凝血因子11活性测定

XiangyaHospitalofCentralsouthuniversity血液科血液研究室标准操作规程第1版/第1次编号：SOP-XT59编写人：张国平凝血因子11活性测定审核人：批准人：实施日期：2012/10/1第1页，共3页一、原理血浆中外源性凝血系统任一凝血因子的缺乏都可导致凝血活酶时间（PT）延长。乏因子血浆能用于确诊某种因子的缺乏，以及测定病人血浆某种因子的缺乏和缺乏程度。将不同乏因子血浆和病人血浆混合，测定凝血活酶时间，结果用不同稀释度的标准血浆，或正常血浆和乏因子血浆混合物制备的参考曲线来表示。缺乏某种特定因子的病人血浆不能用相应的乏因子血浆补偿，因此导致凝血活酶时间延长。将乏因子血浆和稀释的病人血浆；凝血酶原酶一起孵育，可使外源性凝血途径激活。记录从加凝血酶原酶到血块形成所需时间。二、标本准备用枸橼酸钠抗凝管采集新鲜静脉血约3ml（抗凝剂与血液比约为1:9），混匀后及时分离血浆（2500rpm/min离心10min），避免溶血，血浆应在2小时内进行测定，如果不能在2小时内完成检测，应将血浆低温保存（-在-20℃中保存2周）。三、试剂准备试剂存储于2-8℃冰箱，开盖后上机按图标，打开试剂装载画面。等待试剂装载位前方的信号灯变为绿色，然后将所需要的试剂托架插入仪器（确保试剂条码处于中缝中且转到左边。2）每瓶试剂的条码号、产品名称、批号会自动识别，选择“Vial#”旁边的图标，打开现有试剂瓶号，选择适当瓶号，点击图标确认，试剂位会显示试剂的名称。3）如有试剂显示为红色，取出带有要更换试剂的试剂托架，然后取下要更换的试剂瓶，更换新的试剂重新扫描条码四、操作步骤1.开机打开仪器开关和操作电脑，双击电脑桌面上的DestinyMAXGUI图标并输入登录密码，软件启动，在触摸屏上显示主菜单。2.开机检查和日常保养按图标打开保养菜单，进行开机检查和日常保养装载质控并测试1.按打开“试剂装载”窗口。将按要求复溶好的质控品装载到相应的质控/定标托架(1301)上，并将其插入到试剂装载轨道2,3,4，和5.2.按“工作列表”窗口按打开“QCandCalibration”命令窗口。3.装载的质控品会在质控/定标托架上显示。用当前装载的试剂、标准品和质控可进行的检测将以白色背景显示。点击“QC”栏相应检测处为。4.点击开始运行质控测试。3.装载标本，运行标本测试a)装载标本并测试1）质控通过后，在标本托架中插入标本，按进入工作列表。等待标本装载区域的信号灯变为绿色，然后将标本托架插入仪器。如果标本使用条码功能，确保标本条码处于中缝中，标本ID号可以通过条码自动读取；2）如要更改标本ID号，按标本ID区域，出现对话框后，按，删除不正确的ID后，输入正确的ID号，按确认。在项目测试栏，选择测试项目，按启动标本测试。4.测试完毕，重新清洗加样针并关机当所有标本测试完毕后，进入保养菜单。分别打开“Daily”和“Other”页面，进行试剂针和加样针的去污染。点击图标，用纱布加酒精清洁加样针头的外表面；点击图标数次，进行加样针的清洗。在主界面按图标退出操作软件并关闭操作电脑，此时关闭仪器电源即可。五、临床意义1.常参考值70%-120%2.1)诊断先天性或获得性因子缺乏症；2）鉴别诊断异常蛋白血症和蛋白质合成障碍；3）检测凝血酶原复合物的治疗；4）检测口服抗凝剂治疗情况;5)检测肝病时的肝功能。六、注意事项1、采血①防止组织损伤,避免外源因子进入。②尽快送检。③避免从输液管取血,以防稀释,用药。④抽血时的压力、时间长短会影响局部血液的浓缩，可影响血小板释放和某些凝血因子的活性。2、收集管要求：硅化玻璃管或塑料管，最好使用真空采集管，不推荐使用注射器3、抗凝剂选择①推荐用0.109mol/L(3.2%)枸橼酸钠(5H2O)，PH7.10-7.35,能有效阻止Ⅴ和Ⅷ降解。②抗凝剂与血液的比例为1:9。4、采集过程：①加压：使用止血带或不太紧的血压带，时间不超过1分钟。②最佳采集状态：病人处于休息，平静状态；静脉穿刺没有造成明显损伤。③舍弃第一毫升血或不使用第一管血④确保血液迅速均匀地流动⑤抽出的静脉血必须立即轻微上下颠倒3-4次，保证与枸橼酸钠充分的混合。不允许反复冷冻