分子生物学与基因工程试卷库(8)

分子生物学与的基因工程试题库（8）一、选择题（多选或单选）（每题2分，共计20分）1．非复制转座：()(a)复制转座子，即在原位点上留有一个拷贝(b)移动元件到一个新的位点，在原位点上不留元件(c)要求有转座酶(d)要求解离酶(e)涉及保守的复制，在这个过程中转座子序列不发生改变2.下面叙述哪些是正确的?()(a)C值与生物体的形态复杂性呈正相关(b)C值与生物体的形态复杂性呈负相关(c)每个门的最小C值与生物体形态复杂性是大致相关的3.HO基因是交配型转换所必需的，它：()(a)编码一个位点特异的DNA内切核酸酶(b)它的启动子中含有许多不同的功能元件(c)任何时候在任何酵母细胞中都表达(d)编码可以切割沉默基因座，而对MAT没作用的蛋白4.糖皮质激素类的甾醇受体()(a)是同源二聚体(b)所结合的DNA回文序列都不相同(c)结合的回文序列相同，但组成回文序列两段DNA间的序列不同(d)RXR受体通过形成异源二聚体后与同向重复序列结合(e)这类受体存在于细胞核中5.在阿黑皮素原中被识别和切割的氨基酸残基是()(a)赖氨酸和精氨酸(b)谷氨酰胺和甘氨酸(c)赖氨酸和天冬酰胺(d)a和b，其中a是丙氨酸，天冬氨酸或甘氨酸，b是丙氨酸或脯氨酸(e)天冬酰胺和赖氨酸6.下面关于真核生物翻译的叙述中，哪一个(哪些)是正确的?()(a)起始因子eIF只有同GTP形成复合物才起作用(b)终止密码子与细菌的不同(c)白喉毒素使EF—1ADP-核糖酰化(d)真核生物蛋白质的第一个氨基酸是修饰过的甲硫氨酸，在蛋白质合成完成之后，它马上被切除(e)真核生物的核糖体含有两个tRNA分子的结合位点7.P.Berg构建SV40二聚体时用了几种不同的酶，其中()的作用是制造隐蔽的5'端。(a)末端转移酶(b)λ外切核酸酶(c)外切酶Ⅲ(d)DNA连接酶8.Ⅲ型限制性内切核酸酶：()(a)由两个亚基组成，仅识别半甲基化位点。甲基化位点相对于限制位点的位置(上游或下游)决定了DNA是被甲基化还是被限制(b)不同亚基的识别位点甲基化和限制活性相互排斥：MS亚基促使甲基化，R亚基促使限制(c)由两个亚基组成，在识别位点附近识别并进行甲基化或限制(d)在错配修复中起关键作用，因为酶结合到DNA上是以结构扭曲为基础而不是序列错误识别(e)是光依赖型酶，是嘧啶二聚体进行“光反应”的关键酶，它们能使胸腺嘧啶二聚体间的共价键断裂9.末端转移酶是合成酶类，()(a)作用时不需要模板(b)在Co2+的存在下，可以在突出的3’末端延长DNA链(c)在C02+的存在下，可以在隐蔽的3’末端延长DNA链(d)上述说法有两种是正确的10.下列哪种克隆载体对外源DNA的容载量最大?()(a)质粒(b)黏粒(c)酵母人工染色体(YAC)(d)λ噬菌体(e)cDNA表达载体二、判断题（每题1分，共计10分）1．基因组DNA文库是含有某一生物中全部DNA序列随机克隆的克隆群，而cDNA文库是含有某一生物中所有表达基因随机克隆的克隆群。()2．脉冲凝胶电泳采用一个很强的电场来分离非常长的DNA分子，其原理在于迫使DNA分子根据长度的不同而具有不同的速度，并按大小顺序通过凝胶.()3．噬菌粒(phagemid)pUCll8／pUCll9载体是集质粒和丝状噬菌体有利特征于一身的载体，既能合成单链DNA,又能合成双链DNA。()4．有a、b、c三个质粒，因为a和b能够共存于一个细胞，a和c也可共存于同一个细胞，所以b和c一定能够共存于同一个细胞。()5．反转录酶能够以单链RNA或单链DNA为模板，在引物的引发下合成一条互补的DNA链。以RNA为模板合成的DNA是互补DNA(complementaryDNA，cDNA)。若是以DNA模板合成DNA，dNTP的掺人速度很低(约5个核苷酸／秒)，比T7DNA聚合酶的合成速度差不多低100倍。()6.DNA的复制需要DNA聚合酶和RNA聚合酶。()7.DNA中四个常用碱基自发脱氨基的产物，都能被识别出来。()8.因为类病毒不编码任何蛋白但又能够复制并在植物中造成严重的疾病，所以非常特殊。9.纠正下列一段话中的错误：()在E.coli中，通过RNA聚合酶同操纵基因的结合来起始转录。与转录起点碱基互补的dNTP同δ亚基结合，然后是第二个dNTP通过与第一个dNTP形成2'→5'磷酸二酯键而结合上。当生成的RNA链约有12个核苷酸长度时，β'亚基脱离DNA聚合酶，RNA链在全酶的作用下继续延伸。当DNA聚合酶在RNA链上遇到终止密码子时，转录作用停止。()10.G-U碱基负责fMet-tRNA对GUG的识别。()三、填空1．无义突变是将一种氨基酸的—-----—转变成——-----------密码子，结果使蛋白质链—---------—。一个碱基的插入或-----——叫—------—突变。由于三联—------—的移动，突变位置—---------—的整个氨基酸序列都会被改变。