中药配方颗粒共性关键制剂技术研究资料

—1—中药配方颗粒共性关键制剂技术及其产业化的研究研究资料2010年3月—2—中药配方颗粒共性关键制剂技术及其产业化的研究研究资料中药配方颗粒的研制是在遵循中医药理论的基础上，运用现代科学知识和技术手段对中药饮片进行改革，因此制备工艺原则上根据传统汤剂的制备特点，以水为溶媒进行加热提取，最大限度地保留其有效成分。由于中药材的原料不同，植物药按药用部位分为根及根茎类、种子果实类、草类、叶类、花类、皮类、藤木类、树脂类、动物类、矿物类、加工类、其他类；按所含化学成分的不同分为糖类、苷类、木脂素类、挥发油类、生物碱类、鞣质及多元酚类、甾类、氨基酸、多肽、蛋白质和酶类、有机酸类、无机盐类、脂类及其他类。因此在提取、浓缩、喷雾干燥和制粒等制备工艺上不可能统一。为了进一步提高产品质量，使生产工艺更趋合理，从已生产的700余种中药配方颗粒中选有代表性的16种中药（化橘红、广藿香、佛手、高良姜、砂仁、陈皮、黄芪、大黄、何首乌、决明子、黄芩、菊花、葛根、羚羊角、血竭、天麻），根据所含化学成分进行分类，在原有研究基础上，针对各品种生产中存在问题，按所含成分的不同，分类进行制备工艺路线的筛选和工艺参数的优选，从中找出相同类成分在制备方法和工艺上的共性，研究方法基本按照国家药品监督局颁布的中药新药制备工艺研究的有关技术要求进行。由于研究对象、内容较多，除16个配方颗粒标准外，我们仅选取含苷类成分的中药配方颗粒共性关键制剂技术研究为代表，汇报本项目该领域研究思路与研究内容。第一部分含挥发性成分的中药配方颗粒制备工艺共性关键技术研究（一）质量标准研究1.1化橘红质量标准制定1.1.1化橘红配方颗粒质量标准HuajuhongPeifangkeli【来源】本品为芸香科植物化州柚Citrusgrandis‘Tomentosa’的未—3—成熟或近成熟的干燥外层果皮制成的配方颗粒。【炮制】应符合中国药典2005年版一部第51页化橘红【炮制】项下有关的规定。【制法】取化橘红饮片8570g，加15倍水煎煮三次，每次煎煮1.0小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.05～1.07（50℃）的清膏，喷雾干燥，加入适量糊精，混匀，制粒，干燥，制成1000g，即得。【性状】本品为棕色颗粒；气芳香，味苦，微辛。【鉴别】取本品粉末1g，加甲醇10ml，加热回流20分钟，放冷，滤过，滤液作为供试品溶液。另取柚皮苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.4mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2005年版一部附录VIB）试验，吸取上述两种溶液各10µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以醋酸乙酯-甲酸-水（10:2:3）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。【检查】本品应符合中国药典2005年版一部附录IC颗粒剂项下有关的各项规定。【浸出物】照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法测定，用65%乙醇作溶剂，不得少于10.0%。【含量测定】照高效液相色谱法（中国药典2005年版一部附录VID）测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-醋酸-水（35:4:61）为流动相；流速1.0ml/min；检测波长：283nm；柱温：40℃。理论板数按柚皮苷峰计算应不低于1000。对照品溶液的制备精密称取在110℃干燥至恒重的柚皮苷对照品20mg，置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取3ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml中含柚皮苷60μg）。