动物性食品中有机磷农药测定的标准操作程序

动物性食品中有机磷农药测定的标准操作程序1.1适用范围本程序适用于用气相色谱仪法、气相色谱质谱联用仪对动物性样品（腌腊肉制品、腌腊水产品）中有机磷农药含量的测定。本程序适用于动物性样品（腌腊肉制品、腌腊水产品）中有机磷类农药残留的测定,本方法各种有机磷的检出限为0.01mg/kg。1.2原理试样经乙腈提取，冷冻、过滤，有机相浓缩液经SILICA/SPA固相萃取柱净化，用GC-FPD进行定性定量分析1.3仪器、设备与试剂1.3.1仪器设备1.3.1.1气相色谱仪，带Ms或者FPD检测器1.3.1.2色谱柱：DB-1701石英毛细管色谱柱（30m×320μm(i.d.)×0.25μm（膜厚））1.3.1.3组织捣碎机1.3.1.4旋转蒸发仪1.3.1.5具塞试管、平底烧瓶等玻璃仪器1.3.2试剂1.3.2.1乙腈：色谱纯1.3.2.2丙酮：色谱纯1.3.2.3二氯甲烷：色谱纯1.3.2.4氯化钠：分析纯1.3.2.5无水硫酸钠：分析纯，600℃灼烧3小时1.3.2.6固相萃取柱：SILICA/SPA固相萃取柱,规格为1000mg/6mL1.3.2.7各农药标准品：见表11.3.2.8标准储备液配制：称取各农药标准品各0.0500g,用丙酮溶解并定容至50mL，摇匀，浓度为1.00mg/mL。吸取上述溶液10.0mL于100mL的容量瓶中，用丙酮定容至刻度，摇匀，浓度为100ug/mL。1.3.2.9标准工作液的配制：按照需要吸取各农药标准储备液，10倍法稀释至所需浓度，有机磷农药稀释至1.0μg/mL，配制成混合标准工作溶液。1.4样品处理及分析1.4.1样品采集：样品采集的标准化是获得准确数据的基础，抽样必须是随机的和有代表性的，能反映出样品的真实情况。1.4.2样品的制备和保存：取一定量切碎混匀，四分法取样。所取的样品平均分为2份，1份供测定，另1份放置于-20℃冰箱中保存，备用。1.4.3提取：称取切碎或磨碎混匀的样品5.0g左右于50ml离心管中，加入25ml乙腈，用组织匀浆机匀浆1min左右，超声10min；冷冻2hr,然后采用-4℃冷冻8000rpm离心机离心5min，分出上清液加入5ml饱和氯化钠溶液混匀，冷冻2hr,然后采用-4℃冷冻8000rpm离心机离心5min，上清液过无水硫酸钠于50mL平底烧瓶中（注意充分脱水），45℃水浴中减压浓缩至3ml左右浓缩液，待净化。1.4.4净化：先用5mL乙腈淋洗液活化SILICA/PSA柱，然后将上述浓缩液转移到SILICA/PSA柱并收集，液面到达SPE柱筛板表面后，再10mL乙腈淋洗收集于50mL平底烧瓶中，45℃水浴中减压浓缩至近干，氮气吹干用1-2mL丙酮准确定容，待GC/FPD分析测定。1.4.5仪器条件1.4.5.1气相色谱参考条件色谱柱：DB-1701石英毛细管色谱柱（30m×320μm×0.25μm）；氮气：氦气（纯度＞99.99％）；程序升压：初始压力10Psi（10Psi＝68.966kPa），保持30min，40mL／min升至20Psi，保持10min；柱温（程序升温）：初始温度：50℃（保持0min），20℃／min升至200℃（保持20min），40℃／min升至240℃（保持10min）；进样口温度：250℃；FPD检测器温度250℃；尾吹气：30mL／min；进样方式：分流进样；分流比：5∶1；进样量：1μL。1.4.6标准色谱图及样品加标色谱图min05101520253035150pA200400600800100012001400FPD1B,(ZJ-2013\WRWF0165.D)didiweijia'anlinyixianjia'anlinmiexianlinjiabanlinyanghualeguoyibanlinlvzuolinjiuxiaolinleguo+dusipipiyingliulinjiajilikulinjiajimidinglindusipijiajiduiliulinmidinglinlin'anmalaliulinshamingliulinduiliulinshapulinbingxiulinyiliulinsanzuolindaqinliulinya'anliulinfushaliulinmin05101520253035150pA200400600800100012001400FPD1B,(ZJ-2013\WRWF0168.D)didiweijia'anlinyixianjia'anlinmiexianlinjiabanlinyanghualeguoyibanlinlvzuolinjiuxiaolinleguo+dusipipiyingliulinjiajilikulinjiajimidinglindusipijiajiduiliulinlin'anmalaliulinshamingliulinduiliulinshapulinbingxiulinyiliulinsanzuolindaqinliulinya'anliulinfushaliulin1.5计算按公式（1）计算。Rx＝A2×R1×V1×VA1×V2×G………………………………（1）其中式中：1.6实验室质量控制为了保证分析结果的准确，要求每批样品至少做一个加标回收实验和一份平行样品，添加有机磷浓度在0.05mg/kg左右，计算添加回收率，添加回收率应在60-120%范围之内。Rx——待测样品中农药浓度(mg/kg)R1——标准品中农药浓度(µg/mL)A2——待测样品中农药的峰高或峰面积A1——标准品中农药的峰高或峰面积V2——待测样品进样体积(µL)V1——标准品进样体积(µL)G——待测样品量(g)V——待测样品定容体积(mL)