实验室生物安全管理手册

1第一章总则1.1简介1.1.1机构情况名称：宁夏回族自治区固原市动物疾病预防控制中心主任：贺广霖地址：固原市南关街287号电话：0954—2028644传真：0954—2028644邮编：7560001.2中心基本情况固原市动物疾病预防控制中心（以下简称“本中心”）是根据固事机编事发[2006]74号文件的批复，由原固原市畜牧兽医工作站分离更名确立的合法动物疫病监测（诊断）机构，同时加挂固原市兽药饲料监察站的牌子，内设机构3个。行政隶属于固原市农业畜牧局。单位级别为正科级，经费由财政全额拨款，属于纯社会公益性事业单位。本中心地处固原市南关街，环境优美，无噪音、电磁、振动等干扰。中心实验楼共378.5平方米，由农牧局配电室负责供电，属三级供电单位，由自来水公司负责供水。中心下设综合办公室、兽医实验室（设病原学检测室、血清学检测室、分子生物学实验室3个实验室）、饲料质量检验室共3个科（室）。编制8人，现实有人数8人，拥有专职技术人员8人，其中，大学本科4人，全部为畜牧兽医专业技术人员。检验人员理论基础扎实，实验操作娴熟，严格遵守中心的各项规章制度，充分保证了检验工作的科学性和公正性。中心实验室占地378.5平方米，仪器设备固定资产103万元，拥有梯度PCR仪、酶标仪、高速离心机、细菌快速鉴定系统、电泳仪、研究型显微镜、凝胶图像处理系统、721分光光度计、马弗炉等仪器设备105多台（件），检测能力全区地市级实验室中处上游水平，可对各类动物疫病进行组织病理学、血清学、分子生物学和病原学以及饲料产品和原料质量进2行检测和分析。1.3主要业务和服务范围组织实施全市动物疫病预防与控制，特别是对重大动物疫病和人兽共患病的预防制和应急反应行动；承担全市动物疫病，特别是重大动物疫病、新发病和突发疫情的快速诊断与鉴定；指导、协调县动物防疫监督机构的业务工作，对上报的诊断结果结合有关疫情资料进行综合分析，做出疫情确认并上报；负责全市动物疫情检测和流行病学调查，全市动物疫情信息网络的管理，区内外动物疫情的收集、汇总、分析、报告以及预警、预报；指导、检查全市动物防检疫工作；开展动物源性食品安全监控工作；开展兽医公共卫生事件的调查处理及应急反应，配合卫生部门做好相关工作；从事动物疫病诊断、检测、防治新技术的推广；参与制定全市动物防疫的政策措施、防治规划、应急预案等；开展对县级动物防疫监督机构的业务指导以及实验室的质量管理和评价；开展对相关工作人员以及执业兽医等各类从业人员的培训；开展地市级的技术交流与合作；承担宁夏兽医行政主管机关和自治区动物疾病预防控制中心交办的其它工作任务。1.4实验室布局和生物安全等级1.4.1实验室平面布局（见下图）31.4.2实验室生物安全标识（见下图）授权人员方可进入生物安全水平：一级责任人：闫利珍紧急联系电话：[phone]白天电话：2028644晚上电话：202517241.4.3实验室生物安全等级和生物安全管理手册制定根据中华人民共和国农业部《兽医实验室生物安全管理规范》、《实验室生物安全通用要求》（GB19489-2008）、《动物病原微生物分类名录》（农业部令第53号）中有关对实验室生物危险度等级的划分标准、与微生物危险度等级相对应的生物安全水平、操作和设备、一级生物安全水平对设施和病原微生物保存等要求和规范，我中心实验室为基础实验室——一级生物安全水平。根据生物安全一级实验室的生物安全的规定，制定我中心的《实验室生物安全管理手册》，以此作为我中心实验室生物安全运行的制度和规范，希望中心所有员工严格遵守《生物安全管理手册》的规定。1.5实验室生物安全管理组织机构1.5.1实验室生物安全负责人中心主任为生物安全第一责任人，副主任为生物安全第二责任人，实验室主任为实验室生物安全直接责任人。1.5.2实验室生物安全管理机构为了加强实验室生物安全管理，本中心成立实验室生物安全管理小组。