供试品溶液的制备取本品粉末约0.5g，精密称定，置索氏提取器中，加石油醚（60～90℃）80ml，置水浴上加热回流3小时，弃去石油醚，药渣挥尽石油醚，加甲醇80ml，再置水浴上加热回流3小时至提取液无色，放冷，滤过，滤液置100ml量瓶中，用少量甲醇分数次洗涤容器，洗液滤入同一量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取5ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇—4—匀，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5µl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品以干燥品计算，每袋含柚皮苷（C27H32O14）不得少于40.0mg。【功能与主治】散寒，燥湿，利气，消痰。用于风寒咳嗽，喉痒痰多，食积伤酒，呕恶痞闷。【用法与用量】供配方用，遵医嘱。【规格】每袋装0.7g，相当于饮片6g。【贮藏】密封，置阴凉干燥处。【有效期】三年。—5—1.2广藿香质量标准制定1.2.1广藿香配方颗粒质量标准草案[名称]广藿香配方颗粒拼音名：Guanghuoxiangpeifangkeli英文名：HERBAPOGOSTEMONISPrescriptionGranules[来源]本品为唇形科植物广藿香Pogostemoncablin(Blanco)Benth．的干燥地上部分制成的配方颗粒。[炮制]应符合中国药典2005年版一部第31页广藿香(炮制)项下有关的规定[制法]取广藿香饮片，用水蒸汽蒸馏提取挥发油；药渣加水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.07-1.10(50℃)的清膏，喷雾干燥，加入适量糊精，混匀，制粒，干燥，喷入挥发油，混匀，密闭，分装，即得。[性状]本品为棕色颗粒；气香特异，味辛、微苦。[鉴别]取本品粉末1g，加乙醚20ml，冷浸过夜，滤过，滤液挥干，残渣加醋酸乙酯lml使溶解，作为供试品溶液。另取广藿香对照药材3g，同法制成对照药材溶液。再取百秋李醇对照品，加醋酸乙酯制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各2～5μl,分别点于同一硅胶Ｇ薄层板上，以石油醚(60-90℃)-乙酸乙酯－甲酸=10：1：0.05为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛浓硫酸溶液,加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点。[指纹图谱]（1）薄层色谱鉴别：取样品粗粉约5g，置30mL具塞三角烧瓶中，加石油醚20mL，密闭，超声10min，滤过，弃去石油醚液，药渣加甲醇5mL，超声15min，密闭，滤过，甲醇液作为供试品溶液。另取广藿香对照药材，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各10~20μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚－乙酸乙酯－甲醇－甲酸=7.5：1.8：1：0.125为展开剂，二次上行展开，每次展距9cm，取出，晾干，喷以5％三氯化铝乙醇液显色，于365nm下观察，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的颜色斑点。—6—（2）高效液相色谱法鉴别：照高效液相色谱法（《中国药典》2005年版一部附录ⅥD）测定。色谱条件：柱：agilentC8柱（4.6×150mm，5µm），流动相：甲醇－1％的冰醋酸水溶液（梯度洗脱），柱温：25℃，检测波长：254nm，分析时间50min，流速：1mL/min，进样量：5µL。表1-116广藿香药材HPLC指纹图谱流动相梯度时间（min）A（％）B（％）01585451000501000供试品溶液的制备：精密称取样品，先加石油醚80mL，索氏提取2h，至无色，弃去石油醚液，药渣再加甲醇80mL，索氏提取4h，至无色，滤过，浓缩，甲醇定容为每ml约含原药材量1g。用0.22µm微孔滤膜滤过，密封备用。对照药材溶液的制备：取药材适量，水提浓缩至干膏后按供试品溶液的制备方法同法制成每ml约含原药材量1g的溶液，作为对照药材溶液。测定法分别精密吸取对照药材溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪，所得供试品图谱与对照药材图谱进行比较分析。（3）气质联用鉴别：挥发油对照品溶液的制备：取挥发油，加适量乙醚稀释10倍，加适量无水硫酸钠进行脱水，作为对照品溶液。