上述两种类型的突变(插入和缺失)所产生的蛋白质同-------------的不同，通常是完全----------------。2．酵母的Ty1元件是一种—-------—，它的转座需一段完整RNA转录物的合成，这个转录物又被复制成一个双螺旋DNA，随后被整合到一个新的染色体位置。3.黑皮素原是—-------—被切割以后可以产生很多活性蛋白质的一个例子。如—--—之类的RNA病毒也能合成类似的结构物。蛋白水解过程也涉及细胞外毒素的活性，如蜜蜂的—-----------—和动物激素的活性，如—------------—和—---------------—。4．—------—催化肽键的形成，一般认为这个催化反应是由核糖体大亚基上的—--—分子介导的。5．Cohen等在-------——年构建了第一个有功能的重组DNA分子。6.按照人们的意愿，改变基因中碱基的组成，以达到----------——的技术称为—-----—。四、简答题（每题3分，共计30分）1.PCR的基本原理是什么?用PCR扩增某一基因，必须预先得到什么样的信息?2.下面几种序列中你认为哪一个(哪些)最有可能是Ⅱ类酶的识别序列：GAATCG，AAATTT，GATATC，ACGGCA?为什么?3.为什么说翻译后氨基酸的化学修饰与蛋白质总体构象的形成有关?4.哪一种真核生物RNA不需要加工?5.MyoD是一种bHLH蛋白，对肌肉细胞的发育很重要，它的活性是如何被调控的?6.酵母mRNA的大小一般与基因的大小相一致。而哺乳动物mRNA比对应的基因明显小。为什么?7.在原核生物中，核心酶与DNA的松散结合和紧密结合之间存在一种平衡，为什么这比核心多聚酶自身形成游离与结合平衡更有利?8.羟胺对游离噬菌体和转化DNA都是高度特异的致变剂。它只与DNA中的C反应，使之转变成偶尔可与A错配的形式。(1)羟胺诱导的碱基替代是什么?(2)推测羟胺是否可回复自身诱导的突变?(3)羟胺可以回复5—溴尿嘧啶诱导的突变吗?(4)5—溴尿嘧啶可以回复羟胺诱导的突变吗?9.为什么一些细菌完成分裂的时间比细菌基因组的复制所需的时间要少?为什么在选择营养条件下，E.coli中可以存在多叉的染色体或多达4个以上的开环染色体拷贝，而正常情况下染色体是单拷贝的?10.氨基酸分子如何与正确的tRNA分子连接?五、设计分析题（每题5分，共计10分）1.除了uvrABC内切核酸酶修复、重组修复和SOS修复，细菌还具备一种对嘧啶二聚体更有效的修复系统。这个现象是在一个关于紫外线对细菌影响的调查中为了确定一个失控的数量而发现的。发现过程可以假设为：你与你的同事正试图利用紫外线作为诱变剂来分离大肠杆菌中的突变体，为得到足够的突变子，你觉得有必要使用对细菌杀伤率为99．99％的辐射剂量。比起你的同事你已经获得了更可靠的结果，而他要用10倍至100倍的辐射剂量才能获得同样的杀伤率。因为你常在晚上他离开后才做实验，所以他有点怀疑你结果的可靠性，他坚持你早上来做一个平行实验。当你们都得到同一结论时你们两人都感到惊奇，你有些懊恼，因为结果更接近你同事的结论；当你在晚上重复平行实验时，你的同事对结果感到很惊奇，结果正如你以前所描述的一样。你发现在下午要取得同样的杀伤率需要用比早上更高的辐射剂量，晴天比阴天需要的剂量高，你的实验室朝西，是什么因素影响着你的实验?2.蛋白质合成的整体准确性是很难衡量的，一方面，因为极端的准确和错误是罕见的，而且细胞似乎能很快地消灭它仃丁的错误；另一方面，技术上也有困难。比如，能够确切鉴定一种蛋白质到哪种程度，从概念上说，这和知道怎样提纯，鉴定是两码事。解决这个问题的一个聪明的方法是利用细菌鞭毛虫惟一蛋白：鞭毛蛋白(分子量为40000)。鞭毛蛋白有两个优点：首先，鞭毛(即鞭毛蛋白)能被从细菌上切下并用差速离心纯化，另外，鞭毛蛋白中不含Cys,因此允许利用Cys错误加入肽链进行灵敏的检测。为了放射性标记Cys，细菌在含35S042-(放射活性为5.0×103cpm／pmol)和过量的未标记Met的生长培养基中恰好生长一个世代(这种情况下无可测出的放射性进入Met)，把所得的鞭毛蛋白纯化并在SDS-聚丙酰胺凝胶电泳，发现从凝胶上回收的8μg鞭毛蛋白中含有35S带来的放射性为300cpm。请问：(1)在放射标记时期内合成的鞭毛蛋白分子中有百分之几含有Cys?假设在标记期间，鞭毛蛋白的总量加倍且鞭毛蛋白中Cys的特异活性与用来标记细胞的35SO42-了的特异活性是一样的。(2)在鞭毛蛋白中，Cys在Arg密码子CGU和CGC的位置错误地加入，在反密码子一密码子互相作用的过程中，出了什么错误才会导致以上结果?(3)假设在鞭毛蛋白中有18个Arg，而且所有Arg的密码子都相同，那么每一个敏感Arg密码子(CGU和CGC)错读的机率是多少?(4)假设上面算出的密码子出错率对所有氨基酸都同等适用，估计一下各长100、1000、10000个氨基酸蛋白质在合成中正确合成的分子占百分之几?六、问答题（10分）为什么大多数内切酶被称为“限制”酶？