基因工程训练题

1基因工程训练题1．下列有关限制性核酸内切酶的叙述中正确的是A．用限制性核酸内切酶切割一个DNA分子中部，获得一个目的基因时，被水解的磷酸二酯键有2个B．限制性核酸内切酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率就越大C．-CATG↓-和-G↓GATCC-序列被限制酶切出的粘性末端碱基数不同D．只有用相同的限制性核酸内切酶处理含目的基因的片段和质粒，才能形成重组质粒2.如图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述，正确的是（）Ａ．②的构建需要限制性核酸内切酶和ＤＮＡ聚合酶参与Ｂ．③侵染植物细胞后，重组Ｔｉ质粒整合到④的染色体上Ｃ．④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状Ｄ．⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异3．下图1表示含有目的基因的DNA片段和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4种限制性核酸内切酶切割的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。下列叙述正确的是A．上述4种限制性核酸内切酶中BamHⅠ、MboⅠ切出的粘性末端不相同B．BamHⅠ、MboⅠ酶切DNA后加DNA连接酶重新拼接，都能被MboⅠ再次切割C．MspⅠ、SmaⅠ切出的两个末端可以用DNA连接酶相互连接D．作为载体的质粒上，原本一定就有抗生素A抗性基因4．下图甲表示大肠杆菌质粒，图乙表示外源DNA，实线箭头表示限制性核酸内切酶PstⅠ的切割位点，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Ner表示新霉素抗性基因。下列叙述正确的是A．图甲中的质粒通常还具有控制质粒DNA转移的基因2B．用PstⅠ处理图乙所示的DNA片段后，导致2个磷酸二酯键断裂即可获得目的基因C．用PstⅠ酶切，加入DNA连接酶后得到的质粒-目的基因连接物都是符合要求的D．导入重组质粒的大肠杆菌在含新霉素或氨苄青霉素的培养基中均不能生长5.下列关于基因工程的说法正确的是A．基因工程的核心是将重组DNA分子导入受体细胞中B．利用受体细胞克隆出大量的目的基因也属于基因工程的范畴C．DNA连接酶的作用是将2个DNA分子片段的互补碱基连接起来D．构建重组DNA的质粒上有四环素的抗性基因，若受体细胞能在有四环素的培养基中生长，说明该受体细胞中一定含有目的基因6．已知限制性内切酶XmaⅠ和SmaⅠ的识别序列分别为C↓CCGGG和CCC↓GGG。有关这两种酶及应用的叙述，错误．．的是A．这两种酶作用的底物都是双链DNAB．DNA中出现这两种酶识别序列的几率不同C．XmaⅠ切割DNA形成的黏性末端是-GGCCD．使用这两种酶时需注意控制反应温度、时间等7．将乙肝抗原基因导人到酵母菌中，通过发酵能大量生产乙肝疫苗。下列叙述正确的是A．目的基因在酵母菌中表达出抗体]B．目的基因的表达需要线粒体提供能量C．用限制性核酸内切酶处理目的基因D．目的基因转录后即可用于翻译8．下图表示科学家利用小鼠皮肤细胞培养出多种细胞的过程。下列叙述正确的是A．过程①中细胞内发生了基因突变B．过程②中细胞内某些基因处于关闭状态C．过程②中细胞内核酸的种类和数目不变D．诱导性多能干细胞中没有同源染色体10．对下图所示粘性末端的说法错误．．的是A．甲、乙、丙粘性末端是由各自不同神经细胞、肝细胞等小鼠皮肤细胞导入诱导基因诱导性多能干细胞①②3的限制性核酸内切酶催化产生的B．甲、乙具相同的粘性末端可形成重组DNA分子，但甲、丙之间不能C．DNA连接酶作用位点在b处，催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成化学键D．切割甲的限制性核酸内切酶不能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子11．下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图（ampr为抗氨苄青霉素基因），其中①。④表示相关的操作步骤，甲、乙表示相关结构或细胞。PstI酶和SmaI酶切割基因后将产生不同的粘性末端。据图分析下列说法错误的是A．图中甲代表的是基因表达载体，乙可代表番茄细胞B．可用PstI酶和SmaI酶切割鱼的抗冻蛋白基因以避免目的基因末端发生任意连接C．若用PstI酶和SmaI酶切割质粒产生的DNA片段有3种D．图中③、④依次表示组织培养过程中番茄组织细胞的脱分化和再分化过程12．某线性DNA分子含有5000个碱基对（bp），分别用限制性核酸内切酶Ⅰ和酶Ⅱ完全切割后，得到的DNA片段大小如下表。限制性核酸内切酶Ⅰ和酶Ⅱ的识别序列和切割位点如下图所示。下列有关叙述正确的是酶Ⅰ切割产物（bp）酶Ⅱ切割产物（bp）2100、1400、15001900、200、700、500A．该DNA分子经过酶Ⅰ作用后产生4个游离的磷酸基团B．该DNA分子含有能同时被酶Ⅰ和酶Ⅱ切割的位点C．该DNA分子中酶Ⅱ的识别碱基序列有3个D．酶Ⅰ和酶Ⅱ切出的DNA片段不能相互连接13.科学家将人的生长激素原基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达。