低温对酶活性的影响

低温对酶活性的影响徐阳10084100生科081每一种酶只能在一定限度的温度范围内发生作用。低温时，酶的催化效率为0，但酶的活性保留。温度再回复到最适温度时，酶的催化效率逐渐提高。四种酶•在37'C下培养的大肠杆菌中的8-半乳糖苷酶•在70°C下培养的解糖热纤维菌中的8-葡萄糖苷酶•37°C下牛肝中的谷氨酸脱氢酶•75°C下的嗜热菌的ANI实验过程•加入溶入了50%（v/v）DMSO的基质，开始反应。•在低于-45'C时，用注射器注入基质并用预冷过的玻棒搅拌混匀；在0'C到-45'C用注射器搅拌。•根据温度测量时间不相同。高于0'C测定5-60分钟的值，而在-70'C则只是3-40个月。•反应在接近适应温度时用乙醇胺/DMSO/水（3:5:2的体积比）停止。葡萄糖苷酶实验过程•添加酶，开始反应。•在0°C时用不连续方法比较有酶和无酶的活力。•在15'C时用不连续方法测量Km。•温度低于-70°C时观察要多达一个月。•反应在接近适应温度时加60%（v/v）三佛乙酸停止。谷氨酸脱氢酶实验结果•此图表明了温度对两种葡糖苷酶活力的影响。•两种嗜热酶的阿累尼乌斯曲线在整个温度范围内基本是线状的，说明其活力是被抑制的。实验结果•此图表明了温度对两种GDH的影响。•两种嗜常温酶的阿累尼乌斯曲线在整个温度范围内基本是线状的，说明其活力是被抑制的。•嗜常温酶在40°C时不稳定的，且在其温度下，阿累尼乌斯曲线不再是线形。实验结果•斜坡的变化可能是速率从K2到K3变化的结果。在阿累尼乌斯曲线中酶活性于催化常数成正比实验结果•介电常数、离子强度、酸碱度等均可能受酶系统和温度的影响。•Km值同样也受酶系统于温度的影响•在低温下基质不是限制因素。实验猜想•猜想一：RNA核酸酶A在低于反应温度下失活。包围抑制剂与催化转化包含了可能受温度不同影响的不同过程。•然而，即使是这样情况，催化所需的灵活性远比抑制剂或基质的包围复杂的多，因此当抑制剂不可能被包围时催化作用不可能发生。•猜想二：可能不一定需要改变构型来变得轻微有活力。一个亚基态或者是构象可能会在低温下导致低活力。活力的存在或缺失依赖于酶。•但是这个假说意味着一个亚基态会导致基质的包围与催化转化。抑制剂的转变研究结果并不支持这个假说。分析讨论•这次实验利用极端嗜热菌的酶的稳定性使在比以往尝试的更大的温度范围内测量酶活力成为可能。在整个温度范围内嗜热酶的活化能是恒定的，意味着来自嗜热菌的酶并非特别适应在高温下活动，而不是在这个范围内被认为的更高的耐热性。这与当前的关于酶的稳定性、活性与动力学间互动关系的的一些看法相一致。再见谢谢观看