组长：中心主任贺广霖副组长：中心副主任吴建宁副组长：中心实验室主任闫利珍成员：中心实验室工作人员赵亚峰、谢建亮、杨晓梅，谢建亮任生物安全员。生物安全管理小组实行组长负责制，副组长及成员要积极配合组长做好实验室生物安全防护工作。5第二章实验室人员和项目准入制度2.1目的规范实验室的使用和管理，保证操作人员，实验对象和环境安全，确保检测结果准确可靠。2.2适用范围适用于实验室安全运转及在此环境下的所有检测工作。2.3职责进入实验室从事检测工作的所有人员严格按照本规定执行。2.4具体要求2.4.1概述2.4.1.1本中心实验室用于对检验者和环境有中度潜在危险样品的各项实验，必须符合下列规定：a)具备操作资质的人员可在实验室内工作，其他任何人未经许可禁止进入实验室。b)在实验室内的一切活动，必须遵照生物安全手册的规定进行。c)实验室内污染的空气需通过高效清洁后方能排出室外。d)实验室内产生的污水，必须经过消毒后方可进入公共污水系统。e)实验室的所有废弃品，必须通过高压灭菌后才能处理和清洗。必须携出实验室的中间实验材料、更换维修的仪器设备、也只有在确保无病原微生物污染的条件下，才能携出实验室。f)实验室内准备二级生物安全柜和生物安全二级无菌室，所有可能造成污染的能够置于生物安全柜内或无菌室的实验操作，置其内进行，以保6证实验室内空间的安全。2.4.1.2实验室运行的安全性要求本手册规定的各项要求，首先是为了保证实验室的安全运行，包括防止实验室工作人员的感染、防止实验室操作的病原微生物对环境的污染、防止检测样品的污染，保证实验结果的准确可靠。2.4.1.3实验室工作的质量要求本手册规定的各项要求，同时也是为了保证实验室的工作质量，即：实验产生的各项结果和数据，必须准确可靠：实验室出具的检验报告，必须明确完整。2.4.2实验室操作规程2.4.2.1启动实验室.开始工作前半小时。开启实验室主电源，使实验室及生物安全柜投入运行。2.4.2.2个人防护a)工作人员按照下列要求进行个人防护，才能进入实验室区域：b)在更衣室中换穿工作服和工作鞋。c)在清洁区内，根据实验要求做好防护。d)实验中需使用腐蚀性试剂时，在胶乳手套外加带一次性塑料手套；需要进行可能造成污染材料飞溅的操作时，需加戴防护面罩。2.4.2.3进入实验室a)工作人员进入实验室时，每进入一道门，应将此门关好，再开启下一道门。b)进入实验室后，关闭房间紫外线灯。c)检查实验室运转是否正常。7d)做好开始实验的各项准备。13.4.2.4启用标本、试剂一切准备工作就绪后，才将标本和试剂从冰箱中取出，直接放入生物安全柜中。用完立即归位，使其在冰箱外停留的时间尽可能短。2.4.2.5操作a)严格按照试剂使用说明进行操作。洗涤时避免液体材料飞溅。吸取、稀释液体时，将吸管插入试管底部，用吸球缓慢吸取，避免产生汽泡或汽溶胶。b)离心时，应使用双盖封闭式离心机和全封闭试管，每管离心液总量低于最高容量1个刻度单位：平衡时不得有液体渗陋到管套中，离心机使用后立即用消毒液擦洗消毒。2.4.2.6观察结果不打开容器的观察允许在生物安全柜外进行，否则，必须在生物安全柜内观察结果。2.4.2.7准予携出实验室的材料确保不含感染性的实验材料，才可以从实验室携出。容器表面应用75%乙醇消毒。2.4.2.8实验室清洁每一实验步骤完成后，均应清理台面。所有用过的试剂均应归还原位；使过的吸管等长形器材放入储存污物的盒内；锋利品放入专用的污物盒；纸巾软物品放入污物袋；在台面上喷洒75%乙醇，保持20分钟，然后以纸巾擦干。实验室的其他表面，也应经常用75%乙醇擦拭。2.4.2.9污染物品处理8放置污染物品的容器装满时，应更换新的容器。实验结束后，对用过的污染物品进行高压消毒。2.4.2.10更换工作服。工作完毕的更衣顺序是，先用消毒液浸泡手套5分钟，然后依次除去口罩、防护服、鞋套，放入高压消毒袋内，再次浸泡手套后除去手套，用75%酒精棉球擦面部裸露部位。