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实验十胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响原理胰岛素能降低血糖,肾上腺素能升高血糖给动物注射胰岛素或肾上腺素取注射前、后兔的静脉血,测定血糖含量通过公式计算血糖改变百分率血糖改变%=注射后BS-注射前BS注射前BS×100%原理葡萄糖+O2+H2OGOD葡萄糖酸+H2O2本实验是葡萄糖氧化酶(GOD)和过氧化物酶(POD)相偶联发生的偶联反应2H2O2+4-氨基安替比林+酚POD红色醌类化合物+H2O操作步骤动物准备注射前取血注射激素注射后取血计算结果称体重,重的注射胰岛素,轻的注射肾上腺素已准备腹部皮下45°注射,不要穿入腹腔内脏作好标记防止溶血测定血糖加样要准反应时间一致505nm比色注射激素和取血计算注射剂量:胰岛素为0.75U/Kg体重,肾上腺素为0.4mg/Kg体重;皮下注射激素;注射激素后取血,时间:肾上腺素30min,胰岛素1h(心脏取血);采血后静置10min至血清析出;3000r/min离心分离10min,吸取血清至新的EP管中,做好标记。取小试管4支,编号,按下表操作:加入物(ml)空白管标准管测定前测定后血清--0.010.01葡萄糖标准应用液-0.01--蒸馏水0.01---酶酚混合试剂1.501.501.501.50血糖测定混匀,置37°C水浴中,保温15min,加2.0mlH2O混匀后在波长505nm处比色,以空白调零,测定各管吸光度。注意事项1.腹部皮下注射,以45°进针,针头不要刺入腹腔,更不要穿破皮肤注射到体外。2.最后加酶酚混合试剂,各管反应时间应一致。3.葡萄糖氧化酶法可直接测定脑脊液葡萄糖含量,但不能直接测定尿液葡萄糖含量结果计算血糖改变%=注射后BS-注射前BS注射前BS×100%血糖浓度(mmol/L)=A测定管A标准管×C标准管思考题葡萄糖氧化酶法不能直接测定尿液葡萄糖含量,为什么?
本文标题:实验十胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响
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