室（公章）负责人（签字）年月日七、共同条款任务各方共同遵守山东省科技发展计划管理办法（简称“办法”，下同）：1．乙方必须按要求编报年度计划执行情况、下一年度经费预算和有关统计报表，交甲方汇总后，及时上报省科技厅。逾期不报，省科技厅有权暂停拨款。2．合同执行过程中，乙方如需调整合同任务，应根据“办法”中有关规定，向甲方提出变更内容及其理由的申请报告，经甲方审核后报省科技厅审定后实施。未接到正式批准书以前，双方须按原合同书履行，否则后果由自行调整的一方负责。3．乙方因某种原因（如：与项目申请书内容有出入、挪用经费、技术措施或某些条件不落实）致使计划无法执行，而要求中止合同，应视不同情况，部分、全部退还所拨经费；如乙方没有提出中止合同的要求，甲方可根据调查情况有权提出中止合同的处理建议，报省科技厅审核批准后执行。4．甲方根据应用技术研发资金开支的规定，监督经费的使用情况。凡不符合规定的开支，甲方负责提出调整意见。必要时，省科技厅有权直接提出调整或撤销意见。5．本合同书签订各方均负有相应的责任。若有争议或纠纷时，按山东省科技发展计划管理办法有关条款处理。