2.4.2.11实验室消毒每次工作完毕，生物安全柜内用75%酒精擦拭台面，消毒液消毒地面，开启紫外线灯照射1小时后，逐一关闭实验室送风和通风设备{关闭顺序与开启顺序相反}。PCR实验室应用空气消毒机进行消毒4小时。2.4.3实验记录与实验报告2.4.3.1实验记录在实验室内，实验记录应使用铅笔或碳素笔书写。记录内容应简明扼要，包括实验日期，实验目的和实验的基本条件等提示记忆的内容，并较详细地记载观察到的实际现象及数据结果。要求字迹应清晰，数字成行成列，以避免录入错误。2.4.3.2实验记录带出实验室将上述记录在纸张上的实验记录应用80%福尔马林，密闭熏蒸消毒6小时后方可带出实验室。或隔着实验室玻璃窗由清洁区工作人员抄录一份。2.4.3.3实验记录录入计算机实验记录必须在实验结束后24小时内录入计算机。记录准确的实验报告和录入时间。再按照由实验室带出的书写记录，准确地记载实验结果和数据。录入后，书写记录保存1周，以备查验。实验记录录入后，一般9不得修改。因数据记录错误，录入错误，或实际观察到的实验结果改变，必须更改记录时，不要删除已经录入的描述和数据，而应录入新的描写和数据，并注明更改原因。2.4.3.4实验室记录备份每月一次，将上月计算机的实验记录做出备份，备份的实验记录不得修改。实验室负责人应定期检查实验记录，核对备份与原始的实验记录，对记录中的缺陷提出修改意见。2.4.3.5实验记录的保存年限实验记录保存一年。已使用的实验记录(出具报告，发表论文，或以其他方式引用)，在使用后再保存一年。如无特殊必要，备份的实验记录一般永久保存。2.4.3.6出具实验报告按照《质量手册》第十三章的有关规定进行。2.4.4标本保管规则2.4.4.1标本进入实验室a)出实验室采集的标本，本实验室统一登记编号，能反映出标本的来源、种类、性质、目的等相关信息。b)有关单位送检的标本由实验室统一登记编号，注明送检单位、送检时间、种类、性质、实验目的等相关信息。c)采集和送检样本编号规则：动物种类/样本类别/检测目的/年号/样本顺序号,除年号和样本顺序号外，动物种类、样本类别和检测目的分别用以下字母代替。动物种类：10猪—ZH牛—N羊—Y禽—Q样本类别：全血—QX血清—XQ脏器和组织—ZQ检验目的：疫病诊断—YBZD疫病监测—YBJC免疫效果集中检测—JZJC免疫质量抽检—MZCJ2.4.4.2标本的保管根据标本的性质、目的进行保存，每分标本分两份，一份检测时使用，另一份备用。标本因各种原因损失时，启用后备标本，并重新备份。2.4.4.3标本的销毁确定不用的标本，采用高压灭菌后焚烧的方式销毁。2.4.5实验室装备保养2.4.5.1实验室定期保养实验室的定期保养按照提供实验室设备厂商的规定进行，主要是对机械和电器部分进行维护。2.4.5.2实验室仪器设备的保养和维护实验室内的仪器设备的保养由实验室工作人员进行。维护有专业人员进行。生物安全柜的滤器必须按说明书规定的时间定期由专业人员更换，其它仪器设备也应根据实际需要清洁保养。2.4.5.3实验室仪器设备的维修更换仪器设备需要更新，需要离开实验室进行维修，或损坏需要更换，以及必须临时进入实验室使用，使用完毕后必须撤出实验室的贵重仪器，在撤出实验室之前必须以恰当的方式严格消毒，方可处理或重新投入使用。112.4.6意外情况处理2.4.6.1实验室意外事件的处理原则a)造成或可能造成实验室污染，但未造成人身伤害的实验室报告，由实验室负责人处理。例如实验过程中。由于标本、试剂益处溅落造成操作台或地面的污染等，应立即喷洒消毒液并覆盖浸透消毒液的纸巾，待消毒液彻底浸泡30分钟后，对污染的物品进行清理。清理后的物品高压灭菌。并填写生物安全2级实验室意外情况登记与处理记录表，实验室负责人应指导这些处理活动，并检查处理效果。b)实验室事故可能造成气溶胶污染，如压力容器或管道破裂、离心机事故等，应立即关闭实验室，张贴禁止入内的标识。用消毒液喷雾和紫外线照射污染的区域，24小时再进行终末消毒，实验室负责人除立即采取对应措施外，应向上级部门报告