岛津LC-20AD液相色谱仪操作规程

岛津LC-20AD型液相色谱仪操作规程1．目的规范岛津LC-20AD型高效液相色谱仪的使用。2．范围适用于岛津LC-20AD型高效液相色谱仪的使用。3．职责质检员对本规程的实施负责。4．规程4.1系统组成：本系统由2个LC-20AD溶剂输送泵（分主/A泵和副/B泵）、SIL-20A自动进样阀、SPD-20A紫外-可见检测器、CTO-20A柱箱、LCsolution色谱数据工作站和IBM台式电脑等组成。4.2准备4.2.1准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20min。4.2.2根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）和定量环。4.2.3配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm滤膜过滤。4.2.4检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。4.3开机4.3.1接通电源，依次开启不间断电源、B泵、自动进样器、检测器、柱温箱、A泵4.3.2待泵和检测器自检结束后，打开打开色谱工作站，点击按钮“1”，输入用户名:ADMIN。4.3.3当SPD-20A发出蜂鸣声后，说明已建立与计算机之间的连接，LC窗口打开。4.4参数设定4.4.1设置新的分析参数时，请从通过键盘在LC窗口的“InstrumentParametersView”中输入参数（即A、B泵的流速，波长，柱温；柱在线时流速一般不超过1ml/min）4.4.2选择FileSaveMethodFileAs，输入方法名称后保存。4.4.3点击“Download”键，将保存好的方法下载4.5更换流动相并排气泡4.5.1将A/B管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中；4.5.2逆时针转动A/B泵的排液阀360°4.5.3按A/B泵的[purge]键，pump指示灯亮，1min再次按A/B泵的[purge]键4.5.4顺时针转动A/B泵的排液阀,关闭排液阀4.5.5如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽4.6平衡系统4.6.1更换流动相并排气泡后，在工作站中输入实验信息并设定各项方法参数4.6.2等度洗脱方式4.6.2.1点击“Instrumenton/off”按钮，A、B泵将同时启动，pump指示灯亮。用检验方法规定的流动相冲洗系统，一般最少需6倍柱体积的流动相。4.6.2.2检查各管路连接处是否漏液，如漏液应予以排除。4.6.2.3观察泵控制屏幕上的压力值，压力波动应不超过1MPa。如超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡，应重新排气泡。4.6.2.4观察基线变化。如果冲洗至基线漂移0.01mV/min，噪声为0.001mV时，可认为系统已达到平衡状态，可以进样。4.6.3梯度洗脱方式4.6.3.1以检验方法规定的梯度初始条件，按4.6.2项下方法平衡系统。4.6.3.2在进样前运行1~2次空白梯度。4.7进样4.7.1进样前按软件中[零点校正]按钮校正基线零点4.7.2点击“Singlestart”按钮，设置好保存路径并输入试样位置，系统开始自动进样4.7.3样品采集完毕后，点击“Stop”按钮，接着就会出现一条消息，询问您是否“Abortthecurrentrun”,单击Yes，当前的数据采集就会终止。4.8清洗系统和关机4.8.1数据采集完毕后，关闭泵，待压力降为0后，将工作流动相换水相，设定流动相比例，冲洗色谱柱4.8.2清洗柱4.8.2.1C18柱先用95%的水以1ml/min冲洗40min以上，再用90%的甲醇或乙腈冲洗20min，最后用40%的水冲洗10min4.8.2.2ProteinPAK60柱先用超纯水冲洗90min以上，再用甲醇或乙腈冲洗40min4.8.3清洗完成后，先关闭泵，待压力降至为“0”时，关闭各组件电源，关闭计算机4.9填写使用记录。高效液相使用与维护记录仪器型号：日期开机时间关机时间样品名称仪器情况使用人复核人备注高效液相使用与维护记录仪器型号：日期开机时间关机时间样品名称仪器情况使用人复核人备注