厦门大学2011年生物工程下游技术试卷

1一、问答题（5题，每题12分，共60分）：①已知某样品中含有如下5种多肽(图1)特征，其中每种多肽化合物均为四螺旋束结构，并由a、b、c和d的α螺旋多肽分别聚合而成。根据题意，简要回答下列问题:⑴选用梯度凝胶电泳（PG-PAGE）技术是否能有效分离这些混合多肽?并解释其理由。⑵选用IEF-PAGE技术是否能有效分离混合多肽?并解释其理由。②已知人类白细胞抗原的MHC-II类分子（HLA-Ⅱ）由（34kDa）和链(29kDa)组成。根据题意，选择哪些分离技术能有效分离和链,适合用于一级结构测定,并解释其理由。③图3是一幅分离混合蛋白质的中压液相色谱图。根据图示结果，简要回答下列问题：（1）预测图中选用何种分离技术分离混合蛋白质？并解释其理由。（2）解释图中曲线A-E的含意和用途。厦门大学《生物工程下游技术》课程试卷生命科学学院＿各＿系＿3＿年级各＿专业主考教师：黄河清试卷类型：（A卷/B卷）图1有机合成的四螺旋束卡通结构示意图图2，MHC-II类分子结构示意图2图3分离混合蛋白质的中压液相色谱图④拟进一步改善蛋白质组的分辩率，是否能把IEF/SDS-PAGE和IEF/PG-PAGE分离技术重新组合成SDS/PG-PAGE分离技术，并达到提高分离蛋白质组的效果？简要解释其理由。⑤已知某混合蛋白样品中含有铁蛋白、荧光蛋白酶和转铁蛋白。铁蛋白由H、L和M亚基组成，荧光蛋白酶由α和β亚基组成，转铁蛋白由单类型的亚基组成。根据题意，简要回答下列问题:(1)选用PAGE技术分离混合蛋白样品时,能获得几条蛋白层析带?并解释其理由.(2)选用SDS-PAGE技术分离混合蛋白样品时,能获得几条蛋白层析带?并解释其理由.(3)选用IEF/PG-PAGE技术分析混合蛋白样品时,能获得几条蛋白层析带?并解释其理由.二、问答题（2题，每题20分，共40分）⑥选用IEF-PAGE技术分离混合蛋白质过程中,如何设法提高目标蛋白质的分辨率?是否能选用IEF-PAGE技术分离核酸?并解释其理由.⑦已知某样品含有五种混合蛋白质,并已认定它们各自的蛋白质分子量、等电点和亚基类型均极为相似或接近.根据题意,简要回答下列问题:(1)如何证实上述的实验结果?(2)选择何种分离技术能有效分离样品中的混合蛋白质?并解释其理由.三、附加题（1题，每题5分，共5分）已知野生型DegP分子伴侣具有内切酶作用,能降解底物蛋白时形成的大寡聚体.底物不同NaCl浓度曲线3β-casein(酪蛋白).根据图意,简要回答下列问题:(1)简要描述DegP形成大寡聚体的基本条件,并解释其理由.(2)简要解释DegP形成大寡聚体的作用