人高考生物第二轮专题复习课件植物细胞工程和动物细胞工程

二、动物细胞工程(第二课时)动物细胞培养动物细胞融合单克隆抗体胚胎移植核移植五、动物细胞培养从动物机体中取出相关的，将它分散成，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞。1、动物细胞培养概念：动物胚胎或幼龄动物的组织、器官如：肾、肺等细胞生命力旺盛，分裂能力强原理：细胞增殖使细胞和培养液充分接触组织单个细胞生长和增殖2、过程取的组织、器官细胞悬浮液酶贴满瓶壁的细胞单个细胞加入液动物胚胎或幼龄动物胰蛋白培养接触抑制原代培养1-10代细胞40—50代细胞(细胞株)传代培养无限传代（细胞系）用处理胰蛋白酶遗传物质不变遗传物质改变，能无限增殖（癌变）3、条件：1、无菌、无毒的环境2、营养3、温度和PH4、气体环境：（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）补充合成培养基中缺乏的物质36.5+0.5度；PH为7.2-7.4。O2作用：进行呼吸，提供能量CO2作用：维持培养液的PH值（95%空气和5%CO2）（葡萄糖、氨基酸、无机盐、微量元素、动物血清、血浆等。）有氧•（1）生产蛋白质生物制品：病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。•（2）获得大量自身的皮肤细胞，用于植皮。•（3）用于检测有毒物质•（4）用于生理、病理、药理等方面的研究，为治疗和预防疾病提供理论依据4、应用读下面一段文字资料，思考以下问题：长期以来，为了获得抗体，采用的是把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。用这种方法获得的抗体，不仅产量低，而且抗体的特异性差，纯度低，反应不够灵敏。人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。1、请从以上文字资料中找出单克隆抗体的概念2、怎样才能获得单克隆抗体？提示1：仅用细胞培养技术可行吗？提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？提示3：有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？用单个B细胞进行克隆，得到的细胞群能够分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体，这种抗体就叫做单克隆抗体。•实验目的:制备单克隆抗体.•实验原理：B淋巴细胞能产生抗体，骨髓瘤细胞能无限增殖，杂交瘤细胞既能产生抗体又能无限增殖。•实验材料：小白鼠•实验器材：培养皿、针筒等等。•实验过程：如下页根据阿根廷科学家米尔斯坦和德国科学家柯勒设计的实验方案:单克隆抗体制备过程注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞细胞融合、筛选杂交瘤细胞细胞培养筛选，继续培养足够数量的、能产生特定抗体的细胞群体外培养注射到小鼠腹腔单克隆抗体（1）为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合?（小鼠骨髓瘤细胞可以在体外培养条件下大量增殖，B淋巴细胞能够产生抗体，细胞的同源性越近，融合形成的杂种细胞越易成活。（2）骨髓瘤细胞是癌细胞吗?有无限增殖能力的细胞是肿瘤细胞，具有转移能力的肿瘤细胞，称为癌细胞，所以说，瘤细胞不能等于癌细胞。（3）整个制备过程为何要经过两次筛选?（第一次筛选得到杂交瘤细胞（多种），第二次需先在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。由于该细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的，所以产生的抗体必然是化学性质单一的，特异性强的单克隆抗体。这里的单克隆确有单个细胞克隆的含义，只不过克隆的不是B淋巴细胞，而是杂交瘤细胞。）胚胎移植技术试管动物（婴儿）培养过程卵细胞精子体外受精受精卵胚胎新个体母体子宫内孕育、产出核移植技术克隆羊培育过程黑面绵羊去核卵细胞白面绵羊乳腺细胞核细胞核移植重组细胞电脉冲刺激早期胚胎胚胎移植另一头绵羊的子宫妊娠、出生克隆羊多利植物组织培养和动物细胞培养的比较比较项目原理培养基结果培养目的植物动物细胞全能性细胞增殖固体营养物质植物激素液体营养物质动物血清培养成植株培养成细胞株细胞系快速繁殖培养无病毒植株获得细胞产品、细胞植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较比较项目融合原理方法诱导手段用途植物动物细胞膜流动性去壁原生质体融合细胞分散细胞融合物理化学物理化学失活病毒克服远缘杂交不亲合制备单克隆抗体1．下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。(1)技术是单克隆抗体技术的基础。(2)根据培养基的用途分类，图中HAT培养基属于培养基。(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是。(4)动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用诱导剂外，还可以采用。(5)选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的特点，又具备淋巴细胞的特点。(6)淋巴细胞是由动物体中的细胞分化、发育而来。(7)杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是。动物细胞培养选择特异性强，灵敏度高灭活的病毒在体外大量增殖分泌特异性抗体骨髓造血干细胞主动运输