但在进行基因工程的操作过程中，需使用特定的限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制性核酸内切酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制性核酸内切酶II的识别序列和切点是—↓GATC—，据图回答：（1）过程①表示的是采取___________________的方法来获取目的基因。4（2）在构建基因表达载体过程中，应用限制性核酸内切酶(Ⅰ、Ⅱ)切割质粒，用限制性核酸内切酶(Ⅰ、Ⅱ)切割目的基因。用限制酶切割目的基因和运载体后形成的黏性末端通过___________原则进行连接。人的基因之所以能与大肠杆菌的DNA分子进行重组，原因是。（3）在过程③一般将受体大肠杆菌用_________处理，以增大的通透性，使含有目的基因的重组质粒容易进入受体细胞。（４）人体的生长激素原基因能在细菌体内成功表达出人的生长激素原是因为。写出目的基因导入细菌中表达的过程。（5）将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养基上倒置培养，将平板倒置的意义是__________________________。培养后得到如下图a的结果（黑点表示菌落），能够生长的细菌中已导入了，反之则没有导入；再将灭菌绒布按到培养基a上，使绒布表面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图b的结果（空圈表示与a对照无菌落的位置）。与图b空圈相对应的图a中的菌落表现型是，这些细菌中导入了________________。14．纤维素分子不能进入酵母细胞。为了使酵母菌能够利用环境中的纤维素为原料生产酒精，构建了含３种不同基因片段的重组质粒。下面是酵母菌转化及纤维素酶在工程菌内合成与运输的示意图。据图回答：（１）本研究构建重组质粒时可选用四种限制酶，其识别序列如下图。为防止酶切片段的自身连接，可选用的限制酶组合是或。Ａ．①②Ｂ．①③Ｃ．②④Ｄ．③④（２）设置菌株Ⅰ为对照，是为了验证__________________不携带纤维素酶基因。（３）纤维素酶基因的表达包括和过程。与菌株Ⅱ相比，在菌株Ⅲ、Ⅳ中参与纤维素酶合成和分泌的细胞器还有。5（４）在以纤维素为唯一碳源的培养基上分别培养菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，菌株不能存活，原因是。（５）酵母菌生成酒精的细胞部位是，产生酒精时细胞的呼吸方式是。在利用纤维素生产酒精时，菌株Ⅳ更具优势，因为导入的重组质粒含有，使分泌的纤维素酶固定于细胞壁，减少因培养液更新而造成的酶的流失，提高酶的利用率。15.将苏云金杆菌Bt蛋白的基因导入棉花细胞中，可获得抗棉铃虫的转基因棉，其过程如下图所示（注：农杆菌中Ti质拉上只有T－DNA片段能转移到植物细胞中）。（1）过程①需用同种＿＿＿＿酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切。为将过程②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来，应使用＿＿＿＿培养基。（2）过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让＿＿进入棉花细胞；除尽农杆菌后，还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养，目的是＿＿＿＿＿＿＿＿。（3）若过程④仅获得大量的根，则应在培养基中增加＿＿＿＿以获得芽；部分接种在无激素培养基上的芽也能长根，原因是＿＿＿＿＿＿＿＿。（4）检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是＿＿＿＿。种植转基因抗虫棉能减少＿＿＿的使用，以减轻环境污染。16.浙江大学农学院喻景权教授课题组研究发现，一种植物激素——油菜素内酯能促进农药在植物体内的降解和代谢。用油菜素内酯处理后，许多参与农药降解的基因（如Ｐ450基因和红霉素抗性基因）表达和酶活性都得到提高，在这些基因“指导”下合成的蛋白酶能把农药逐渐转化为水溶性物质或低毒甚至无毒物质，有的则被直接排出体外。某课题组进一步进行了如下的实验操作，请回答下列问题。（１）获得油菜素内酯合成酶基因的方法有、。步骤①用ＰＣＲ技术扩增基因时用到的耐高温酶通常是指；步骤②用到的酶有。（２）图中导入重组质粒的方法是，在导入之前应用处理受体细菌。（３）导入重组质粒２以后，往往还需要进行检测和筛选，可用制成探针，检测是否导入了重组基因，在培养基中加入可将含有目的基因的细胞筛选出来。（４）请你为该课题命名：。(5)请你说说该研究发现的生态学意义。。61-5:BDBAB6-10:BBBCC11C12A13（1）反转录法（人工合成法）（2）ⅠⅡ；碱基互补配对人的基因与大肠杆菌DNA的双螺旋结构相同（3）CaCl2细胞壁（4）共用一套（遗传）密码子生长激素基因→转录→ｍＲＮＡ→翻译→生长激素（5）防止皿盖冷却水倒流入培养基（合理即可得分）；普通质粒或重组质粒（缺一不给分）普通质粒或重组质粒抗氨苄青霉素、不抗四环素重组质粒14（１）Ｂ（或Ｃ）Ｃ（或Ｂ）（２）质粒ＤＮＡ和酵母菌基因组（３）转录翻译内质网、高尔基体（４）Ⅱ缺少信号肽编码序列，合成的纤维素酶不能分泌到胞外，细胞无可利用的碳源（５）细胞溶胶厌氧呼吸Ａ基因片段15.（１）限制性核酸内切选择（２）Ｔ－ＤＮＡ筛选获得Ｔ－ＤＮＡ片段的植物细胞（３）细胞分裂素浓度芽顶端合成的生长素向基部运输，促进根的分化（４）投放棉铃虫农药16.（１）从基因文库中获取人工合成目的基因或ＰＣＲ合成耐热的ＤＮＡ聚合酶限制酶和ＤＮＡ连接酶（２）转化法氯化钙溶液（３）红霉素抗性基因红霉素（４）油菜素内酯能否促进土壤中农药的分解