供试品溶液的制备：取广藿香配方颗粒2g，加乙醚9mL，密闭，超声2分钟，取上清夜，加适量无水硫酸钠进行脱水，作为供试品溶液。分析条件：HP-5MSCapilary30.0m×250μm×0.25μm(Agilent)；进样口温度250℃，接口温度280℃；载气为氦气，流速1.3mL/min；分流比60:1；MS:EI源(70ev)，双灯丝；扫描范围40-400m/z，扫描间歇1.0second；升温程序：柱温60℃，5℃／min程升至250℃，保持2min，可达到较好分离效果。分析：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1μl,注入气质联用色谱仪，所得供试品图谱与对照品图谱进行比较分析。[检查]（重金属、砷盐和农药残留量等）本晶应符合中国药典2005年版一部附录工C颗粒剂项下有关的各—7—项规定。[浸出物]照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法(中国药典2005年版一部附录XA)测定，用70％乙醇作溶剂，不得少于35.0％。[功能与主治]芳香化浊，开胃止呕，发表解暑。用于湿浊中阻，脘痞呕吐，暑湿倦怠，胸闷不舒，寒湿闭暑，腹痛吐泻，鼻渊头痛。[用法与用量]供配方用，遵医嘱。[注意][规格]每袋装1g，相当于饮片7g。[贮藏]密封，置阴凉干燥处。[有效期]1.2.2标准草案起草说明[名称、汉语拼音]本品是《中国药典》中收载的唇形科植物广藿香Pogostemoncablin(Blanco)Benth．的干燥地上部分制成的配方颗粒，故根据剂型特点，命名为广藿香配方颗粒。拼音名为GuanghuoxiangPeifangkeli[来源]本品为广藿香干燥地上部分根据提取工艺制成的配方颗粒。[性状]根据配方颗粒的实际情况描述。[鉴别]主要鉴别挥发油中的百秋李醇成分，能够被5％香草醛浓硫酸溶液显色。[指纹图谱](1)薄层色谱：同药材入选标准，采用超声法更快捷简便。(2)高效液相色谱鉴别:同药材入选标准。(3)气质联用：同药材入选标准。(4)红外光谱：因供试品批次不够，暂不列入标准。(4).1仪器条件与试剂Nicolet6700傅立叶变换红外光谱仪（美国）；Ez0MNIC8.0软件；YP-2压片机（上海）；光谱纯KBr粉末（英国BDH）；广藿香配方颗粒（广东一方制药有限公司）。(4).2样品制备将取2mg新开封的广藿香配方颗粒与200mg溴化钾混合研磨均匀，压片测定。(4).3测定方法将供试品的KBr压片置于FTIR仪的测定窗口固定位置，—8—光谱范围4000～400cm-1,分辨率4cm-1，扫描次数为32次。通过DTGS检测器检测样品的光吸收强度,绘制出相应样品的红外光谱图。(4).4实验结果广藿香中所含的化学成分主要有挥发油类、黄酮类、香豆素类和多糖。用FTIR法测出的红外光谱体现了各种成分的红外吸收。图1-40显示，虽然各供试品的批号不同，它们的红外光谱图极为相似,这说明广藿香配方颗粒所含的主要化学成分是相似的。各批号广藿香配方颗粒红外光谱图的波数灵敏度在86%的透过率见表9、图1-49、50。表1-117广藿香配方颗粒红外光谱透过率波数cm-13390.892929.051622.391516.281406.021237.781153.051079.321023.93透过率%24.93041.80739.57652.76636.71343.06026.23922.07617.602波数cm-1937.83861.28762.13706.79610.63576.37526.75444.12415.14透过率%48.39855.95051.88449.77542.40641.17743.20949.33849.933[检查]根据中国药典2005年版一部附录工C颗粒剂项下有关的各项规定进行。主要检查重金属、砷盐和农药残留量等。[浸出物]照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法(中国药典2005年版一部附录XA)测定。[功能与主治]同原药典标准。[用法与用量]根据配方颗粒的用途。[注意][规格]根据配方颗粒的折算量。[贮藏]根据配方颗粒的稳定性要求。图1-49广藿香配方颗粒红外光谱叠加图2025303540455055606570%透过率100020003000波数(cm-1)图